Isolamento, purificação e caracterização de metabólitos especias de ...

I Congresso de Pesquisa e Pós-Graduação do Câmpus Rio Verde do IFGoiano.
06 e 07 de novembro de 2012.
ISOLAMENTO, PURIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE
METABÓLITOS ESPECIAS DE NABO FORRAGEIRO (Raphanus sativus L.)
BORGES, Elisângela Barbosa (Estudante IC) 1 ; ALVES, Cassia Cristina Fernandes
(Orientador) 1 ; ALVES,José Milton (Colaborador) 1 ; FERREIRA, Nelsimar Laurinda
(Colaborador) 1 .
1 Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia Goiano – Câmpus Rio Verde - GO.
RESUMO: Os vegetais representam as maiores fontes de substâncias ativas que podem ser usadas na
terapêutica. Tendo em vista a crescente demanda de alternativas aos combustíveis fósseis, diversas plantas
vêm sendo estudadas com objetivo de fornecimento de óleo para produção de biodiesel, entre estas plantas
podemos destacar o Nabo forrageiro (Raphanus sativus L). O objetivo de desenvolver este trabalho é obter
dados sobre metabólitos especiais de Nabo forrageiro, pois existem poucos dados na literatura sobre estudo
fitoquímico desta espécie. O material vegetal foi colhido no campo e foram separados as folhas, flores e
caule, todo o material vegetal foi moído e utilizando maceração a frio foram obtidos os extratos de
diferentes polaridades. Os extratos foram submetidos a métodos cromatográficos utilizando sílica gel e
sephadex e as frações obtidas foram analisadas através de CCDA, após diversos métodos cromatográficos de
purificação verificou-se que a planta apresenta extratos ricos em flavonóides e terpenos.
INTRODUÇÃO
A natureza, desde sempre, tem o poder de
despertar no homem, um fascínio, não somente
pelos recursos oferecidos para sua alimentação e
manutenção, mas por sua principal fonte de
inspiração e aprendizado, buscando cada vez mais
compreender a leis naturais e o desafio de
transpor as barreiras a sua sobrevivência, como o
clima e as doenças, levando assim o homem, ao
atual estágio de desenvolvimento científico.
(JUNIOR et al.,2006).
Pesquisas mostram que as plantas
produzem princípios ativos de acordo com o
ambiente em que elas vivem, e a presença de
outras plantas podem comprometer a produção de
metabólitos especiais. (MAIA et al., 2009).
Os metabólitos secundários produzidos
por plantas, melhor conceituados, como
metabólitos especiais, tiveram um papel
fundamental no desenvolvimento da química
orgânica sintética moderna. Historicamente, o
desenvolvimento da química orgânica, ocorreu
paralelamente ao estudo das plantas,
principalmente a partir do século XIX, quando
foram registrados os primeiros estudos sobre
plantas, com base científica. Isso resultou no
isolamento de alguns princípios ativos de plantas,
já então conhecidas como medicinais. Desses
estudos foram obtidas algumas substancias que se
consagraram como princípios ativos eficazes, e
que até hoje ainda são muito empregados no
tratamento de certas doenças, a exemplo de
morfina, quinina, cânfora e cocaína (Montanari,
2001).
O desenvolvimento desta pesquisa, tem
como objetivo, isolar, purificar e caracterizar
metabolitos especiais do nabo forrageiro
(Raphanus sativus L).
MATERIAL E MÉTODOS
O material vegetal foi obtido através do
plantio de experimento no campo experimental do
laboratório de Agroenergia do Instituto Federal
Goiano – Campos/Rio Verde. Posteriormente ao
plantio e desenvolvimento do Nabo forrageiro
houve a coleta das plantas que não foram
submetidas a nenhum tratamento denominadas de
“Branco”, também coletou-se plantas que foram
submetidas a tratamentos de nutrição mineral e
calagem que serão estudadas posteriormente.
Após a coleta, o material vegetal foi levado para o
Laboratório de Química de produtos Naturais. No
laboratório foram separadas manualmente a raiz,
o caule, as folhas, as flores e os grãos. As raízes e
os grãos separados foram descartados.
As folhas do Nabo forrageiro após serem
moídas, foram colocadas em um balão de vidro de
1

3 litros e coberta com hexano, depois de ficarem
submersas no solvente hexano por três dias o
material foi filtrado e o solvente recuperado
através do evaporador rotativo, o solvente
recuperado foi novamente colocado em contato
com as folhas trituradas, este procedimento foi
repetido diversas vezes até obter o extrato
hexânico do nabo forrageiro. Foi obtido também
extratos das folhas utilizando diclorometano
como solvente e extratos das flores do nabo
forrageiro utilizando diclorometano e metanol
como solventes utilizando o método de maceração
a frio.
O extrato obtido das folhas com o
solvente hexano foi denominado NFBrH (Nabo
Folhas Branco Hexano) 9,6 gramas, e o extrato
obtido com o solvente diclorometano foi
denominado NFBrD (Nabo Folhas Branco
Diclorometano) 5,5 gramas. O extrato das flores
extraído com diclorometano foi denominado
(NFlBrD) 3,3 gramas e o obtido com o solvente
metanol foi denominado (NFlBrM) 6,3 gramas.
Foi realizada partição com solvente com
todos os extratos obtidos. Para realizar a partição
dissolveu os extratos em metanol/água 1:1 e
colocou em um funil de separação e adicionou-se
diclorometano obtendo duas frações a fração
metanol/agua e a fração solúvel em
dicloromentano.
As frações obtidas após as partições com
solventes foram submetidas à cromatografia em
coluna usando como fase estacionária sílica gel
60 0,2-0,5mm/35-70 mesh ASTM e coletadas
frações com solventes de diferentes polaridades
exceto a fração denominada NFlBrDM (Nabo
Flores Branco Diclorometano Metanol) que foi
submetida a cromatografia em coluna usando
Shefadex LH 20 e um único solvente, neste caso o
metanol.
Após a partição com solventes do extrato
hexânico das folhas a fração solúvel em hexano
NFBrHH (Nabo Folhas Branco Hexano Hexano)
esta fração foi submetida a cromatografia em
coluna com sílica gel e foram obtidas 331 frações,
a outra fração das folhas solúvel em
diclorometano denominada NFBrDD (Nabo
Folhas Branco Diclorometano Diclorometano)
também foi submetida a fracionamento
cromatográfico em coluna usando sílica gel foram
obtidas 276 frações.
No caso das flores a fração obtida com
diclorometano denominada NFlBrDD (Nabo
Flores Branco Diclorometano Diclorometano)
após a submissão a cromatografia em coluna
I Congresso de Pesquisa e Pós-Graduação do Câmpus Rio Verde do IFGoiano.
06 e 07 de novembro de 2012.
utilizando como fase estacionária sílica gel foram
obtidas 72 frações e a fração metanólica obtida a
partir da partição com solventes denominada
NFlBrDM (Nabo Flores Branco Diclorometano
Metanol) que foi submetida a cromatografia
utilizando como fase estacionaria sephadex e
foram extraídas 11 frações. As frações obtidas
após as cromatografias em coluna foram
analisadas através de CCDA (Cromatografia em
Camada Delgada Analítica) reunindo as frações
semelhantes para serem submetidas a novos
fracionamentos em colunas cromatográficas e
identificando as amostras puras.
RESULTADO E DISCUSSÃO
Após os processos de fracionamentos e
purificação dos extratos e frações obteve-se as
seguintes frações: a fração NFBrDD 39/102-
83/85-01, a fração NFBrHH 45/48-44/50-04, a
fração NFBrHH-149 e a fração NFlBrDD-18/22-
08 que após análise em CCDA e utilizando
lâmpada de UV verificou-se que as mesmas
apresentavam um ponto indicando a presença de
uma substância, estas amostras foram enviadas
para análises expectométricas. No
desenvolvimento desta pesquisa verificou-se
indícios de que os extratos e frações obtidas das
folhas e flores do nabo possuem em sua
constituição flavonóides e terpenos. Os
flavonóides podem desenvolver funções
farmacólogicas como antibacteriana e
antimicrobiana etc (Pires et al., 2011).
Os seres vivos possuem como
características de suma importância à
atividade metabólica, no caso das plantas, seu
metabolismo é divido em metabólitos
primários e secundários, os terpenos são
substâncias comuns nas plantas e é um
metabólito secundário, compreendendo em si,
mais de 1500 compostos que são de grande
valor para a indústria farmacêutica (Calou,
2008).
CONCLUSÃO
Através dos métodos utilizados foi
possível isolar e purificar alguns compostos, e
verificar a presença de terpenos e flavonóides
em algumas frações obtidas dos extratos de
diferentes polaridades das folhas e flores do
nabo forrageiro, sendo que a continuidade
2

deste trabalho possibilitará isolar e identificar
metabólitos especiais de diferentes classes.
O desenvolvimento de pesquisa
fitoquímica com esta espécie vegetal é muito
importante, pois existem poucos dados na
literatura sobre metabólitos especiais isolados
do nabo, por isso a continuidade do
desenvolvimento do projeto é importante.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
PIRES, A., M., L.; SILVEIRA, E., R.;
PESSOA,O., D., L.; Flavonóides de
Lonchocarpus campestris (Leguminosae) Quím.
Nova vol.34 N°.2, 2011.
CALOU, I.,B., F.; Acido Centipedico e Lactona
do Acido Hawtriwaico em Modelos de
Dermatite de Contanto Induzida Por TPA e
Oxazolona em Camundongos. Efeitos dos
terpenos 2008.
I Congresso de Pesquisa e Pós-Graduação do Câmpus Rio Verde do IFGoiano.
06 e 07 de novembro de 2012.
JUNIOR, Cláudio V.; BOLZANI, Vanderlan S.;
BARREIRO,Eliezer J., Os produtos naturais e a
química medicinal moderna. Química nova, v.
29, n.02, 2006.
MAIA, J.T.L.S. et al. Influência do cultivo em
consórcio na produção de fitomassa e óleo
essencial de manjericão (Ocimum basilicum L.) e
hortelã (Mentha x villosa Huds.). Rev. bras.
plantas med. [online]. 2009, vol.11, n.2, pp. 137-
140. ISSN 1516-0572.
MONTANARI, C. A.; BOLZANI, V. S.;
Planejamento racional de fármacos baseado em
produtos naturais. Química Nova, Vol. 24, No. 1,
105-111, 2001.
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