Coronavirus EP1694829B1

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Cedex 15 ; il contient la séquence d’ADNc correspondant à la région située entre l’ORF-M et l’ORF-N de la souche
de SARS-CoV issue du prélèvement répertorié sous le n° 031589 et prélevée à Hanoi, telle que définie ci-dessus,
laquelle séquence correspondant aux nucléotides des positions 26977 à 28218 (SEQ ID NO :20), en référence à
la séquence Genbank n° d’accès AY274119.3,
- le plasmide dénommé SARS-N, compris dans la souche bactérienne déposée sous le n° I-3048, le 5 juin 2003,
auprès de la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex
15 ; il contient l’ADNc codant pour la protéine N de la souche de SARS-CoV issue du prélèvement répertorié sous
le n° 031589, telle que définie ci-dessus, laquelle séquence correspondant aux nucléotides des positions 28054 à
29430 (SEQ ID NO :38), en référence à la séquence Genbank n° d’accès AY274119.3 ; ainsi ce plasmide comprend
un insert de séquence SEQ ID NO :38 et est compris dans une souche bactérienne qui et qu’il a été déposée sous
le n° I-3048, le 5 juin 2003, auprès de la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, 25 rue du Docteur
Roux, 75724 Paris Cedex 15,
- le plasmide dénommé SARS-5’NC, compris dans la souche bactérienne déposée sous le n° I- 3124, le 7 novembre
2003, auprès de la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris
Cedex 15 ; il contient l’ADNc correspondant à l’extrémité 5’non codante du génome de la souche de SARS-CoV
issue du prélèvement répertorié sous le n° 031589, telle que définie ci-dessus, laquelle séquence correspondant
aux nucléotides des positions 1 à 204 (SEQ ID NO :39), en référence à la séquence Genbank n° d’accès AY274119.3,
- le plasmide dénommé SARS-3’NC, compris dans la souche bactérienne déposée sous le n° I-3123 le 7 novembre
2003, auprès de la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris
Cedex 15. ; il contient la séquence d’ADNc correspondant à l’extrémité 3’non codante du génome de la souche de
SARS-CoV issue du prélèvement répertorié sous le n° 031589, telle que définie ci-dessus, laquelle séquence
correspondant à celle située entre le nucléotide en position 28933 à 29727 (SEQ ID NO :40), en référence à la
séquence Genbank n° d’accès AY274119.3, se termine par une série de nucléotides a.,
- le plasmide d’expression dénommé pIV2.3N, contenant un fragment d’ADNc codant pour une fusion C-terminale
de la protéine N (SEQ ID NO : 37) avec une étiquette polyhistidine,
- le plasmide d’expression dénommé pIV2.3S C , contenant un fragment d’ADNc codant pour une fusion C-terminale
du fragment correspondant aux positions 475 à 1193 de la séquence en acides aminés de la protéine S (SEQ ID
NO : 3) avec une étiquette polyhistidine,
- le plasmide d’expression pIV2.3S L , contenant un fragment d’ADNc codant pour une fusion C-terminale du fragment
correspondant aux positions 14 à 1193 de la séquence en acides aminés de la protéine S (SEQ ID NO : 3) avec
une étiquette polyhistidine,
- le plasmide d’expression dénommé pIV2.4N, contenant un fragment d’ADNc codant pour une fusion N-terminale
de la protéine N (SEQ ID NO : 3) avec une étiquette polyhistidine,
- le plasmide d’expression dénommé pIV2.4S C ou pIV2.4S 1 , contenant un insert codant pour une fusion N-terminale
du fragment correspondant aux positions 475 à 1193 de la séquence en acides aminés de la protéine S (SEQ ID
NO : 3) avec une étiquette polyhistidine, et
- le plasmide d’expression dénommé pIV2.4S L contenant un fragment d’ADNc codant pour une fusion N-terminale
du fragment correspondant aux positions 14 à 1193 de la séquence en acides aminés de la protéine S (SEQ ID
NO : 3) avec une étiquette polyhistidine.
[0058] Selon une disposition avantageuse du plasmide d’expression tel que défini ci-dessus, il est compris dans une
souche bactérienne qui a été déposée sous le n° I- 3117, le 23 octobre 2003, auprès de la Collection Nationale de
Cultures de Microorganismes, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex 15.
[0059] Selon une autre disposition avantageuse du plasmide d’expression tel que défini ci-dessus, il est compris dans
une souche bactérienne qui a été déposée sous le n° I- 3118, le 23 octobre 2003, auprès de la Collection Nationale de
Cultures de Microorganismes, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex 15.
[0060] Selon une autre disposition du plasmide d’expression tel que défini ci-dessus, il est compris dans une souche
bactérienne qui a été déposée à la CNCM, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex 15 sous les numéros suivants :
a) souche n° I- 3118, déposée le 23 octobre 2003,
b) souche n° I- 3019, déposée le 12 mai 2003,
c) souche n° I- 3020, déposée le 12 mai 2003,
d) souche n°I-3059, déposée le 20 juin 2003,
e) souche n° I-3323, déposée le 22 novembre 2004,
f) souche n° I-3324, déposée le 22 novembre 2004,
g) souche n° I-3326, déposée le 1" décembre 2004,
h) souche n° I-3327, déposée le 1 er décembre 2004,
i) souche n° I-3332, déposée le 1" décembre 2004,
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