recomBlot BorreliaNB IgG e IgM - Mikrogen
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ecomBlot <strong>BorreliaNB</strong> <strong>IgG</strong>/<strong>IgM</strong> Istruzioni per l’uso<br />
Tabella 2: Volumi per la diluizione di anticorpi coniugati anti-<strong>IgG</strong>/anti-<strong>IgM</strong> umane<br />
Strisce di test<br />
utilizzate*<br />
Coniugato <strong>IgG</strong> o <strong>IgM</strong><br />
concentrato<br />
Tampone di lavaggio B<br />
pronto all’uso<br />
1 20 µl 2 ml<br />
2 40 µl 4 ml<br />
3 60 µl 6 ml<br />
5 100 µl 10 ml<br />
10 200 µl 20 ml<br />
15 300 µl 30 ml<br />
20 400 µl 40 ml<br />
25 500 µl 50 ml<br />
* I volumi sono stati calcolati senza considerare il volume morto. A seconda del tipo di manipolazione (manuale o procedura<br />
automatica) preparare una quantità di soluzione di coniugato addizionale, sufficiente per 1-3 strisce.<br />
7.3.3. Soluzione del substrato<br />
Il substrato è pronto all’uso! Prima di dare inizio alla reazione colorimetrica portare a temperatura<br />
ambiente (18°-25°C).<br />
Evitare assolutamente la contaminazione della soluzione di substrato non utilizzato da parte di puntali di<br />
pipette non sterili, ecc., in quanto può interferire con la sensibilità del test.<br />
7.4. Conservazione e stabilità<br />
Conservare i reagenti a 2°-8°C prima e dopo l’uso.<br />
Il tampone di lavaggio B pronto all’uso non può essere conservato.<br />
La soluzione di coniugato deve essere sempre preparata fresca.<br />
8. Campioni<br />
I campioni possono essere rappresentati da siero o plasma separati dal coagulo prima possibile dopo il<br />
prelievo. Deve essere assolutamente evitata una contaminazione microbica del campione. Le sostanze<br />
insolubili devono essere rimosse dal campione prima dell’incubazione mediante centrifugazione.<br />
L’utilizzo di campioni lipemici, emolizzati o torbidi può determinare una colorazione di fondo scura nel<br />
<strong>recomBlot</strong> <strong>BorreliaNB</strong>. Questi campioni possono anche determinare risultati errati e pertanto non<br />
devono essere utilizzati.<br />
Importante!<br />
Se i test non vengono eseguiti immediatamente, i campioni possono essere conservati per un<br />
massimo di 2 settimane a 2°-8°C. Una conservazione prolungata dei campioni è possibile a<br />
temperatura di -20°C o inferiore. Non è consigliabile un congelamento/scongelamento ripetuto<br />
dei campioni in quanto può interferire con la qualità dei risultati.<br />
9. Procedura del test<br />
9.1. Generalità<br />
La riproducibilità dei risultati dipende in massima parte dal lavaggio accurato delle strisce. Devono<br />
pertanto essere sempre osservate le frequenze di lavaggio descritte nei paragrafi 9.3 e 9.5.<br />
Importante! Differenze tra test <strong>IgG</strong> e <strong>IgM</strong><br />
9.2. Incubazione dei campioni<br />
1. Per ogni campione da sottoporre a test è richiesto un pozzetto nel vassoio di incubazione. In ogni<br />
pozzetto vengono pipettati 2 ml di tampone di lavaggio B pronto all’uso. Quindi una striscia di test<br />
viene immersa con attenzione mediante pinzette di plastica in uno dei pozzetti contenenti il tampone<br />
di lavaggio B. Il numero della striscia deve essere rivolto in alto.<br />
Importante!<br />
- 6 - GIRBBB015IT.DOC