Estudo do papel da proteína induzida por glicocorticóide Anexina ...

5.4 - O bloqueio de AnxA1 previne a resolução natural e induzida por dexametasona
A relevância funcional da AnxA1 produzida endogenamente, durante a resolução
espontânea ou induzida por dexametasona, para a resolução da inflamação em nosso modelo
experimental foi então investigada. Para tal, foram empregadas duas estratégias para bloquear
AnxA1: um anticorpo específico que se liga à AnxA1 ou um antagonista não seletivo do
receptor FPR/ALX (Boc-1). A administração de anti-AnxA1 (Figura 12) ou Boc-1 (Figura
13) impediu a resolução induzida por dexametasona (Figura 12A e 13A). Tais efeitos foram
associados com a diminuição da expressão de AnxA1 intacta (Figuras 12C e 13C) e de
eventos apoptóticos, como visto pela diminuição de Bax e neutrófilos com morfologia
apoptótica nos exudatos pleurais (Figuras 12B, 12C, 13B e 13C). Além disso, o tratamento
com anti-AnxA1 preveniu a diminuição da fosforilação de P-ERK1/2 e P-IκBα induzida por
dexametasona (Figura 12C) e o tratamento com Boc-1 produziu efeitos similares aos
encontrados com o anti-AnxA1 (Figura 13C e dado não apresentado para P-IκBα). De forma
interessante, o tratamento dos camundongos com rolipram e dexametasona também diminuiu
a clivagem de AnxA1 (Figuras 12C e 13C).
Nós também analisamos os efeitos de anti-AnxA1 e Boc-1 na resolução espontânea
da pleurisia induzida por LPS. Uma vez que o aumento de AnxA1 durante a resolução natural
se dava a partir do tempo de 48h, pensamos em prevenir este aumento utilizando as duas
estratégias de inibição citadas acima, em tempos anteriores ao de detecção da proteína, e se
estas impactariam na resolução. Assim, o tratamento dos animais foi realizado após 24h do
desafio com LPS e perdurou por 24 horas (foram dadas duas doses de ambos os tratamentos
em intervalos de 12h). Nossos resultados, apresentados nas Figuras 12D e 13D, mostram que
ambas as estratégias de inibição de AnxA1 impediram a resolução que acontece naturalmente
após 48h do desafio com LPS, sugerindo que AnxA1 produzida endogenamente é parte de um
programa pró-resolutivo fisiológico. De forma importante, o tratamento com soro não imune
de ovelha (NIS) não teve efeito na resolução da inflamação (Figura 12D).
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