Original article - Blood Transfusion

Original articleClosed surgery: autologous platelet gel for the treatmentof pseudoarthrosisAnna Rughetti 1 , Stefano Flamini 2 , Olivo Colafarina 2 , Luigi Dell’Orso 1 , Alessandra Filoni 2 ,Rita Gallo 3 , Rosangela Costantini 1 , Giuseppina De Michelis 1 , Albina Lupo 11UO di Immunoematologia e Trasfusionale, Ospedale San Salvatore, ASL n° 4, L’Aquila, Italia2UO di Ortopedia, Ospedale San Salvatore, ASL n° 4, L’Aquila, Italia3Dipartimento di Medicina Sperimentale, Università di L’Aquila, ItaliaThe aim of this study was to evaluate the efficacy of atherapeutic protocol using platelet gel rich in growthfactors in the treatment of pseudoarthrosis. The plateletgel was injected into the site of the unhealed fractureduring closed surgery and associated withelectromagnetic shock waves. By causing microfracturesin the lesion, the shock waves expose a greater surfacearea to subsequent stimulation by platelet growth factors,in particular osteogenic factors.We studied a group of patients who had not previouslyresponded to treatment with a cycle of shock waves. In allcases autologous platelet gel was used. The plannedtreatment programme was a mean of 3 radio-guidedapplications at intervals of 3-4 weeks. There were nounwanted side effects in any case. Of the 16 patients treated,one was excluded from the study because he underwentfurther surgery, thus leaving the follow-up prematurely.One patient was treated with a single application becausea rapid clinical and radiological improvement made itunnecessary to continue with further treatment. In almostall cases there were clinical and radiologicalimprovements and it was possible to remove the synthesisaid an average of 10 weeks after the start of the therapeuticprogramme. Clinical and radiological evaluations 2, 4 and6 months after the first application of platelet gel showedgradual improvement of the clinical picture andprogressive formation of bone callus.Key words: platelet gel, pseudoarthrosis, shock wavesParole-chiave: gel piastrinico, pseudoartrosi, onde d'urtoReceived: 4 November 2003 - Revision received: 23 January 2004Correspondence:Dott.ssa Rughetti AnnaVia San Benedetto in Perillis 2267100 L’Aquila, Italiaa.rughetti@tiscali.itIntroduzioneNonostante le recenti e innumerevoli acquisizioni neltrattamento incruento delle pseudoartrosi, queste ancoraoggi rappresentano una temibile complicanza delle fratturee sono oggetto di discussione nel mondo scientifico poichéinvalidanti per il paziente e spesso causa di intervento oreintervento chirurgico. La litotripsia extracorporea a onded’urto (ESWL: Extracorporeal Shock Wave Lithotripsy)già da alcuni anni si propone come terapia innovativa,incruenta, scevra da complicanze e ben tollerata dal pazientenel trattamento delle pseudoartrosi 1,2 .Scopo dello studio è stato quello di valutare l’efficaciadelle onde d’urto elettromagnetiche nelle pseudoartrosi deipiccoli e grandi segmenti ossei in associazione con latecnica di infiltrazione con gel piastrinico (PG) autologo; atal fine è stato selezionato un gruppo di pazienti in cui ilsolo trattamento con un ciclo di 3 sedute di onde d’urtonon si è rivelato efficace per la guarigione.Il razionale di tale protocollo è stato quello di sfruttarel’effetto osteogenico delle onde d’urto per l’induzione delcallo osseo 1,3 : inducendo, infatti, delle microfratture eneoangiogenesi 4 a livello della lesione, questa diviene piùrecettiva allo stimolo dei fattori di crescita piastriniciparticolarmente in senso osteogenetico.Materiali e metodiDa febbraio 2002 a settembre 2003 sono stati arruolatiallo studio 16 pazienti, 11 maschi e 5 femmine, conpseudoartrosi delle ossa lunghe. Tutti i casi presentavanomancata consolidazione di una pregressa frattura dopoimmobilizzazione a tempo variabile con mezzo di sintesiinterno o fissatore esterno senza ottenere callo osseoBlood Transfus 2004; 2: 37-4337

A Rughetti et al.Table I - Mean values ± standard deviation of the tested parameters in the product: platelet concentrate (PC) + cryoprecipitate (CRYO)Baseline platelet count x 10 3 /microlitre (patient’s blood count) 295 ± 91Platelet count x 10 3 /microlitre of the final product (PC + CRYO) 3,218 ± 498Total platelet count of the final product (platelets x 10 9 ) 80.20 ± 21Baseline white cell count /microlitre x 10 3 (patient’s blood count) 7.37 ± 0.94White cell count/microlitre x 10 3 of final product (PC + CRYO) 21.38 ±17.3Fibrinogen content (mg) of final product (PC + CRYO) 406 ± 204IntroductionDespite the numerous recent improvements in noninvasivetreatment of pseudoarthrosis, this condition isstill a feared complication of fractures and a source ofinternational discussion in the scientific communitybecause it handicaps the patient and often requires surgeryor repeated operations.Extracorporeal shock wave lithotripsy (ESWL) has nowbeen proposed for several years as an innovative, noninvasive,treatment for pseudoarthrosis, which has nocomplications and is well tolerated by patients 1,2 .The aim of this study was to evaluate the efficacy ofelectromagnetic shock waves in the treatment ofpseudoarthrosis of small and large bones in associationwith infiltration of autologous platelet gel (PG). We selecteda group of patients in whom 3 sessions of shock waveshad not been effective.The rationale of this protocol is to exploit the osteogeniceffect of shock waves in inducing callus formation 1,3 : infact, by inducing microfractures and neoangiogenesis 4 inthe lesion, this becomes more receptive to stimulation byplatelet growth factors, particular the osteogenic factors.Materials and methodsBetween February 2002 and September 2003 we enrolled16 patients (11 males and 5 females), with pseudoarthrosisof the long bones. In all cases a prior fracture had failed toconsolidate despite immobilisation for a variable period oftime with an internal method of synthesis or an externalfixator and no radiologically visible callus formation hadbeen achieved, even after treatment with a cycle of 3sessions of electromagnetic shock waves.The PG were prepared using quadruple bags and 380-450 mL of autologous whole blood 5,6 . The units of bloodwere fractionated into: a) red cell concentrate, immediatelyreinfused into the patient; b) platelet concentrate (PC) in14-15 mL of plasma, in which the platelets were"hyperconcentrated"; c) platelet-poor plasma, used for theradiologicamente visibile, nemmeno dopo trattamento conun ciclo di 3 sedute di onde d’urto elettromagnetiche.Per la preparazione di PG sono state utilizzate sacchequadruple e raccolti 380-450 mL di sangue intero 5,6 . Le unitàdi sangue sono state frazionate in: a) eritrociti concentrati(EC), subito dopo reinfusi al paziente; b) concentratopiastrinico (CP) in 14-15 mL di plasma, dove le piastrine sonostate “iperconcentrate”; c) plasma povero di piastrine (PPP),avviato alla preparazione di 10-15 mL di crioprecipitato (CRIO)mediante sifonamento. Successivamente il CP è stato unitoal CRIO utilizzando un connettore sterile TSCD (TerumoSterile Tubing Welder, Terumo Italia, Roma) ed il mix cosìottenuto frazionato in 3 aliquote da 8-10 mL ciascuna: diqueste una è stata conservata a 22 °C in agitazione continuaed utilizzata fresca entro 1-2 giorni, le 2 rimanenti stoccate a–80 °C ed utilizzate successivamente con modalità differite.L’attivazione e l’applicazione del prodotto sono state sempreeffettuate presso la sala operatoria di Ortopedia per garantirela massima sterilità. Sul prodotto finale fresco (miscelato CP+ CRIO) è stato eseguito un controllo di qualità (Tabella I)costituito da:- conteggio piastrinico sul prodotto finale rapportato allaconta piastrinica basale del paziente, mediante esameemocromocitometrico;- contenuto piastrinico sull’intero volume di prodotto;- conteggio dei leucociti sul prodotto finale rapportatoal numero basale dei leucociti del paziente, medianteesame emocromocitometrico;- dosaggio del fibrinogeno sull’intero volume diprodotto.Le sedi trattate sono state: 5 di femore, 4 di tibia, 4 diomero, 2 di radio e 1 di ulna. Il range di età tra 21 e 83 anni,con una media di 48 aa e una mediana di 45. Sono stateescluse dal trattamento pseudoartrosi infette, con marcatadiastasi (superiore a 5-10 mm). Il PG è stato attivatoaggiungendo ad ogni aliquota 0,5 mL di calcio gluconato(Monico SpA, Via Ponte di Pietra 7, Venezia/Mestre) al 10%e 0,5 mL di soluzione di batroxobina (Botropase, RavizzaFarmaceutici SpA, Via Europa 35, Muggiò - MI) delcommercio. In sala operatoria, dopo aver inserito inposizione opposta sotto controllo radioscopico due aghi-38Blood Transfus 2004; 2: 37-43

Platelet-gel for the treatment of pseudoarthrosisFigure 1 - Radioguided application of the autologous platelet gel to the edge of the fracturepreparation of 10-15 mL of cryoprecipitate (CRYO) bysiphoning. The PC was subsequently combined with theCRYO using a TSCD sterile connector (Terumo SterileTubing Welder, Terumo Italia, Rome) and the mixture thusobtained divided into 3 aliquots of 8-10 mL each: of these 3aliquots, one was stored at 22°C under continuousagitation and used fresh within 1-2 days, the other 2 werestored at –80 °C and used later. The product was activatedand applied in the orthopaedics operating theatre in orderto safeguard its sterility. The following quality controls(Table I) were carried out on the fresh final product (PC +CRYO mixture):- platelet count of the final product as a ratio of thepatient's baseline platelet count, obtained from a fullblood count;- platelet count of the whole volume of the product;- white cell count of the final product as a ratio of thepatient's baseline white cell count, obtained from a fullblood count;- fibrinogen content of the whole volume of the product.The sites treated were femur (n=5), tibia (n=4), humerus(n=4), radius (n=2) and ulna (n=1). The patients were agedbetween 21 and 83 years old, with a mean of 48 and a medianof 45. Patients with infected pseudoarthrosis were excludedas were those with marked diastasis (greater than 5-10mm). Each aliquot of PG was activated by adding 0.5 mL ofcalcium gluconate (Monico SpA, Via Ponte di Pietra 7,Venezia/Mestre) 10% and 0.5 mL of a commercially availablesolution of batroxobin (Botropase, Ravizza FarmaceuticiSpA, Via Europa 35, Muggiò - MI). In the operating theatre,after having positioned two 14 G needle-cannulae underradioscopic control at the border of the fracture (Figure 1),the PG was activated and immediately applied by infiltration.The gelification, which occurred within 2-7 minutes, didnot hamper the infiltration: the second needle-cannula was,however, positioned in order to have a second injectionroute in case the first became obstructed by small lumps ofplatelet aggregates and/or cryoprecipitate, given theBlood Transfus 2004; 2: 37-43cannula 14 G in corrispondenza della rima di frattura(Figura1), il PG è stato attivato ed immediatamente applicatoper infiltrazione; la gelificazione, infatti, che si è vistoverificarsi in un lasso di tempo di 2-7 minuti, ne impedirebbel’infiltrazione. Il 2° ago-cannula viene posizionato appuntoper disporre di una seconda via di iniezione nel caso laprima venisse ostruita da piccoli frustoli di aggregatipiastrinici e/o crioprecipitato, data la densità del prodotto.Il protocollo terapeutico proposto ha previsto in mediaun ciclo di tre applicazioni di PG autologo ad intervalli di 3-4 settimane. Nel gruppo di pazienti trattati, nonostante lascarsa risposta ad un ciclo di sole onde d’urto utilizzato inprecedenza, con l’intento di preparare la sede della lesionead una maggiore recettività all’azione dei fattori di crescitacontenuti nelle piastrine, ogni applicazione di PG è statapreceduta da una singola seduta di onde d’urtoextracorporee, mediante somministrazione di 3.000 colpi,applicando energie variabili da 0,4 a 0,5 mJ/mm 2 . Iltrattamento è stato effettuato con un litotritoreelettromagnetico di ultima generazione: Dornier EposFluoro (Dornier Med Tech Italia Srl, Via A. Cavaglieri 26,Roma) con puntamento radiografico ed ecografico 7 .Il follow up proposto ha previsto un controlloradiologico mediamente a 2, a 4 e a 6 mesi dalla primaapplicazione.RisultatiI controlli di qualità eseguiti sul prodotto finale frescosono riportati nella Tabella I. Come si evince dai dati riportatiin tabella I si osserva una grande variabilità sia nel numerodi piastrine sia, soprattutto, nel conteggio dei globulibianchi, nonché nella concentrazione di fibrinogeno,attribuibili, a nostro parere, al metodo manuale dipreparazione del concentrato piastrinico e delcrioprecipitato. Per quanto riguarda i risultati clinici unapaziente si è sottoposta a reintervento dopo solo un mese39

A Rughetti et al.Figure 2 - Before treatment and after 3 months of treatment with a single application of autologous platelet gel, preceded byelectromagnetic shock wavesdensity of the product. The planned therapeutic protocolwas a cycle of three applications of autologous PG atintervals of 3-4 weeks. Despite a previous poor responseto shock waves, before every application of PG the patientswere treated with a single session of extracorporeal shockwaves (3,000 shocks, using an energy between 0.4 and 0.5mJ/mm 2 ) in order to prime the site for greater response tothe action of the growth factors in the platelet gel. Thistreatment was delivered with a latest generationelectromagnetic lithotriptor: Dornier Epos Fluoro (DornierMed Tech Italia Srl, Via A. Cavaglieri 26, Roma) withradiographic and echographic targeting 7 .The radiological follow-up controls were planned for 2,4 and 6 months after the first application.ResultsThe results of the quality control tests carried out onthe fresh final product are reported in Table I.As can be seen from the data reported in table I therewas a great variability in both the number of platelets and,particularly, in the white cell count, as well as in thefibrinogen content. In our opinion these variations can beattributed to the manual method of preparing the plateletconcentrate and cryoprecipitate.As far as concerns the clinical results, one patientunderwent further surgery only one month after the end ofthe treatment and was therefore excluded from the study.In all the others the planned radiological follow-ups werecarried out 2, 4 and 6 months after the first application. Allpatients reported a clear improvement in pain symptoms,40dalla fine del trattamento ed è quindi stata esclusa dallostudio. In tutti gli altri il follow up ha previsto un controlloradiologico mediamente a 2, a 4 e a 6 mesi dalla primaapplicazione. Tutti hanno riferito un miglioramento nettodella sintomatologia dolorosa, quindi della funzionalitàdell’arto, già dopo qualche giorno dalla prima infiltrazione.La valutazione dei risultati ha mostrato una consolidazionecompleta del focolaio di pseudoartrosi a circa 4-6 mesi in 12casi e parziale in 2; un caso non ha risposto al trattamentodopo un ciclo di 3 sedute. In un paziente di 44 anni, conpseudoartrosi per pregressa frattura di tibia, è statasufficiente una singola applicazione per il rapidomiglioramento clinico e radiologico (Figura 2).In tutti i casi, meno uno, è stata possibile la rimozionedei mezzi di sintesi dopo una media di 10 settimanedall’inizio del trattamento. Il numero esiguo e l’eterogeneitàdei casi riportati non hanno permesso di evidenziare,mediante test di correlazione di Spearman, unasignificatività statistica tra risposta al trattamento ed età,sesso e sede della lesione. Tuttavia si segnala una blandacorrelazione tra età e tempo di guarigione (aumentandol’età aumenta il tempo di consolidazione) e tra sesso erisposta al trattamento (i pazienti di sesso maschilesembrano rispondere meglio). I casi trattati sono riportatinella tabella II.Discussione e conclusioniLe piastrine elaborano, immagazzinano e rilasciano, seattivate, numerosi fattori di crescita (GFs, Growth Factors)capaci di stimolare la replicazione delle cellule di origineBlood Transfus 2004; 2: 37-43

Platelet-gel for the treatment of pseudoarthrosisTable II - Patients with pseudoarthrosis of the long bones treated with autologous PGPatient n° Age (years) Sex (M/F) Site of fracture n° of session with PG Time of consolidation (days)1 36 M Humerus 5 1802 68 M Femur 2 453 46 M Tibia 2 904 52 M Humerus 3 905 83 F Humerus 3 No consolidation6 56 M Tibia 3 1807 44 M Tibia 1 608 39 F Femur 2 909 49 F Humerus 3 Out of follow-up10 37 M Tibia 2 6011 21 M Ulna 4 12012 31 F Femur 2 601 3 4 1 M Radius 3 12014 59 F Femur 4 1801 5 6 1 M Radius 5 18016 42 M Femur 3 180and thus in limb function, already only a few days after thefirst infiltration. An evaluation of the results showedcomplete consolidation of the focus of the pseudoarthrosisat about 4-6 months in 12 cases and partial consolidationin 2 other cases; one case did not respond to treatmentafter a cycle of 3 sessions. Finally, in one 44-year old patientwith pseudoarthrosis of a previous tibial fracture, a singleapplication was sufficient for a rapid clinical and radiologicalimprovement (Figure 2).In all cases, except one, the synthesis aid could beremoved a mean of 10 weeks after the start of the treatment.The small number and the heterogeneity of the casesreported do not allow Spearman's correlation analysis tohighlight any statistical significant associations betweenresponse to treatment and age, sex or site of lesion. However,a weak correlation was noted between age and time to heal(increasing age associated with longer consolidation times)and between sex and response to treatment (the malepatients seemed to respond better). The cases treated arereported in table II.Discussion and conclusionsPlatelets produce, store and release, if activated,numerous growth factors capable of stimulating thereplication of cells of mesenchymal origin such asfibroblasts, osteoblasts and endothelial cells 8 . Besidesosteoprogenitor cells (fibroblasts, osteoblasts andchondrocytes) the regeneration of bone tissue requires amatrix conducive to bone formation, including osteogenicgrowth factors (PDGF Platelet Derived Growth Factor;mesenchimale come fibroblasti, osteoblasti e celluleendoteliali 8 . La rigenerazione del tessuto osseo necessitaoltre che di cellule osteoprogenitrici (fibroblasti,osteoblasti e condrociti) e di una matrice osteoconduttiva,anche di fattori di crescita osteoinduttivi (PDGF PlateletDerived Growth Factor; TGF-b Trasforming GrowthFactor-b; IGF I e II Insulin Like Growth Factor I and II) diderivazione piastrinica e di proteine ad attivitàmorfogenetica (BPMs, Bone Morphogenetic Proteins)BPMs. Le BPMS sono peptidi osteoinduttivi di derivazionepiastrinica appartenenti al gruppo del TGF-b responsabiledei processi di generazione e rigenerazione dell’osso 6,9 .Fattori locali, citochine e fattori di crescita, sono necessariper l’innesco e il mantenimento dei processi di rigenerazionetessutale. Nel tessuto osseo, inoltre, i fattori di crescitaliberati localmente vengono incorporati nella matriceminerale e rilasciati lentamente durante la dissoluzione dellamatrice da parte degli osteoclasti o dei condroclasti 9 .È stato ipotizzato che nel sito di lesione dell’osso ci siaun rilascio iniziale di PDGF, TGF- b e IGF I e II per effettodella degranulazione delle piastrine presenti in loco 6,9,10 .Il PDGF stimola, da un lato, la mitosi delle cellulestaminali midollari presenti nell’osso e dall’altro ha uneffetto angiogenetico inducendo e potenziando laformazione di nuovi capillari nelle sedi di lesione 9 .Contemporaneamente, per effetto del TGF-b, si assiste allaproliferazione di fibroblasti e pro-osteoblasti e nelladifferenziazione di questi ultimi verso forme più mature(osteoblasti) che vengono stimolate a produrre matriceossea, mentre i fibroblasti a depositare matrice di collageneper sostenere la crescita vasale 9,10 . La presenza locale dipiastrine veicolate dal torrente ematico rifornisce dicontinuo l’area di rigenerazione ossea dei GFs necessari 6 .Successivamente il rilascio di IGF I e II agisce sugli osteoblastiBlood Transfus 2004; 2: 37-4341

A Rughetti et al.TGF-b Transforming Growth Factor-b; IGF I and II InsulinLike Growth Factor I and II) derived from platelets andmorphogenically active proteins (bone morphogeneticproteins -BPM). The BPM are osteoinductive peptidesderived from platelets and belong to the TGF-b groupresponsible for the processes of bone generation andregeneration 6,9 . Local factors, cytokines, and growth factorsare necessary to trigger and maintain tissue regenerationprocesses. Furthermore, growth factors released locally inbone tissue are incorporated into the mineral matrix andreleased slowly during the break down of the matrix byosteoclasts or chondroclasts 9 .It has been hypothesised that there is an initial releaseof PDGF, TGF-b and IGF I and II at the site of a bone lesiondue to the effect of degranulation of platelets present inthe lesion 6,9,10 .PDGF stimulates mitosis of bone marrow stem cells andalso has an angiogenic effect, inducing and enhancing theformation of new capillaries in the site of the lesion 9 . At thesame time, TGF-b causes proliferation of fibroblasts andpro-osteoblasts and differentiation of these latter into moremature forms (osteoblasts) which are stimulated to producebone matrix, while the fibroblasts deposit a collagen scaffoldto support vessel growth 9,10 .The local presence of platelets carried by the bloodstream continuously provides the area of bone regenerationwith the necessary growth factors 6 . Subsequently releasedIGF I and II act on osteoblasts of the endosteum whichstarts to fill the trabeculae of the cancellous bone 10 .We used repeated infiltrations of hyperconcentrated,activated autologous platelets in the form of a gel (PG) intothe damaged site in order to enhance the role of platelettissue repair mechanisms.The application of PG in adjuvant treatment of bonetissue regeneration, incorporated appropriately into theoverall management and multidisciplinary care of the patient,is being shown to be effective. We found a clearly fasterresponse as well a much higher percentage of healing thanin the cases previously treated with only shock wave therapy.On the basis of our experience, we consider that it isdifficult to design protocols with certain prognosticevaluations because of the small size of our series, thelimited cases reported in the literature and, not least,because of the great variety of cases treated. However, theshort healing times and the good results obtained lead usto consider this new method as one of the most effectiveand promising treatments for pseudoarthrosis. Furthermore,the method is a simple and economic strategy for managingthis unpredictable pathology.dell’endostio che iniziano a riempire le trabecole dell’ossospugnoso 10 . L’infiltrazione ripetuta in situ di piastrineautologhe iperconcentrate e attivate in forma di gel (PG) èstata da noi utilizzata per esaltare il ruolo delle piastrine neimeccanismi di riparazione tessutale. L’applicazione del PG neltrattamento adiuvante della rigenerazione di tessuto osseo,inserita in maniera appropriata nel quadro complessivo epluridisciplinare della cura, sta dimostrando una evidenteefficacia. Abbiamo constatato una risposta decisamente piùrapida nonché una percentuale di guarigione di gran lungasuperiore rispetto ai casi trattati precedentemente solo conterapia ad onde d’urto. Sulla base della nostra esperienzariteniamo difficile la formulazione di protocolli con valutazioniprognostiche sicure data l’esigua casistica personale, la limitatacasistica reperita in letteratura e non di meno la grande varietàdelle caratteristiche dei casi trattati. Tuttavia, i tempi brevi diguarigione e i buoni risultati ottenuti ci inducono a considerarequesta nuova metodica come una tra le più efficaci e promettenti,nonché semplici ed economiche, nel trattamento di patologiecosì imprevedibili quali le pseudoartrosi.RiassuntoScopo dello studio è stato valutare l’efficacia di unprotocollo terapeutico con gel di piastrine, ricche di fattoridi crescita, iniettato a “cielo coperto” in corrispondenzadella lesione e associato ad onde d’urto elettromagnetiche,nel trattamento delle pseudoartrosi. Le onde d’urto,provocando delle microfratture sul sito della lesione,espongono una superficie maggiormente recettiva allostimolo dei fattori di crescita piastrinici particolarmentein senso osteogenetico. È stato selezionato un gruppo dipazienti che non ha risposto precedentemente al solotrattamento con un ciclo di onde d’urto. In tutti i casi èstato utilizzato gel piastrinico autologo. Il programma ditrattamento ha previsto in media 3 applicazioniradioguidate differite di 3-4 settimane l’una dall’altra. Innessun caso vi sono stati effetti indesiderati. Dei 16 pazientitrattati uno è stato escluso dallo studio poiché sottopostoprecocemente a reintervento chirurgico uscendo quindidal follow up. Un paziente è stato trattato con una singolaapplicazione poiché il rapido miglioramento clinico eradiologico non ha reso necessario procedere neltrattamento. Nella quasi totalità dei casi è stato osservatomiglioramento clinico e radiologico ed è stata possibilela rimozione dei mezzi di sintesi mediamente dopo10settimane dall’inizio del programma terapeutico; lavalutazione clinica e radiologica a 2, 4 e 6 mesi dalla 1 aseduta ha evidenziato graduale miglioramento del quadroclinico e progressiva formazione di callo osseo.42Blood Transfus 2004; 2: 37-43

Platelet-gel for the treatment of pseudoarthrosisAcknowledgementWe thank Dr. Gaetano Caloprisco for his preciouscollaboration in implementing the preparation and clinicaluse in our Transfusion Service.RingraziamentiSi ringrazia il Dott. Gaetano Caloprisco per la preziosacollaborazione nell'implementazione della procedura dipreparazione e applicazione del gel piastrinico presso ilSIT di L'Aquila.References1) Ghisellini F, Ceffa R, et al. Extracorporeal shock wavelithotripsy in the treatment of pseudoarthrosis. GIOT 2000;26(Suppl.1): S 17-S 20.2) Vogel J, Hopf C, Eysel P, Rompe JD. Application ofextracorporeal shock-waves in the treatment ofpseudoarthrosis of the lower extremity. Preliminary results.Arch. Orthop Trauma Surg 1997; 116: 480-3.3) Russo S, Canero R, D'Avena L, et al. Meccanismo d'azionedelle onde d'urto sul tessuto osseo. Atti del CorsoInterdisciplinare: Affezioni osteo-articolari e muscolotendinee:un nuovo campo d'applicazione delle ESWT. Parma:1998: 12-164) Russo S, Marlinghaus E, Amelio E, et al. Onde d'urto neltrattamento delle pseudoartrosi: valutazione clinica esperimentale nella risposta neo-osteo-angiogenetica. 85°Congresso Nazionale SIOT, Turin 23-26 October 2000: S6-S12.5) Zimmermann R, Jakubietz R, Jakubietz M, et al. Differentpreparation methods to obtain platelet component as a sourceof growth factors for local application. Transfusion 2001;41: 1217-24.6) Caloprisco G, Borean A. Raccolta multipla: preparazione e utilizzodi emocomponenti per la terapia topica. Progressi in Emaferesi,Santa Flavia (Palermo) 3-5 giugno 2003; Vol VIII: 29-42.7) Bachmann CE, Gruber G, Konermann W, et al. Dornier MedTech: Dornier Epos Ultra – Operating Manual, 1998-99.8) Marx RE, Carlson ER, Eichstädt RM, et al. Platelet-rich plasma:Growth factor enhancement for bone grafts. Oral Surg OralMed Oral Pathol Oral Radio Endod 1998; 85: 638-46.9) Caloprisco G, Borean A, Mele A. Il gel piastrinico: come equando. Progressi in Emaferesi, Cortona 8-9 April 2002;Vol VII: 39-51.10) Slater M, Patava J, Kingham K, Mason RS. Involvement ofplatelets in stimulating osteogenic activity. J Orthop Res1995; 13: 655-63.Blood Transfus 2004; 2: 37-4343