紫阳富硒茶中茶多糖、碱溶性茶蛋白结构形貌及硒 ... - 陕西师范大学学报

第 40 卷 第 1 期 陕 西 师 范 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) Vol.40 No.12012 年 1 月 JournalofShaanxiNormalUniversity (NaturalScienceEdition) Jan.,2012文 章 编 号 :16724291(2012)01007205紫 阳 富 硒 茶 中 茶 多 糖 、 碱 溶 性 茶 蛋 白结 构 形 貌 及 硒 赋 存 形 态焦 自 明 1, 杨 建 雄2, 张 小 飞 1, 窦 佩 娟 1, 刘 小 乔 2, 郭 琦1(1 陕 西 师 范 大 学 物 理 学 与 信 息 技 术 学 院 ;2 陕 西 师 范 大 学 生 命 科 学 学 院 , 陕 西 西 安 710062)摘 要 : 研 究 了 紫 阳 富 硒 茶 硒 赋 存 形 态 , 用 原 子 力 显 微 镜 观 测 紫 阳 富 硒 茶 中 茶 多 糖 、 碱 溶 性 茶 蛋 白的 结 构 形 貌 . 结 果 表 明 : 茶 多 酚 硒 占 总 硒 的 0.89%, 蛋 白 硒 占 总 硒 的 60.12%, 多 糖 硒 占 总 硒 的 18.06%, 蛋 白 质 组 分 中 又 以 碱 溶 性 蛋 白 结 合 硒 含 量 最 高 , 达 到 23.81%; 观 测 表 明 , 茶 多 糖 为 多 侧 支 的树 枝 状 结 构 , 碱 溶 性 蛋 白 主 要 以 大 小 比 较 均 一 的 杆 状 或 球 状 结 构 存 在 .关 键 词 : 紫 阳 富 硒 茶 ; 硒 ; 赋 存 形 态 ; 原 子 力 显 微 镜中 图 分 类 号 :R151.2 文 献 标 志 码 :A犛 狋 狉 狌 犮 狋 狌 狉 犲 犿 狅 狉 狆 犺 狅 犾 狅 犵 狔 狅 犳 狋 犲 犪 狆 狅 犾 狔 狊 犪 犮 犺 犪 狉 犻 犱 犲 、 犪 犾 犽 犪 犾 犻 狊 狅 犾 狌 犫 犾 犲 狆 狉 狅 狋 犲 犻 狀犪 狀 犱 犱 犻 狊 狋 狉 犻 犫 狌 狋 犻 狅 狀 狅 犳 犛 犲 犾 狀 犻 狌 犿 犻 狀 狋 犲 犪 犳 狉 狅 犿 犣 犻 狔 犪 狀 犵JIAOZiming 1 ,YANGJianxiong 2 ,ZHANG Xiaofei 1 ,DOU Peijuan 1 ,LIU Xiaoqiao 2 ,GUO Qi 1(1ColegeofPhysicsandInformationTechnology,ShaanxiNormalUniversity,2ColegeofLifeSciences,ShaanxiNormalUniversity,Xi′an710062,Shaanxi,China)犃 犫 狊 狋 狉 犪 犮 狋 :ThisstudyistoinvestigatethecombinedformsofseleniuminteafromZiyangcounty.Thestructureofteapolysaccharideandalkalisolubleproteinareinvestigatedbyatomicforcemicroscopy(AFM).Theresultsshowedthattheratioofseleniuminteapolyphenolis0.89%intotalseleniumcomtent;theratiooftheseleniuminteaproteinandinteapolysaccharideis60.12% and18.06%,respectively.Atthesametime,Alkalisolubleproteinseemstocontainthehighestamountofboundselenium,contributingto23.81% oftotalseleniumcontent.Itisfoundthatteapolysaccharideon micashaped Multilateralbranchlikestructureby AFM,whilethealkalisolubleproteinexistedintheformofsizecomparisonuniformleverorsphericalstructure.犓 犲 狔 狑 狅 狉 犱 狊 :enrichedteaofziyang;selenium;organicalyboundselenium;atomicforcemicroscopy硒 是 人 体 必 需 的 微 量 元 素 之 一 , 可 以 提 高 机 体[1]免 疫 力 , 对 克 山 病 、 大 骨 节 病 、 糖 尿 病 、 心 脑 血 管 疾病 、 不 育 症 、 艾 滋 病 、 癌 症 、 白 内 障 等 40 多 种 疾 病 的预 防 和 治 疗 有 重 要 作 用 [23] . 我 国 三 分 之 二 地 区 人 群缺 硒 , 而 通 过 食 物 链 补 硒 是 解 决 缺 硒 的 主 要 途 径 .无 机 硒 以 被 动 扩 散 方 式 通 过 肠 壁 吸 收 , 进 入 肝脏 转 化 后 才 可 被 利 用 , 因 而 毒 性 较 大 , 补 硒 后 常 有 不适 , 应 激 反 应 较 强 , 且 易 引 起 硒 中 毒 . 有 机 硒 以 主 动运 转 机 制 通 过 肠 壁 吸 收 , 与 无 机 硒 相 比 , 有 毒 性 低 、生 物 利 用 率 高 等 优 点 [4] . 寻 找 天 然 有 机 硒 , 并 将 其 作收 稿 日 期 :20110519基 金 项 目 : 国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目 (20575039).第 一 作 者 : 焦 自 明 , 男 , 硕 士 研 究 生 , 主 要 研 究 方 向 为 天 然 产 物 的 分 离 鉴 定 及 功 能 评 价 .Email:jiao925@163.com. 通 信 作 者 : 杨 建 雄 , 男 , 教 授 .Email:jxyang @snnu.edu.cn.

第 1 期 焦 自 明 等 : 紫 阳 富 硒 茶 中 茶 多 糖 、 碱 溶 性 茶 蛋 白 结 构 形 貌 及 硒 赋 存 形 态 73为 补 硒 的 来 源 , 已 经 成 为 国 内 外 研 究 的 一 大 热 点 . 茶树 是 一 种 能 富 集 硒 的 作 物 , 能 将 吸 收 的 无 机 硒 转 化为 有 机 硒 , 因 此 研 究 开 发 富 硒 茶 极 具 现 实 意 义 .陕 西 省 紫 阳 县 是 我 国 仅 有 的 几 个 高 富 硒 地 区 之一 , 年 产 2200t 富 硒 茶 , 但 利 用 率 较 低 , 浪 费 较 严重 . 目 前 对 天 然 的 富 硒 茶 中 硒 的 赋 存 形 态 研 究 较 少 .本 文 作 者 研 究 紫 阳 富 硒 茶 中 硒 的 赋 存 形 态 , 并 从 其中 提 取 有 机 硒 产 品 , 探 索 其 利 用 价 值 和 经 济 效 益 , 旨在 为 有 机 硒 药 品 及 保 健 品 开 发 提 供 参 考 .1 材 料 和 方 法1.1 材 料 与 试 剂紫 阳 富 硒 茶 为 紫 阳 县 闽 秦 茶 叶 有 限 公 司 产 品 , 由紫 阳 县 茶 叶 局 提 供 . 标 准 品 为 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限公 司 产 品 (F20090918) 提 供 . 水 中 硒 标 准 溶 液 为 中 国计 量 科 学 研 究 所 产 品 (GBW(E)080215, 样 品 编 号 :10031) 提 供 . 其 他 试 剂 为 国 产 分 析 纯 或 国 产 优 级 纯 .1.2 仪 器CF16RX 高 速 离 心 机 ( 日 本 日 立 公 司 ),TU1810紫 外 可 见 分 光 光 度 计 ( 北 京 普 析 通 用 仪 器 有 限 责 任公 司 ),E-52AA 型 旋 转 蒸 发 器 ( 上 海 亚 荣 生 化 仪 器厂 ),Alpha4 真 空 冷 冻 干 燥 机 ( 德 国 Christ 公 司 ),AFS—810 双 道 原 子 荧 光 光 光 度 计 ( 北 京 吉 天 仪 器有 限 公 司 ),SPM 9500J3 原 子 力 显 微 镜 ( 日 本 岛津 ), 电 热 板 , 磁 力 搅 拌 器 .1.3 茶 多 酚 提 取称 取 茶 叶 2g 加 入 40% 的 乙 醇 20mL,40℃ 搅拌 提 取 40min, 过 滤 , 重 复 2 次 , 合 并 收 集 滤 液 .取 一 定 量 的 浸 提 液 , 按 沉 淀 剂 与 茶 叶 质 量 比 为6.5∶20 加 入 沉 淀 剂 (AlCl 3与 ZnSO 4质 量 比 为 1∶1),用 1mol/L 的 NaHCO 3调 pH 至 6.5, 静 置 60min,6000r/min 离 心 10 min, 沉 淀 , 再 用 1 mol/L HCl( 盐 酸 体 积 与 茶 叶 质 量 比 为 3.5∶1) 转 溶 , 静 置 10min, 最 后 用 等 体 积 的 乙 酸 乙 酯 萃 取 2 次 , 合 并 酯 相并 低 温 干 燥 , 所 得 茶 多 酚 制 剂 用 于 测 定 茶 多 酚 和 硒的 含 量 [5] .1.4 茶 蛋 白 提 取1.4.1 水 溶 性 蛋 白 质 提 取 称 取 茶 叶 2g, 研 磨 后按 液 固 比 1∶10 加 入 石 油 醚 , 在 磁 力 搅 拌 器 上 脱 脂脱 色 30min,4℃ 下 5000r/min 离 心 15min, 去 除上 清 液 , 重 复 3 次 , 将 沉 淀 挥 干 石 油 醚 后 , 用 60 mL双 蒸 水 40℃ 搅 拌 提 取 16h,4℃ 下 10000r/min 离心 15min, 将 上 清 液 转 出 用 双 蒸 水 定 容 至 100 mL,用 于 测 定 水 溶 性 蛋 白 质 和 硒 含 量 .1.4.2 盐 溶 性 蛋 白 质 提 取 在 水 溶 性 蛋 白 提 取 后的 残 渣 中 加 0.5mol/LNaCl 溶 液 60mL,40℃ 搅 拌提 取 16h,4℃ 下 10000r/min 离 心 15min, 将 上 清液 转 出 用 0.5mol/L NaCl 溶 液 定 容 至 100 mL, 用于 测 定 盐 溶 性 蛋 白 质 和 硒 含 量 .1.4.3 醇 溶 性 蛋 白 质 提 取 在 盐 溶 性 蛋 白 提 取 后的 残 渣 中 加 75% 乙 醇 60mL,40℃ 搅 拌 提 取 16h,4℃ 下 10000r/min 离 心 15 min, 将 上 清 液 转 出 用75% 乙 醇 定 容 至 100 mL, 用 于 测 定 醇 溶 性 蛋 白 质和 硒 含 量 .1.4.4 碱 溶 性 蛋 白 质 提 取 在 醇 溶 性 蛋 白 提 取 后的 残 渣 中 加 0.1mol/L 的 NaOH 溶 液 60mL,40℃搅 拌 提 取 16h,4℃ 下 10000r/min 离 心 15min, 将上 清 液 转 出 用 0.1mol/L 的 NaOH 溶 液 定 容 至 100mL, 用 于 测 定 碱 溶 性 蛋 白 质 和 硒 含 量 .1.5 茶 多 糖 的 提 取称 取 茶 叶 2g, 研 磨 后 按 液 固 比 1∶10 的 比 例 加入 石 油 醚 , 在 磁 力 搅 拌 器 上 脱 脂 脱 色 30 min,4℃ 下5000r/min 离 心 15 min 后 , 去 除 上 清 液 , 重 复 3次 , 挥 干 石 油 醚 后 , 加 入 60 mL 双 蒸 水 , 在 沸 水 浴中 提 取 2.5h,4500r/min 离 心 10 min, 取 上 清液 . 再 重 复 2 次 , 合 并 3 次 提 取 液 即 得 水 溶 性 多糖 提 取 液 .将 水 溶 性 多 糖 提 取 液 浓 缩 至 一 定 体 积 , 再 加 入4 倍 体 积 95% 乙 醇 , 边 加 边 搅 拌 , 静 止 6h,4500r/min 离 心 10min 后 , 弃 去 上 清 液 , 沉 淀 加 入 适 量 水充 分 溶 解 后 , 加 入 0.25 体 积 的 Sevage 试 剂 , 剧 烈 振荡 5min, 静 置 2h,5000r/min 离 心 5min. 取 上 层水 相 , 再 加 入 0.25 体 积 的 Sevage 试 剂 重 复 脱 蛋白 4 次 .取 出 水 相 , 测 量 其 体 积 后 , 加 入 2 倍 体 积 的95% 乙 醇 ,4500r/min 离 心 10min, 弃 去 上 清 液 , 沉淀 用 少 量 水 复 溶 , 冷 冻 干 燥 后 所 得 茶 多 糖 制 剂 用 于测 定 茶 多 糖 和 硒 含 量 .1.6 茶 多 酚 、 蛋 白 质 、 茶 多 糖 及 硒 的 含 量 测 定[6]茶 多 酚 含 量 测 定 采 用 福 林 酚 法 , 蛋 白 质 含 量测 定 采 用 考 马 斯 亮 蓝 G250 染 色 法 , 茶 多 糖 含 量 测[7]定 采 用 苯 酚 硫 酸 比 色 法 , 硒 含 量 测 定 采 用 氢 化 物原 子 荧 光 光 谱 法 .

74 陕 西 师 范 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 第 40 卷1.7 茶 多 糖 的 原 子 力 显 微 镜 制 样 与 观 测样 品 配 制 成 1μg/mL 的 水 溶 液 , 在 磁 力 搅 拌 器上 搅 拌 均 匀 , 取 5μL 滴 在 新 剥 离 的 云 母 表 面 上 , 室温 空 气 中 干 燥 后 置 于 原 子 力 显 微 镜 上 测 试 . 图 像 均在 Tapping 模 式 下 获 得 , 测 试 在 室 温 和 大 气 环 境 中进 行 , 湿 度 为 50%~60%. 探 针 为 Si 3N 4, 用 200μm长 的 微 悬 臂 , 力 弹 性 常 数 为 0.12N/m [8] . 原 子 力 显微 镜 图 像 的 形 态 学 特 征 ( 如 高 度 、 宽 度 等 ) 采 用 原 子力 显 微 镜 所 附 软 件 进 行 分 析 .1.8 碱 溶 性 蛋 白 质用 0.2mol/LpH 为 7.5 的 磷 酸 缓 冲 液 溶 解 配制 250μg/mL 的 碱 溶 性 蛋 白 溶 液 , 在 磁 力 搅 拌 器 上搅 拌 10min 后 , 用 缓 冲 液 稀 释 50 倍 , 取 5μL 滴 在新 剥 离 的 云 母 表 面 上 , 室 温 空 气 中 干 燥 后 , 置 于 原 子力 显 微 镜 上 测 试 [9] . 图 像 均 在 Tapping 模 式 下 获 得 ,测 试 在 室 温 和 大 气 环 境 中 进 行 , 湿 度 为 60% ~70%. 探 针 为 Si 3N 4, 用 125μm 长 的 微 悬 臂 , 力 弹 性常 数 为 0.12N/m [10] . 原 子 力 显 微 镜 图 像 的 形 态 学特 征 ( 如 高 度 、 长 度 、 宽 度 等 ) 采 用 原 子 力 显 微 镜 所 附表 2软 件 进 行 分 析 .2 结 果 与 讨 论2.1 茶 多 酚 含 硒 量茶 多 酚 含 量 及 其 含 硒 量 见 表 1. 表 1 结 果 显 示 ,紫 阳 富 硒 茶 中 茶 多 酚 硒 占 0.89%, 说 明 茶 多 酚 能 结合 一 定 量 的 硒 , 但 非 主 要 的 赋 存 形 态 .提 取 率 /%表 1茶 多 酚 含 量 及 其 含 硒 量犜 犪 犫 .1 犜 犲 犪 狆 狅 犾 狔 狆 犺 犲 狀 狅 犾 犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋 犪 狀 犱犮 狅 狀 狋 犪 犻 狀 犻 狀 犵 狊 犲 犾 狀 犻 狌 犿 犪 犿 狅 狌 狀 狋纯 度 /%硒 含 量 /( μ g·g -1 )硒 占 总 硒比 例 / %12.350 60.050 0.036 0.8902.2 不 同 种 类 蛋 白 质 的 含 硒 量不 同 种 类 蛋 白 质 组 分 及 其 含 硒 量 见 表 2. 由 表 2可 知 , 紫 阳 富 硒 茶 4 种 蛋 白 质 中 均 含 有 硒 , 且 碱 溶 性蛋 白 > 水 溶 性 蛋 白 > 醇 溶 性 蛋 白 > 盐 溶 性 蛋 白 , 分 别占 总 硒 的 23.81%、19.05%、9.52%、7.74%, 蛋 白 质硒 占 富 硒 茶 总 硒 的 60.12%, 为 硒 的 主 要 赋 存 形 态 .不 同 种 类 蛋 白 质 组 分 及 其 含 硒 量犜 犪 犫 .2 犘 狉 狅 狋 犲 犻 狀 犮 狅 犿 狆 狅 狊 犻 狋 犻 狅 狀 犪 狀 犱 狊 犲 犾 犲 狀 犻 狌 犿 犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋 狊 狅 犳 狏 犪 狉 犻 狅 狌 狊 狆 狉 狅 狋 犲 犻 狀 狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊样 品 蛋 白 质 /mg 提 取 率 /% 蛋 白 质 质 量 分 数 / % 硒 含 量 /( μ g·g -1 ) 硒 占 总 硒 比 例 / %水 溶 性 蛋 白 39.84 1.992 14.13 4.82 19.05盐 溶 性 蛋 白 31.22 1.561 11.07 2.50 7.74醇 溶 性 蛋 白 55.66 2.783 19.74 1.72 9.52碱 溶 性 蛋 白 155.28 7.764 55.06 1.55 23.81总 可 溶 性 蛋 白 282.00 14.100 - - 60.122.3 茶 多 糖 的 含 硒 量茶 多 酚 含 量 及 其 含 硒 量 见 表 3. 表 3 结 果 显 示 ,表 3紫 阳 富 硒 茶 中 茶 多 糖 硒 占 18.06%, 说 明 富 硒 茶 中茶 多 糖 能 结 合 一 定 量 的 硒 , 也 是 硒 的 主 要 赋 存 形 态 .茶 多 糖 含 量 及 其 含 硒 量犜 犪 犫 .3 犜 犲 犪 狆 狅 犾 狔 狊 犪 犮 犮 犺 犪 狉 犻 犱 犲 犪 狀 犱 犮 狅 狀 狋 犪 犻 狀 犻 狀 犵 狊 犲 犾 犲 狀 犻 狌 犿 犪 犿 狅 狌 狀 狋提 取 率 / % 物 理 性 状 溶 解 性 糖 含 量 / % 蛋 白 含 量 / % 硒 含 量 / ( μ g·g -1 ) 硒 占 总 硒 比 例 / %4.31 浅 黄 色 棉 絮 状 易 溶 于 水 62.31 5.05 2.11 18.062.4 茶 多 糖 和 碱 溶 性 蛋 白图 1 为 茶 多 糖 的 原 子 力 显 微 镜 低 倍 图 . 扫 描 范 围为 40μm×40μm, 可 以 清 楚 看 到 茶 多 糖 单 个 分 子 链及 其 多 个 侧 支 链 结 构 , 聚 合 物 分 子 间 互 相 缠 绕 , 链 间通 过 糖 单 元 间 不 同 的 连 接 方 式 衍 生 出 许 多 环 , 且 带 有分 支 的 侧 链 结 构 , 状 如 树 枝 , 从 而 证 实 了 多 糖 大 分 子具 有 高 度 分 支 的 化 学 结 构 . 多 糖 属 于 多 羟 基 化 合 物 ,其 游 离 的 羟 基 易 形 成 氢 键 , 因 此 多 糖 链 的 链 内 和 链 间相 互 缔 和 , 形 成 较 稳 定 的 环 状 结 构 , 这 种 结 构 分 支 较多 , 能 级 应 该 最 低 .图 2 为 对 应 的 高 倍 图 , 图 中 b、c、d 分 别 对 应 图 a中 AB、CD、EF3 处 多 糖 的 厚 度 ( 犺 ) 和 宽 度 ( 犱 ), 厚 度为 0.64~1.04nm, 宽 度 为 52.22~64.32nm. 多 糖 分子 链 一 般 为 0.1~1.0nm [10] , 而 茶 多 糖 宽 度 远 大 于 此估 算 值 , 说 明 每 股 并 非 为 单 个 糖 链 , 也 可 能 是 由 于 扫描 过 程 中 有 限 大 小 的 针 尖 , 在 扫 描 时 不 同 的 部 位 与 分子 链 作 用 , 且 AFM 探 针 的 曲 率 半 径 在 5~20nm 范围 内 , 从 而 导 致 “ 增 宽 效 应 ”.图 3 为 碱 溶 性 蛋 白 的 原 子 力 显 微 镜 低 倍 图 . 扫描 范 围 为 5μm×5μm, 可 以 清 楚 看 到 碱 溶 性 蛋 白 分散 性 较 好 . 图 4 为 碱 溶 性 蛋 白 的 高 倍 图 , 从 图 4 可 知碱 溶 性 蛋 白 为 比 较 均 一 的 杆 状 或 球 状 结 构 , 图 中 b、

第 1 期 焦 自 明 等 : 紫 阳 富 硒 茶 中 茶 多 糖 、 碱 溶 性 茶 蛋 白 结 构 形 貌 及 硒 赋 存 形 态 75c、d、e、 分 别 对 应 图 a 中 AB、CD、EF、GH4 处 蛋白 的 厚 度 ( 犺 )、 长 度 ( 犔 ) 或 宽 度 ( 犱 ). 杆 状 结 构 的 长 度为 119.39~132.75nm, 宽 度 为 42.89nm, 厚 度 为0.94~1.23nm. 球 状 结 构 的 厚 度 为 1.08nm, 宽 度为 44.23~46.98nm. 从 图 中 还 可 看 出 球 状 结 构 蛋白 的 表 面 比 较 光 滑 , 而 杆 状 蛋 白 表 面 比 较 粗 糙 。 目前 为 止 , 利 用 AFM 研 究 的 蛋 白 种 类 还 很 少 , 能 检 测的 蛋 白 性 质 的 参 数 也 十 分 有 限 , 因 此 进 一 步 扩 展AFM 在 蛋 白 研 究 中 的 应 用 范 围 , 增 强 仪 器 应 用 的功 能 十 分 必 要 , 其 在 蛋 白 类 大 分 子 的 研 究 中 将 有 很好 的 前 景 .图 1茶 多 糖 的 低 分 辨 率 原 子 力 显 微 镜 图犉 犻 犵 .1 犃 犉 犕 犾 狅 狑 狉 犲 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 犿 犪 犵 犲 狊 狅 犳 犜 犲 犪 犘 狅 犾 狔 狊 犪 犮 犮 犺 犪 狉 犻 犱 犲图 2茶 多 糖 犛 犃 犆 犘 高 分 辨 率 原 子 力 显 微 镜 图犉 犻 犵 .2 犃 犉 犕 犺 犻 犵 犺 狉 犲 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 犿 犪 犵 犲 狊 狅 犳 犜 犲 犪 犘 狅 犾 狔 狊 犪 犮 犮 犺 犪 狉 犻 犱 犲a. 原 子 力 显 微 镜 扫 描 图 ;b.AB;c.CD;d.EF.图 3碱 溶 性 蛋 白 的 低 分 辨 率 原 子 力 显 微 镜 图犉 犻 犵 .3 犃 犉 犕 犾 狅 狑 狉 犲 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 犿 犪 犵 犲 狊 狅 犳 犃 犾 犽 犪 犾 犻 狊 狅 犾 狌 犫 犾 犲 狆 狉 狅 狋 犲 犻 狀a. 原 子 力 显 微 镜 扫 描 图 ;b. 立 体 图 .

76 陕 西 师 范 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 第 40 卷图 4碱 溶 性 蛋 白 高 分 辨 率 原 子 力 显 微 镜 图犉 犻 犵 .4 犃 犉 犕 犺 犻 犵 犺 狉 犲 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 犿 犪 犵 犲 狊 狅 犳 犃 犾 犽 犪 犾 犻 狊 狅 犾 狌 犫 犾 犲 狆 狉 狅 狋 犲 犻 狀a. 原 子 力 显 微 镜 扫 描 图 ;b.AB;c.CD;d.EF;e.GH.3 结 论紫 阳 富 硒 茶 中 的 硒 主 要 以 有 机 态 存 在 , 其 中 蛋白 硒 为 主 要 赋 存 形 态 , 其 次 是 多 糖 硒 , 茶 多 酚 含 硒 量最 少 . 其 中 , 蛋 白 硒 中 又 以 碱 溶 性 蛋 白 含 硒 量 最 高 ,[10]这 与 张 弛 研 究 的 富 硒 虫 草 以 及 武 芸 研 究 的 富 硒[11]黑 木 耳 中 硒 的 赋 存 形 态 基 本 上 一 致 . 这 一 结 果 说明 , 富 硒 茶 泡 饮 或 提 取 茶 多 酚 后 剩 余 的 茶 渣 含 硒 较多 , 可 用 于 制 备 富 硒 茶 蛋 白 和 富 硒 茶 多 糖 , 亦 可 考 虑按 照 一 定 比 例 添 加 到 食 品 或 饲 料 中 , 以 增 加 有 机 硒 、植 物 蛋 白 和 膳 食 纤 维 的 摄 入 量 .参 考 文 献 :[1] 晏 传 奇 , 张 彦 , 李 咏 . 富 硒 酵 母 的 药 理 作 用 研 究 进 展 [J].微 量 元 素 与 健 康 研 究 ,2011,28(1):5659.[2]Stranges A,NavasAcien M P,RaymanfE,etal.Seleniumstatusandcardiometabolichealth:Stateoftheevidence[J].Nutrition,MetabolismandCardiovascularDiseases,2010,20(10):754760.[3]Abd E L,Ghany HefnawyJL,TortoraPerez.Theimportanceofseleniumandtheefectsofitsdeciencyinanimalhealth [J].Smal Ruminant Research,2010,26(1):185192.[4] 张 海 棠 , 王 自 良 , 赵 坤 . 硒 的 营 养 机 理 及 其 在 肉 用 畜 禽 生产 中 的 应 用 [J]. 粮 食 与 饲 料 工 业 ,1999(10):3436.[5] 刘 丽 芳 . 茶 多 酚 粗 提 的 一 种 新 方 法 [J]. 西 南 农 业 学 报 ,2009,22(3):870872.[6] 杨 建 雄 . 生 物 化 学 与 分 子 生 物 学 实 验 技 术 教 程 [M]. 北京 : 科 学 出 版 社 ,2009:3536.[7] 朱 成 文 , 白 同 春 , 刘 德 启 , 等 . 硫 酸 苯 酚 法 与 焦 糖 化 分 光光 度 法 相 结 合 测 定 藻 类 水 溶 液 中 总 糖 浓 度 [J]. 苏 州 大学 学 报 : 自 然 科 学 版 ,2005,21(2):6367.[8] 徐 平 平 , 孙 润 广 , 张 静 , 等 . 女 贞 子 多 糖 结 构 的 原 子 力 显微 镜 研 究 [J]. 电 子 显 微 学 报 ,2009,28(2):157161.[9]OlgaI,KiselyovaIgorV,YaminskyY D,etal.AFMstudyofmembraneproteins,cytochromeP4502B4,andNADPH cytochrome P450 reductase and theircomplexformation[J].ArchivesofBiochemistryandBiophysics,1999,371(1):17.[10] 张 弛 . 富 硒 虫 草 中 硒 的 赋 存 形 态 及 分 布 特 点 [J]. 食 品科 学 ,2009,30(23):193195.[11] 武 芸 . 富 硒 黑 木 耳 中 硒 的 分 布 规 律 及 赋 存 形 态 的 初 探[J]. 食 用 菌 ,2008(5):56.〔 责 任 编 辑 强 志 军 〕