Estudo do papel da proteína induzida por glicocorticóide Anexina ...

3 - OBJETIVOS
3.1 - Objetivo geral:
Estudar o papel da proteína induzida por glicocorticóides AnxA1, durante a resolução
inflamatória espontânea e induzida por fármacos no decurso da pleurisia induzida por LPS em
camundongos.
3.2 - Objetivos específicos:
3.2.1 - Caracterizar o modelo de pleurisia induzida por LPS, o qual resolve espontaneamente,
quanto à: a cinética de acumulação de leucócitos, presença de células apoptóticas, proteínas
envolvidas com apoptose (caspase-3 clivada, Bax) e proteínas envolvidas com sobrevivência
celular (P-ERK1/2, P-IκB-α).
3.2.2 - Verificar a cinética de expressão da proteína AnxA1 através de ensaio de western blot,
utilizando extratos protéicos de células obtidas do lavado pleural de animais desafiados com
LPS.
3.2.3 - Avaliar o efeito de drogas, que foram previamente demonstradas promoverem a
resolução inflamatória no modelo de pleurisia induzida por LPS, na expressão de AnxA1 e de
vias relacionadas à sobrevivência celular e apoptose. A saber: Rolipram (inibidor de
fosfodiesterase-4), wortmannin (inibidor de PI3K) e Dexametasona (glicocorticóide sintético).
3.2.4 - Investigar o papel de AnxA1 na resolução inflamatória natural e induzida por
dexametasona, através da inibição de AnxA1, utilizando um inibidor inespecífico do receptor
onde AnxA1 atua (FPR2) ou anticorpo anti-AnxA1.
3.2.5 - Verificar o papel de AnxA1 na resolução da inflamação e na apoptose de neutrófilos
através da administração do peptídeo sintético Ac2-26 que se refere à parte N-terminal da
proteína AnxA1 e que possui atividade biológica comparada à proteína total.
37