asileira. Exemplos mais conhecidos são: o cancro-cítrico, causado pela bactéria Xanthomonas campestris pv. citri (Hasse) Dye, que exigiu gastos acima de 5 milhões de dólares para sua erradicação, que mesmo assim continua presente em São Paulo e em outras partes do país; o vírus da tristeza do Citrus, que na época da sua introdução por essa praga já ultrapassam R $500 milhões, porém o impacto causado no ambiente pelo uso excessivo de agrotóxicos é inestimável (M.R.V. de Oliveira, comunicação pessoal). A quarentena faz-se, então, imprescindível em todo o processo de intercâmbio de germoplasma. é baseada nas características morfológicas, utilizando-se para isso bibliografia específica. Laboratório de Nematologia - Material sendo preparado para análise de nematóides. O germoplasma, quando na forma de sementes, é sempre fumigado com fosfeto de alumínio (fosfina) por uma ou duas vezes, dizimou parte dos nossos pomares; o fungo Peronosclerospora sorghi (Weston & Uppal) C. G. Shaw em sorgo; a ferrugem do cafeeiro, causada pelo fungo Hemileia vastatrix Berk & Br., introduzida no Brasil em 1970 e que quando não controladopode causar perdas em torno de 30 por cento na produção, o que eqüivale a, aproximadamente, 500 milhões de dólares (Mônaco, 1978); o moko da bananeira, cujo agente etiológico é a bactéria Pseudomonas solanacearum (Smith) Smith., raça 2; e o inseto Anthonomus grandis Boheman, o bicudo do algodoeiro, o qual causou perdas de até 100% em algumas regiões do país, principalmente no Nordeste. Recentemente foram detectados dois novos patógenos da cultura de soja: o nematóide do cisto, Heterodera glycines I Ichinohe, em 1992 (Mendes & Dickson, 1993), e Diaporthe phaseolorum (Cke. & Ell) Sace. f. sp. meridionalis agente do cancro da haste, em 1988, que tornaram uma ameaça a essa cultura com níveis de perdas que vêm atingindo 100% em determinadas áreas (Yorinori, 1990). A mosca-branca, Bemisia tabaci raça B (=Bemisia argentifolii) entrou no país no início da década de 90, e hoje está disseminada em 17 estados da Federação, atacando inúmeras culturas de importância econômica. Os prejuízos causados Procedimentos quarentenários realizados em germoplasma vegetal: As atividades de intercâmbio e quarentena realizadas pela Embrapa/Cenargen iniciaram-se em 1976 (Warwick et al. 1983; Rocha et al. 1984, Marques et al. 1995), tendo movimentado até 1997, 324.712 acessos de germoplasma vegetal (Tabela 1) e impedido a introdução e disseminação de numerosas espécies de pragas exóticas no país (Batista et al., 1995; Mendes & Ferreira, 1994; Tenente et al., 1994 e 1996). Inspeção no ponto de ingresso do germoplasma: O Germoplasma, ao chegar, é inspecionado no ponto de ingresso, que pode ser um aeroporto, ou porto, correio ou posto de fronteira, por um inspetor da DFA. O inspetor examina as condições sanitárias e a documentação do material. Satisfeitas as exigências legais o material é liberado pela DFA para cumprir os procedimentos quarentenários no Cenargen. Quarentena em germoplasma vegetal no Cenargen: Os acessos de germoplasma, quando chegam à Área de Intercâmbio e Quarentena de Germoplasma Vegetal (AIQ), do Cenargen, são examinados quanto a presença de bactérias, fungos, nematóides, vírus, viróides, ácaros e insetos, em laboratórios especializados, por uma equipe de fitopatologistas, entomologistas e técnicos com experiência em quarentena. Laboratório de Entomologia: todo germoplasma vegetal é primeiramente examinado quanto a presença de ácaros e insetos. Os métodos utilizados são: inspeção visual, uso de refletor com lente de aumento, observação sob microscópio estereoscópio e peneiramento de sementes (para ácaros). A identificação das espécies dependendo do estágio de desenvolvimento das pragas contaminantes, enquanto que os materiais introduzidos na forma de propagação vegetativa são tratados com solução de defensivos químicos. Fitopatologia: As análises nos laboratórios de Micologia, Bacteriologia, Virologia e Nematologia são realizadas por amostragem, pois as técnicas utilizadas normalmente destroem os materiais. No caso de sementes, são retiradas amostras que variam de 2 a 10% para ser divididas entre os laboratórios. Em outras formas de propagação vegetativa tais como bulbos, estacas, mudas e rizomas, as análises são realizadas em 100% do material. Laboratório de Micologia: Para detecção de fungos em sementes ou partes da planta, são utilizados os métodos tradicionais de plaqueamento em papel de filtro ou em meio de cultura, lavagem das sementes em água e sedimentação, aprovados pelo "International Seed Testing Association" (ISTA), e descritos detalhadamente em Mendes & Ferreira (1994). Técnicas de biologia molecular, tais como RFLP e RAPDS/ PCR, são ferramentas adicionais para caracterizar patógenos de trigo, milho e sorgo a nível de DNA genômico (Urben, 1994; Ferreira et al., 1996). 36 <strong>Biotecnologia</strong> Ciência & Desenvolvimento
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