Ana Sofia Costa Nunes.pdf - Universidade do Minho

III. Resumo
O crescimento exponencial de determinadas áreas relacionadas com a ciência e engenharia, como a
indústria farmacêutica, a biotecnologia, a bioengenharia, entre outras, conduz cada vez mais a uma
crescente demanda de determinadas biomoléculas.
Neste contexto, a cromatografia por membranas de afinidade tem demonstrado ser um método eficiente,
atrativo e rápido para separação e purificação de biomoléculas de fluídos biológicos. Outra vantagem
deste processo de separação é o seu elevado rendimento e grau de purificação.
A celulose de origem vegetal tem sido já comercialmente explorada para aplicações como membrana de
afinidade para a separação seletiva de vários tipos de biomoléculas, como proteínas, anticorpos, enzimas,
entre outras.
A Celulose Bacteriana (CB) é um biomaterial de excelência, que possui propriedades únicas das quais se
destacam uma superfície extremamente hidrofílica, elevada cristalinidade e capacidade de retenção de
água, grande resistência mecânica e elevada área superficial e ainda biocompatibilidade. Frente ao
exposto é possível notar a versatilidade dos materiais compostos por CB. Deste modo, este biopolímero
tem sido alvo de uma crescente e interessante investigação ao longo dos últimos anos.
Este projeto tem como principal objetivo avaliar o potencial da CB, como um inovador material a ser
usado como membrana de afinidade para a separação e purificação de proteínas específicas.
Neste trabalho várias abordagens foram investigadas no sentido de funcionalizar a superfície da CB,
destacando-se a incorporação do polímero PVA e a ligação do corante F3GA. O principal objetivo destas
modificações é melhorar algumas características da matriz de CB, tal como a sua resistência, coesão e
também a ligação específica de proteínas, em detrimento da adsorção inespecífica que prejudica o
processo de cromatografia por afinidade.
As membranas de CB puras possuem potencial para serem utilizadas como membranas de afinidade,
possuindo uma capacidade de ligação de cerca de 114,05 mg BSA/g CB e podem, adicionalmente, ser
reutilizadas pelo menos três vezes.
Relativamente à funcionalização com PVA e F3GA, concluiu-se que ambos aumentaram a porosidade da
matriz de CB e que, após modificação, a adsorção inespecífica de BSA diminuiu, dai o decréscimo
observado nos valores de proteína retida, uma vez que o F3GA favorece a ligação específica da proteína,
embora em menores quantidades. No caso do PVA alcançaram-se valores na ordem dos 11,10 mg BSA
/g CB (membranas finas), verificando-se que quanto maior a concentração de PVA utilizada, menor a
quantidade de BSA retida nas membranas.
Já para o caso do F3GA concluiu-se que a concentração com melhores resultados, relativamente à
adsorção, foi a de 0,015 mg/mL – 27,19 mg BSA/g CB – (membranas finas), ficando mesmo assim
muito aquém dos resultados obtidos para a adsorção com a CB pura.
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