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SENSIBILITE DES BACTERIES PATHOGENES AUX ...

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Examen direct : Les produits pathologiques sont systématiquement examinés à l’œil nu puis<br />

au microscope optique à l’état frais après étalement entre lame et les lamelles ; on procède<br />

ensuite à la coloration de Gram. On effectue la numération bactérienne (flore mono ou<br />

pluribacillaire) ; cette étape est essentielle pour apprécier la qualité du produit pathologique et<br />

orienter le choix des milieux.<br />

Il faudra aussi noter l’aspect des éléments cellulaires (polynucléaires plus ou moins altérés et<br />

éventuellement d’autres cellules), noter aussi l’abondance des germes (très rares, rares, peu<br />

nombreux, nombreux, très nombreux).<br />

Culture : les produits pathologiques sont ensemencés sur des milieux de cultures appropriés et<br />

incubés à l’étuve à 37°C pendant 24 H à 48 H .<br />

L’abondance des germes, observée au microscope sur état frais et après culture est confirmée<br />

par la culture de ces produits pathologiques.<br />

3.7.3. Identification :<br />

L’identification bactériologique a été basée sur l’examen des caractères morphologiques,<br />

culturaux, mais surtout biochimiques.<br />

3.7.3.1. Caractères morphologiques : Ces caractères sont distingués selon la technique de la<br />

coloration qui permet de classer les bactéries en cocci Gram positif, cocci Gram négatif,<br />

bacilles Gram positif et bacilles Gram négatif.<br />

3.7.3.2. Caractères culturaux : Après 24 à 48 h d’incubation, les bactéries sont identifiées<br />

suivant la culture et/ou l’aspect des colonies sur des milieux de culture spécifiques.<br />

3.7.3.3. Caractères biochimiques : Staphylococcus aureus a été identifié grâce à son<br />

caractère « mannitol positif » qui lui permet de faire virer le Chapman en jaune, il est catalase<br />

(+), coagulase (+) et protéines A positif.<br />

Pseudomonas aeruginosa est identifié par sa capacité à faire virer la gélose ordinaire en vert<br />

par la production de pyoverdine. Les entérobactéries sont identifiées par la galerie API 20E.<br />

Après inoculation de la suspension bactérienne dans la galerie, la lecture se fait après 24 H à<br />

48 H d’incubation à 37°C à l’étuve. Les germes sont identifiés à partir du tableau<br />

d’identification accompagnant chaque système API ou du catalogue analytique ou encore du

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