recomBlot BorreliaNB IgG e IgM - Mikrogen

GIRBBB015IT.DOC - 7 -
Istruzioni per l’uso recomBlot BorreliaNB IgG/IgM
La striscia deve essere completamente inumidita e immersa nel tampone di lavaggio B
pronto all’uso.
Registrare i numeri della provetta e della striscia sul modulo di valutazione.
2. Aggiunta dei campioni
Procedura per il test IgG: 10 µl di un campione non diluito (siero o plasma umano), del
corrispondente controllo debole positivo o eventualmente del controllo negativo e/o del controllo
positivo vengono pipettati nei rispettivi pozzetti (diluizione 1 + 200).
Procedura per il test IgM: 20 µl di un campione non diluito (siero o plasma umano), del
corrispondente controllo debole positivo o eventualmente del controllo negativo e/o del controllo
positivo vengono pipettati nei rispettivi pozzetti (diluizione 1 + 100).
Assicurarsi di aggiungere il campione a un’estremità della striscia immersa nel tampone di lavaggio
B e mescolare non appena possibile mediante agitazione accurata del vassoio.
Registrare i numeri dei campioni e la classe di immunoglobuline (IgG o IgM) sul modulo di
valutazione.
Coprire il vassoio di incubazione con il coperchio di plastica e incubare overnight (10-16 ore) a
temperatura ambiente sotto lieve agitazione.
Importante!
Assicurarsi che le soluzioni di incubazione non vengano veicolate in altri pozzetti; porre
particolare attenzione per evitare spruzzi al momento dell’apertura e della chiusura del
coperchio.
Nel caso in cui si sia formata acqua di condensa all’interno del coperchio, questa va asciugata.
Dopo lunghi periodi di funzionamento gli agitatori possono emettere calore. Per evitare la
condensazione del liquido di incubazione sul coperchio, si dovrebbe collocare materiale idoneo
all’isolamento tra la superficie dell’agitatore e il vassoio di incubazione (p.es. una lastra di
polistirolo).
9.3. Lavaggio
1. Dopo l’incubazione, i coperchi di plastica vengono rimossi con cautela dai vassoi di incubazione.
2. Il siero diluito viene attentamente aspirato dai singoli pozzetti.
Importante!
Quando le soluzioni sono state aspirate da un pozzetto, il puntale della pipetta deve essere
cambiato o risciacquato accuratamente con acqua deionizzata dopo ogni procedura di
aspirazione, al fine di evitare la contaminazione dei successivi pozzetti.
In caso di procedura automatica, devono essere tenute in considerazione le indicazioni del
produttore della strumentazione.
3. Aggiungere quindi 2 ml del tampone di lavaggio B pronto all’uso in ogni pozzetto e lavare
sull’agitatore sotto lieve agitazione per 5 minuti. Il tampone di lavaggio B viene aspirato dopo la
procedura di lavaggio.
4. Eseguire la fase di lavaggio descritta al punto 3 per un totale di quattro volte.
9.4. Incubazione con il coniugato perossidato
Dopo aver lavato le strisce, pipettare 2 ml della soluzione di coniugato adeguatamente diluita (vedere
Tabella 2) in ogni pozzetto e incubare per 1 ora sotto lieve agitazione a temperatura ambiente, con il
vassoio di incubazione coperto con il coperchio di plastica.
9.5. Lavaggio
Le soluzioni di coniugato vengono aspirate dai pozzetti e le strisce vengono nuovamente lavate (vedere
9.3).