Tesi dottorato Annabella Russo.pdf - OpenstarTs - Università degli ...

RIASSUNTO
Il crescente inquinamento sta deteriorando sempre più il mondo in cui viviamo. Per
studiare l’alterazione ambientale in modo completo è importante analizzare le emissioni
da un punto di vista chimico-fisico, ma anche valutare il danno arrecato all’intero
ecosistema. Perciò si impiegano sempre più spesso gli esseri viventi quali biomonitor di
danno subito da un ambiente poiché sono capaci di reagire a stimoli complessi, talvolta
sconosciuti, e danno informazioni più complete sulla qualità di un ecosistema rispetto a
quelle fornite dai metodi tradizionali.
Tra le emissioni inquinanti un ruolo particolare è occupato dalle sostanze
mutagene capaci di modificare in modo stabile l’informazione genetica sia a livello di geni
che di struttura e numero di cromosomi. I test capaci di identificare rapidamente
mutazioni geniche e cromosomiche sono detti test di mutagenesi a breve termine. Nel
percorso di dottorato ho sperimentato l’applicabilità di due test di mutagenesi ambientale:
Tradescantia micronuclei test (Trad-MCN) e Comet test o Elettroforesi su Gel a Singola
Cellula (SCGE), approfondendo alcune problematiche metodologiche.
Tradescantia micronuclei test (Trad-MCN)
Con Tradescantia micronuclei test (Trad-MCN) è possibile rilevare la presenza di
micronuclei come indice di avvenuto danno al DNA nelle cellule del polline in piante del
genere Tradescantia. Il test utilizza il clone # 4430, ottenuto dall’incrocio di Tradescantia
hirsutiflora e Tradescantia subacaulis.
Alcuni esemplari del clone mi sono stati forniti dalla dott.ssa Maddalena Casera
del Laboratorio Biologico dell’Agenzia Provinciale per la Protezione dell’Ambiente e la
Tutela del Lavoro di Laives (BZ). Il clone, nel periodo invernale, è conservato all’interno di
una serra dell’Orto Botanico dell’Università degli Studi di Trieste, a una temperatura di
24°C sotto una lampada a che riproduce un fotoperiodo di 16 ore di luce e 8 di buio. Nel
periodo estivo, invece, il clone viene mantenuto all’esterno.
Con le infiorescenze ottenute dal clone ho effettuato alcune prove di Trad-MCN
test per comprendere a quale stadio si avessero le maggiori probabilità di osservare le
tetradi polliniche. Inoltre ho effettuato due esposizioni di 15 infiorescenze ciascuna in un
sito con elevate concentrazioni di IPA aerodispersi. Tale sito è ubicato in Piazza Garibaldi
nel centro di Trieste, in una zona interessata da intenso traffico veicolare. Esaminando il
contenuto delle antere e dividendo il numero totale di micronuclei per il numero totale di
tetradi osservate si è definita la frequenza dei micronuclei, espressa come
micronuclei/100 tetradi (MCN/100 tetradi). Per ogni esposizione si osservano 5 preparati
e in ognuno si contano almeno 300 tetradi. Confrontando la media delle frequenze
ottenute dalle infiorescenze esposte nel sito potenzialmente inquinato (media =5.44; σ
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