HEM-CHECK-2 - MEDPRO GmbH

Ref. 4072LC / Art. Nr.: HOF 2012 / PZN: 3801976
HEM-CHECK-2
SCHNELLTEST ZUM NACHWEIS VON HUMANEM OKKULTEN BLUT IM STUHL
I. PRINZIP
Kolorektale Karzinome haben eine jährliche weltweite Inzidenz von mehr als
600.000 Fällen und sind damit die dritthäufigsten Karzinome.
Wie bei allen anderen Krebsarten auch, erhöht auch hier eine frühe Entdeckung
die Überlebenschancen der Patienten. Unter den Personen über 45 Jahren haben
10 % kolorektale Polypen, von denen 1 % maligne entarten. Beruhend auf der
Tatsache, dass viele der Polypen mit einer Größe über 0,5 cm bluten können, ist
die Untersuchung auf okkultes Blut im Stuhl eine einfache und preiswerte
Screeningmethode auf kolorektale Karzinome verglichen mit der Koloskopie.
Für lange Zeit waren chemische Tests, basierend auf der
Pseudoperoxydaseaktivität des Hämoglobins, im Einsatz mit den Nachteilen
geringer Sensitivität und schlechter Spezifität.
Immunologische Methoden mit gesteigerter Sensitivität und Spezifität für humanes
Blut kommen nun vermehrt zum Einsatz, auch unter Berücksichtigung ihrer
größeren technischen Komplexität verglichen mit dem Guajaktest.
Der HEM-CHECK-2 Test ist ein schneller qualitativer
immunochromatographischer Test für den Nachweis von fäkalem okkulten Blut bei
kolorektalen Karzinomen.
Die Methode benutzt eine einzigartige Kombination von monoklonalem
Farbkonjugat und polyklonalen Festphasenantikörpern, um humanes Hämoglobin
mit hoher Sensitivität und Spezifität zu identifizieren.
Nach Sammlung in einem speziellen Probensammelgefäß, welches eine
Extraktionsflüssigkeit enthält, wird die Probe aufgelöst und einige Tropfen dieses
Extraktes werden in das Probenauftragsfeld des Testes aufgetragen. Während
das Probenmaterial durch das Absorptionsfeld fließt, bindet sich das Antikörper-
Farbkonjugat an das Hämoglobin-Antigen und formt so einen Antikörper-Antigen-
Komplex. Dieser Komplex bindet sich wiederum an den Hämoglobin-Antikörper in
der Reaktionszone. Dadurch bildet sich eine pinkrosa Linie. Beim Fehlen von
Hämoglobin bildet sich keine Linie in der Testzone. Die Reaktionsmixtur fließt
weiter durch das Absorptionsfeld. Ungebundenes Konjugat bindet sich dabei an
die Reagenzien in der Kontrollzone und lässt eine pinkrosa Linie entstehen, die
eine korrekte Funktion der Komponenten demonstriert.
II. HEM-CHECK-2 KOMPONENTEN
Jede Packungseinheit enthält alle zu einer Durchführung von 12 Tests nötigen
Bestandteile.
• HEM-CHECK-2 Testkarten 12
• Probensammelgefäße (Spritzenform) welche 2 ml einer Extraktionlösung
enthalten 12
• Kolloidales Goldkonjugat (mit monoklonalen anti-humanen
Hämoglobinantikörpern) 0,9 ml
• Anleitung 1
• Informationsblätter für Patienten 12
ACHTUNG: Verwenden Sie nur Testkarten und Konjugat mit
übereinstimmender Chargenbezeichnung!
III. LAGERUNG UND STABILITÄT
1. Alle HEM-CHECK-2 Komponenten sollten bei Temperaturen zwischen 4 und
30 °C gelagert werden.
2. Die Teste nicht einfrieren.
3. Das Goldkonjugat sollte bei 2 bis 8 °C gelagert werden, um die optimale
Stabilität zu erhalten. Frieren Sie das Konjugat ebenfalls nicht ein.
4. Die Teste können bis zum aufgedruckten Verfallsdatum verwendet werden.
IV. SICHERHEITSHINWEISE
1. Dieser Test wurde zur in vitro Diagnostik bei Anwendung durch Fachkräfte
entwickelt.
2. Das Extraktionsreagenz kann Irritationen an Haut, Augen oder Schleimhäuten
verursachen. Waschen Sie sofort die betreffenden Körperstellen, wenn ein
Kontakt mit dem Extraktionsreagenz erfolgte.
3. Lesen Sie die Anleitung sorgfältig, bevor Sie den Test durchführen.
4. Benutzen Sie den Test nicht nach Ablauf des aufgedruckten Verfalldatums.
5. Benutzen Sie den Test nicht, wenn die Folienverpackung beschädigt ist.
6. Bewahren Sie das Goldkonjugat vor und nach der Anwendung bei 2° bis 8 °C
auf.
7. Verwerfen Sie wolkige oder flockige Goldkonjugat-Lösung.
V. PROBENGEWINNUNG UND VORBEREITUNG
1) Vorbemerkungen
Wissenschaftliche Experten empfehlen im Allgemeinen das Sammeln von
Stuhlproben von drei Stuhlgängen um die Wahrscheinlichkeit der Entdeckung
einer intermittierenden Blutung von Polypen oder einer inhomogenen Verteilung
des Blutes im Stuhl zu erhöhen.
2) Durchführung
a) Schreiben Sie den Namen und das Datum auf das Etikett des
Sammelgefäßes.
b) Schrauben Sie den Deckel des Sammelgefäßes ab. Dieser enthält die
Sammelsonde.
c) Sammeln Sie Stuhlproben mit der Spitze der Sonde durch Eintauchen an drei
verschiedenen Stellen derselben Stuhlprobe und geben Sie diese in das
Sammelgefäß.
d) Bringen Sie die Sammelsonde zurück an ihren Platz im Sammelgefäß und
schrauben Sie dieses sorgfältig zu .
e) Lagern Sie das Sammelgefäß bei 2 bis 8 °C.
f) Wiederholen Sie diese Schritte an drei aufeinander folgenden Tagen.
g) Nach Vervollständigung der drei Sammlungen bringen Sie das Sammelgefäß
innerhalb von 8 Tagen zurück zu Ihrem Arzt oder Labor.
h) Das Sammelgefäß kann bei Benutzung eines Transportröhrchens auch mit
der Post versandt werden.
VI. TESTDURCHFÜHRUNG
1. Die Testkomponenten sollten vor Durchführung Raumtemperatur
angenommen haben.
2. Entnehmen Sie die Testkarte aus der Schutzhülle. Reißen Sie dazu die
Schutzhülle am Einschnitt auf
3. Kennzeichnen Sie die Testkarte mit dem entsprechenden Patientennamen
oder einer Kontrollnummer.
4. Benutzen Sie das Tropffläschchen und geben Sie vorsichtig genau einen
Tropfen (40 µl) des kolloidalen Goldkonjugats frei fallend in das
Probenauftragsfeld (). Warten Sie, bis das Konjugat komplett eingezogen
ist.
5. Brechen Sie die Spitze des Sammelgefäßes ab und geben Sie durch
leichtes Drücken des Sammelgefäßes 4 oder 5 Tropfen (100 µl) der
extrahierten Probe in das Probenauftragsfeld () des Tests.
Beipack HEM-CHECK-2-12 dt. Seite 1/2 Rev. MEDPRO 2004/08

6. Lesen Sie das Resultat (T C) des Tests
10 Minuten nach dem Auftragen der
Probe auf die Testkarte () ab.
VII. AUSWERTUNG DER TESTRESULTATE
A. Negativ
Nur eine pinkrosa Linie ist bei C zu
sehen.
B. Positiv
Zwei klar erkennbare pinkrosa Linien
sind bei T und C zu sehen.
C. Nicht auswertbar
Wenn weder in der Test (T)- noch in der Kontrollzone (C) eine Linie erscheint, ist
der Test nicht auswertbar. Es wird in einem solchen Fall empfohlen, den Test
unter genauer Beachtung der Anleitung zu wiederholen.
VIII. LEISTUNGSPARAMETER
A) Genauigkeit
Um den Wert des HEM-CHECK-2 Tests zu beurteilen, wurden 135 Patienten mit
Symptomen, die eine Koloskopie notwendig machten, sowohl mit dem HEM-
CHECK-2 als auch mit HEMOCULT II (SKD, California USA) untersucht. Drei
Stuhlproben von drei Stuhlgängen wurden gesammelt. Ein Patient wurde als
positiv gewertet, wenn zumindest eine Probe für positiv befunden wurde.
Die mit HEM-CHECK-2 und HEMOCULT II erhaltenen Resultate wurden
hinsichtlich ihrer Korrelation mit den klinischen Resultaten der Koloskopie geprüft.
Für die Koloskopieresultate wurden zwei unterschiedliche Kriterien einer Posivität
definiert:
1. Blutungskriterium: Der Untersucher stellte bei der Endoskopie eine Blutung
über dem physiologischen Level fest (Polypen > 0,5 cm, kolorektales Karzinom,
Hämorrhoiden, Morbus Cohn, Analfissur, Geschwür, …).
2. Präkanzerose- oder Karzinomkriterium: Der Untersucher stellte bei der
Endoskopie entweder ein kolorektales Karzinom oder einen Polypen > 0,5 cm
fest.
In den Tabellen 1 und 2 sind die Resultate hinsichtlich dieser beiden Kriterien
zusammen gefasst.
Tabelle 1: Korrelation der Resultate von HEM-CHECK-2 und HEMOCULT II
mit dem Blutungskriterium
HEM-CHECK-2 HEMOCULT II
+ - + -
+ 38 61 26 73
BLUT - 2 34 4 32
Tabelle 2: Korrelation der Resultate von HEM-CHECK-2 und HEMOCULT II
mit dem Präkanzerose- oder Karzinomkriterium
HEM-CHECK-2 HEMOCULT II
+ - + -
Polyp und
+ 24 18 12 30
Karzinom - 8 85 18 75
Aus diesen Resultaten wurden Sensitivität, Spezifität und Übereinstimmung von
HEM-CHECK-2 und HEMOCULT II (in %) mit den beiden Kriterien berechnet
(Tabelle 3).
Tabelle 3:
Blutungskriterium
Sensitivität Spezifität Überein-stimmung
HEM-CHECK-2 38 % 94 % 53 %
HEMOCULT II 26 % 89 % 43 %
Präkanzerose- oder Karzininomkriterium
Sensitivität Spezifität Überein-stimmung
HEM-CHECK-2 57% 91% 81%
HEMOCULT II 29% 81% 64%
In allen Fällen und für beide Kriterien sind die Resultate des HEM-CHECK-2
deutlich besser als die des HEMOCULT II.
B) Kreuzreaktionen
HEM-CHECK-2 zeigt keine Kreuzreaktionen mit Hämoglobin von Rind, Schwein,
Kaninchen, Pferd oder Schaf.
C) Messbereich
Der Messbereich wurde durch Hinzufügen verschiedener Mengen Blut zu
Stuhlproben bestimmt und beträgt:
0,04 mg Hb/g Stuhl bis 120 mg Hb/g Stuhl.
IX. EINSCHRÄNKUNGEN
1. HEM-CHECK-2 dient dem Nachweis von menschlichem Blut in Mengen
oberhalb des normalen physiologischen Blutverlustes bei gesunden
Personen.
2. Die Anwesenheit von Blut im Stuhl kann neben einer kolorektalen Blutung
unterschiedliche Ursachen haben, wie Hämorrhoiden, Blut im Urin oder
Magenreizungen. Blutungen aus dem oberen Verdauungstrakt (z. B. bei
Magen- oder Duodenalulzera) können nicht in jedem Fall nachgewiesen
werden, da durch die vorherige Verdauung der Proteine die Erkennung der
Hämoglobin-Antigene durch die Antikörper nach der Proteolyse gestört sein
kann.
3. Nicht alle kolorektalen Blutungen werden von präkanzerösen Polypen oder
Karzinomen verursacht.
4. Wie bei jeder anderen diagnostischen Maßnahme sollte der Arzt die durch
diesen Test erhaltenen Daten durch weitere klinische Methoden, wie
Bariumeinlauf, Sigmoidoskopie oder Koloskopie, bestätigen.
5. Negative Resultate schließen eine Blutung nicht aus, da diese intermittierend
verlaufen kann.
6. Kolorektale Polypen in einem sehr frühen Stadium müssen nicht bluten.
Deshalb sollte diese Untersuchung regelmäßig (einmal im Jahr) bei Personen
über 45 Jahren wiederholt werden.
7. Wenn das Goldkonjugat bei längerer Lagerung nicht bei 2 bis 8 °C
aufbewahrt wird, können die Testresultate beeinträchtigt sein.
XI. LITERATUR
1. D.M. Parkin, E. Laara and C.S. Muir. "Estimates of the worldwide frequency of sixteen major cancers in 1980." Int.
J. Cancer, Volume 41: 184-197. 1988
2. Sidney J. Winaver, Paul Sherlock, David Schottenfeld and Daniel G. Miller. "Clinical trends and topics:
Screening for colon cancer." Gastroenterology, volume 70: 783-789. 1976
3. S.J. Winaver, S.D. Leidner, D.G. Miller, D. Schottenfeld, B. Befler, R.C. Kurtz, P. Sherlock and M. Stearns.
"Results of a screening program for the detection of early colon cancer and polyps using fecal occult blood testing."
Abstracts of paper, Volume 72 (n°5): A-127/1150. 1977
4. D.J. Frommer, A. Kapparis and M.K. Brown. "Improved screening for colorectal cancer by immunological detection
of occult blood." British medical journal, Volume 296: 1092-1094. 1988
5. Jerome B. Simon. "Occult blood screening for colorectal carcinoma: a critical review." Gastroenterology, Volume 88:
820-837. 1985
XI. ERLÄUTERUNG DER SYMBOLE
- PATENT PENDING -
Beipack HEM-CHECK-2-12 dt. Seite 2/2 Rev. MEDPRO 2004/08