Direktor: Prof. Dr. med. habil. H. von Schwanewede
Direktor: Prof. Dr. med. habil. H. von Schwanewede
Direktor: Prof. Dr. med. habil. H. von Schwanewede
Erfolgreiche ePaper selbst erstellen
Machen Sie aus Ihren PDF Publikationen ein blätterbares Flipbook mit unserer einzigartigen Google optimierten e-Paper Software.
30<br />
Die Basenfolgen der verwendeten Primer und die Thermoprofile der beiden Stufen<br />
der mtLSU nPCR sind in den Tabellen 3 und 4 dargestellt.<br />
Tab. 3. P. jirovecii mtLSU rRNA Gen nPCR. Primer und PCR-Programm Stufe 1<br />
Nested PCR Stufe 1<br />
PAZ102-E 5‘-GAT GGC TGT TTC CAA GCC CA-3‘<br />
PAZ102-H 5‘-GTG TAG GTT GCA AAG TAG TC-3‘<br />
Thermoprofil Stufe 1 Denaturierung<br />
40 Zyklen:<br />
1 min 94°C<br />
Denaturierung 30 sec 94°C<br />
Anlagerung 30 sec 55°C<br />
Extension 30 sec 72°C<br />
Terminale Extension 5 min 72°C<br />
Kühlen � 4°C<br />
Tab. 4. P. jirovecii mtLSU rRNA Gen nPCR. Primer und PCR-Programm Stufe 2<br />
Nested PCR Stufe 2<br />
P1 5‘-CTA GGA TAT AGC TGG TTT TC-3‘<br />
P2 5‘-TCG ACT ATC TAG CTT ATC GC-3‘<br />
Thermoprofil Stufe 2 Denaturierung<br />
30 Zyklen:<br />
1 min 94°C<br />
Denaturierung 1 min 20 sec 94°C<br />
Anlagerung 1 min 20 sec 55°C<br />
Extension 1 min 20 sec 72°C<br />
Terminale Extension 5 min 72°C<br />
Kühlen � 4°C