TITRE THESE

1.2.2.3 Les méthodes d’étude des antibiotiques et des antifongiques
‣ La méthode de dilution
Une série de milieux de culture (liquides ou solides) est réalisée avec une concentration
croissante des solutions à tester. On ensemence ensuite chaque milieu avec une quantité
connue de microorganismes, puis on incube 18 à 24 h à 37 °C.
Après incubation la concentration minimale inhibitrice est indiquée par le milieu qui
contient la plus faible concentration des solutions à tester et où aucune croissance n’est
visible.
‣ La méthode de diffusion
Des disques blancs de 6 mm de diamètre sont imprégnés des solutions à tester. Les disques
sont ensuite déposés à la surface d’un milieu gélosé préalablement ensemencé avec une
culture des microorganismes à étudier.
Après une incubation de 18 à 24 h à 37 °C, les disques s’entourent de zones d’inhibition
circulaires correspondant à une absence de culture.
Les diamètres des zones d’inhibition dépendent uniquement de la sensibilité du germe.
‣ La méthode bioautographique
Elle consiste à la dilution rapide des substances antimicrobiennes ainsi qu’à l’isolement des
constituants actifs à travers une cible. Les chromatogrammes sont recouverts d’un milieu de
culture incorporé de microorganismes.
Après une incubation de 24 h à 37 °C un révélateur approprié permet d’observer l’activité.