Monolisa™ HBe Ag-Ab PLUS 72396 96 tests HBe Ag - Bio-Rad

Monolisa HBe Ag-Ab PLUS 72396
96 tests HBe Ag - 96 tests HBe Ab
KIT FÜR HBe Ag UND ANTI-HBe MITTELS ENZYMIMMUNOASSAY
IVD
Qualitätskontrolle des Herstellers
Alle von der Firma Bio-Rad hergestellten und verkauften Produkte unterliegen einem
umfassenden Qualitätssicherungssystem, das sich vom Rohstoffeingang bis zum Vertrieb
der Fertigprodukte erstreckt. Jede Charge unterliegt der Qualitätskontrolle und wird nur bei
Konformität mit den Freigabekriterien in Verkehr gebracht.
Die Aufzeichnungen zu Produktion und Qualitätskontrolle einer jeden Charge befinden sich
in unserer Firma.

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1. VERWENDUNGSZWECK
INHALTSVERZEICHNIS
2. KLINISCHE BEDEUTUNG
3. TESTPRINZIP
4. ZUSAMMENSETZUNG DES TESTS
5. ZUSÄTZLICH BENÖTIGTES MATERIAL
6. VORSICHTSMASSNAHMEN
7. SICHERHEITSVORSCHRIFTEN
8. REKONSTITUTION DER REAGENZIEN
9. HALTBARKEIT - LAGERUNG
10. PROBEN
11. TESTDURCHFÜHRUNG
12. BERECHNUNG UND AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE
13. SPEKTROPHOTOMETRISCHE ÜBERPRÜFUNG DER PROBEN-
UND REAGENZPIPETTIERUNG
14. LEISTUNGSMERKMALE DES TESTS
15. LITERATUR

1 - VERWENDUNGSZWECK
Monolisa HBe Ag-Ab PLUS wird für die qualitative Bestimmung von Hepatitis B e-Antigen (HBe
Ag) oder Antikörper gegen Hepatitis B e-Antigen (Anti-HBe) in Humanserum oder -plasma mittels
Enzymimmunoassay verwendet.
2 - KLINISCHE BEDEUTUNG
Das Vorliegen von HBe Ag deutet in der Regel auf eine aktive Virusreplikation und damit auf den
infektiösen Zustand einer Serumprobe hin. HBe Ag erscheint frühzeitig während der Hepatitis B-
Infektion. Das Vorhandensein von HBe Ag (über mehr als einen Monat) stellt ein erhöhtes Risiko für
eine schwerwiegende Lebererkrankung als Folge der Virusreplikation dar. Das Auftreten von
Antikörpern gegen HBe Ag weist auf eine zurückliegende Virusreplikation hin und stellt in der Regel
eine gute klinische Prognose dar.
3 - TESTPRINZIP
a) Bestimmung des HBe-Antigens
Der Nachweis von HBe Ag basiert auf einem 2-Schritt-“Sandwich”-Enzymimmunoassay unter
Verwendung eines humanen HBe-Antikörpers und zweier mit Peroxidase markierter monoklonaler
Maus-Anti-HBe-Antikörper (mab 1 und mab 2) gegen verschiedene Epitope.
Die Festphase besteht aus Polystyrolstreifen mit 8 Vertiefungen, die mit humanem HBe-Antikörper
beschichtet sind.
Das Testverfahren besteht aus folgenden Reaktionsschritten :
1. Inkubation der Kontroll- und Patientenproben in Anwesenheit des an die Festphase gebundenen
HBe-Antikörpers.
2. Nach einem Waschschritt Inkubation der gebundenen Komplexe mit Peroxidase markierten
monoklonalen Antikörpern.
3. Entfernen des ungebundenen Konjugates durch einen Waschzyklus und Entwicklung der
Enzymaktivität, die durch Zugabe von Substrat sichtbar gemacht wird.
4. Stoppen der Farbentwicklungsreaktion, anschließend Ablesen der Extinktion bei 450/620 nm und
Interpretation der Ergebnisse.
b) Bestimmung von HBe-Antikörpern
Für den Nachweis von HBe-Antikörpern wird die gleiche Festphase wie für HBeAg verwendet. Der
Test basiert auf der Konkurrenz zwischen dem gebundenen Antikörper und dem Antikörper in der
Probe gegenüber einer beschränkten Menge an HBe Ag als Neutralisationsreagenz. Der Nachweis
erfolgt dann durch eine weitere Mischung von Peroxidase markierten, monoklonalen Antikörpern
(mab 1 und mab 2).
Das Testverfahren besteht aus folgenden Reaktionsschritten :
1. Inkubation der Kontroll- und Patientenproben in Anwesenheit des auf der Festphase gebundenen
HBe-Antikörpers und Neutralisationsreagenz.
2. Nach einem Waschschritt Inkubation der gebundenen Komplexe von Peroxidase markierten
monoklonalen Antikörpern.
3. Entfernen des ungebundenen Konjugates durch einen Waschzyklus und Entwicklung der
Enzymaktivität, die durch Zugabe von Substrat sichtbar gemacht wird.
4. Stoppen der Farbentwicklungsreaktion, anschließend Ablesen der Extinktion bei 450/620 nm und
Auswertung der Ergebnisse.
4 - ZUSAMMENSETZUNG DES TESTS
Alle Reagenzien sind ausschließlich für die in-vitro-Diagnostik bestimmt.
Die Reagenzien reichen für 2 x 96 Bestimmungen in bis zu 12 unabhängigen Messreihen gemäß
folgender Kombinationen :
entweder 96 HBe Ag-Bestimmungen und 96 anti-HBe-Bestimmungen oder
2 x 48 HBe Ag-Bestimmungen und 2 x 48 anti-HBe-Bestimmungen gleichzeitig.
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ETIKETT ZUSAMMENSETZUNG DER REAGENZIEN DARREICHUNGS-FORM
R1 MIKROTITERPLATTE : 12 Streifen a 8 Vertiefungen, beschichtet
mit humanen HBe-Antikörpern aus für HBs Ag positivem
Plasma, inaktiviert
2 Platten
R2 KONZENTRIERTE WASCHLÖSUNG (20X) 1 Flasche
Tris-NaCl-Puffer, pH 7,4
Konservierungsmittel : ProClin
235 ml
TM 300 (0,04 %)
R3 NEGATIVE KONTROLLE für HBe Ag- und anti-HBe-Tests 1 Flasche
Humanserum, negativ für HBs Ag, HIV1-, HIV2und
HCV-Antikörper
Konservierungsmittel : 0,1% Natriumazid
8 ml
R4 Anti-HBe-POSITIVES KONTROLLSERUM 1 Flasche
Defibriniertes positives anti-HBe-Humanplasma, potentiell
positiv für HBs Ag und negativ für HIV1-, HIV2- und
HCV-Antikörper, inaktiviert
Konservierungsmittel : 0,1% Natriumazid
1,5 ml
R5 HBe Ag-POSITIVES KONTROLLSERUM 1 Flasche
Defibriniertes Humanplasma, positiv für HBe Ag und HBs Ag,
negativ für HIV1-, HIV2- und HCV-Antikörper, inaktiviert
Konservierungsmittel : 0,1% Natriumazid
1,5 ml
R6 NEUTRALISIERENDES HBe-ANTIGEN 1 Flasche
Defibriniertes Humanplasma, positiv für HBe Ag und HBs Ag,
negativ für HIV1-, HIV2- und HCV-Antikörper, inaktiviert
Konservierungsmittel : 0,1% Natriumazid
8 ml
R7a KONZENTRIERTES ANTI-HBe-TESTKONJUGAT (5X) 1 Flasche
Zwei monoklonale HBe-Antikörper (mab1 und mab2)*,
mit Peroxidase markiert
3 ml
R7b KONZENTRIERTES HBe Ag-KONJUGAT (5X) 1 Flasche
Zwei monoklonale HBe-Antikörper (mab1 and mab2)*,
mit Peroxidase markiert
3 ml
R8 PEROXIDASE-SUBSTRAT-PUFFER 1 Flasche
Zitronensäure und Natriumacetatlösung, pH 4,0 mit H2O2 (0,015 %) und DMSO (4%)
60 ml
R9 CHROMOGEN 1 Flasche
Lösung, enthält Tetramethylbenzidin (TMB) 5 ml
R10 STOPPREAGENZ 1 Flasche
1 N Schwefelsäure 28 ml
LEERE FLÄSCHCHEN FÜR REAGENZIEN (12fach) 1 Flasche
25 ml
* Das mab 1/mab 2-Verhältnis ist für die Konjugate R7a und R7b unterschiedlich.
Die beiden Konjugate dürfen nicht vertauscht werden.
5 - ZUSÄTZLICH BENÖTIGTES MATERIAL
Destilliertes oder vollständig entionisiertes Wasser.
Natriumhypochlorit (Natronbleichlauge) und Natriumbicarbonat.
Saugfähige Papiertücher.
Einweghandschuhe.
Einwegpolystyrolröhrchen (12 x 75 mm).
Manuelle oder halbautomatische, einstellbare oder voreingestellte Pipetten zum Abmessen und
Pipettieren von 50 µl, 100 µl, 200 µl und 1 ml.
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Zylinder mit Maßeinteilung : 10 ml, 50 ml, 100 ml, 1000 ml.
Vortex.
Behälter für infektiösen Abfall.
Manuelles, halbautomatisches oder automatisches Mikrotiterplatten-Waschgerät (*).
Wasserbad, auf 40°C ± 1°C eingestellt oder entsprechenden Mikrotiterplatten-Inkubator (*).
Mikrotiterplatten-Lesegerät, ausgestattet mit 450 und 620 nm-Filtern*.
(*) Wenden Sie sich an unsere Technikabteilung für detaillierte Informationen zu den empfohlenen
Materialien.
6 - VORSICHTSMASSNAHMEN
Die Zuverlässigkeit der Ergebnisse hängt von der Einhaltung folgender GLP-Richtlinien ab :
Keine Reagenzien aus unterschiedlichen Chargen innerhalb einer Messreihe vermischen.
ANMERKUNG : Für die Waschlösung (R2, grüne Aufschrift 20X), den Peroxidase-Substratpuffer
(R8, Etikett : TMB buf., blau), das Chromogen (R9, Etikett : TMB, 11X, violett) und die Stopplösung
(R10, Etikett : 1N rot) können Chargen aus unterschiedlichen Kits miteinander verwendet werden,
sofern immer die gleiche Charge für einen bestimmten Testansatz verwendet wird. Diese
Reagenzien können mit anderen Produkten unserer Firma verwendet werden. Außerdem kann die
Waschlösung (R2, mit grüner Aufschrift 20X) mit zwei anderen Waschlösungen aus den Bio-Rad
Reagens-Kits (R2, mit blauer oder orangener Aufschrift 10X) vermischt werden, nachdem sie
sorgsam rekonstituiert worden sind. Je Testlauf darf jedoch nur eine Mischung verwendet werden.
Auskunft hierzu erteilt Ihnen unser Technischer Service.
Der Name sowie die Identifikationsnummer des Tests sind auf dem Rahmen jeder Mikrotiterplatte
angegeben. Die Identifikationsnummer des Tests ist auch auf jedem einzelnen Streifen angegeben.
Monolisa HBe Ag-Ab PLUS : ID-Nummer : 56.
Überprüfen Sie die Identifikationsnummer vor jeder Verwendung des Tests. Fehlt die Identifikationsnummer
oder ist eine andere Nummer als die oben genannte angegeben, darf der Streifen nicht
verwendet werden.
Die Reagenzien nicht über das Verfallsdatum hinaus verwenden.
Vor der Verwendung 30 Minuten warten, damit sich die Reagenzien bei Raumtemperatur
stabilisieren bzw. für den verdünnten Waschpuffer R2 eine Stunde warten.
Reagenzien sorgfältig auflösen und Verunreinigungen vermeiden.
Den Test nicht durchführen, wenn Staub oder reaktive Dämpfe (saure, alkalische, Aldehyd-Dämpfe)
vorhanden sind, die zu Veränderungen der Enzymaktivität des Konjugats führen können.
Wenn möglich, Einmalartikel verwenden. Glaswaren müssen vor Gebrauch gründlich gereinigt und
mit entionisiertem Wasser gespült werden.
Die Mikrotiterplatte nach Beendigung des Waschvorgangs und vor dem Pipettieren der
Reagenzien nicht austrocknen lassen.
Für jede Probe eine neue Pipettenspitze verwenden.
Das Auswaschen der Vertiefungen ist ein wichtiger Schritt dieses Verfahrens : Die vorgeschriebene
Anzahl an Waschzyklen ist unbedingt einzuhalten. Die Vertiefungen müssen vollständig gefüllt und
dann vollständig geleert werden. Nicht vorschriftsmäßiges Waschen kann zu ungenauen
Ergebnissen führen.
Niemals dasselbe Gefäß für Konjugat- und Entwicklungslösung verwenden.
Pipetten und Geräte auf Genauigkeit und korrekte Funktion prüfen.
Das Testverfahren darf nicht geändert werden.
Die Entwicklungslösung (Substratpuffer + Chromogen) muss violett gefärbt sein. Ändert sich
wenige Minuten nach der Auflösung diese Färbung, darf das Reagenz nicht verwendet werden und
muss ersetzt werden. Die Entwicklungslösung kann in sauberen Einwegblotwannen aus Kunststoff
oder in Glasgefäßen vorbereitet werden, die zuvor mit 1N HCl gewaschen und mit destilliertem
Wasser gründlich gespült und getrocknet wurden. Dieses Reagenz muss lichtgeschützt
aufbewahrt werden.
7 - SICHERHEITSVORSCHRIFTEN
Alle Reagenzien in diesem Kit sind ausschließlich für in-vitro-Diagnostikzwecke bestimmt.
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Beim Umgang mit Reagenzien und Proben Einweghandschuhe tragen und anschließend gründlich
die Hände waschen.
Nicht mit dem Mund pipettieren.
Das Humanmaterial zur Vorbereitung von Reagenz R3 (negative Kontrolle) wurde getestet und als
nicht reaktiv für Hepatitis-B-Oberflächenantigen (HBs Ag) und Antikörper gegen humane
Immunschwächeviren (HIV-1 und HIV-2) befunden.
Das für die Zubereitung des Reaktivs R1 (sensibilisierte Mikroplatte) verwendete Material menschlichen
Ursprungs wurde kontrolliert und für nicht-reaktiv in Bezug auf Antikörper gegen das menschliche
Immunschwäche-Virus (Anti-HIV 1 und Anti-HIV 2) und in Bezug auf das Virus von Hepatitis C (VHC)
befunden. Es ist reaktiv für Hepatitis-B-Oberflächenantigen (HBs Ag). Es wurde photochemisch inaktiviert.
Das Humanmaterial zur Vorbereitung von Reagenz R4 (Anti-HBe-positive Kontrolle), R5 (HBe Agpositive
Kontrolle) und R6 (Neutralisierendes HBe Ag) wurde getestet und als nicht reaktiv für
Antikörper gegen humane Immunschwächeviren (HIV-1 und HIV-2) und Antikörper gegen das
Hepatitis-C-Virus (anti-HCV) befunden. R5 und R6 sind reaktiv für Hepatitis-B-Oberflächenantigen
(HBs Ag), R4 ist potentiell reaktiv für HBs Ag. Es wurde photochemisch inaktiviert.
Da jedoch mit keiner heute bekannten Testmethode mit letzter Sicherheit ausgeschlossen werden
kann, dass infektiöse Erreger vorhanden sind, sollten alle Reagenzien und Patientenproben als
potentiell infektiös angesehen und mit entsprechender Sorgfalt gehandhabt werden.
Alle Materialien, die mit Proben und Reagenzien in Berührung kommen, einschließlich der
Waschlösungen, sollten als infektiös betrachtet und entsprechend behandelt werden.
Verschütten von Proben oder probenhaltigen Lösungen vermeiden.
Verschüttete Proben müssen mit 10%iger Natriumhypochloritlösung gespült werden. Wenn es sich
bei der Flüssigkeit um eine Säure handelt, muss die verschüttete Menge zunächst mit
Natriumbicarbonat neutralisiert und anschließend mit Papiertüchern getrocknet werden. Das zum
Reinigen verwendete Material muss in einem Behälter für infektiösen Abfall entsorgt werden.
Proben und Reagenzien, die Humanmaterial enthalten, sowie kontaminierte Materialien und
Produkte müssen nach einer Dekontaminierung entsorgt werden:
- entweder durch Eintauchen in Natriumhypochloritlösung mit einer Natriumhypochlorit-
Endkonzentration von 5% (1 Teil Natriumhypochloritlösung auf 10 Teile kontaminierte Flüssigkeit
oder Wasser) für die Dauer von 30 Minuten
- oder durch Autoklavieren bei 121°C über mindestens 2 Stunden. Autoklavieren ist die beste
Methode zum Inaktivieren von HIV- und HBV-Viren.
NATRIUMHYPOCHLORITHALTIGE LÖSUNGEN NICHT IN DEN AUTOKLAVEN STELLEN.
Lösungen, Waschabfälle oder Flüssigkeiten, die biologische Proben enthalten, müssen vor dem
Ausgießen in den Abfluss neutralisiert und/oder autoklaviert werden.
Ein Sicherheitsdatenblatt ist auf Anfrage erhältlich.
Chemikalien müssen gemäß den GLP-Richtlinien verwendet und entsorgt werden.
Jeglicher Haut- und Schleimhautkontakt mit dem Substratpuffer, dem Chromogen und der
Stopplösung ist zu vermeiden (Vergiftungs-, Reizungs- und Verbrennungsgefahr).
In mehreren Kitkomponenten ist Natriumazid als Konservierungsmittel enthalten. Natriumazid kann
zur Bildung von Blei- oder Kupferaziden in Rohrleitungen führen. Solche Azide können explosiv
sein. Um die Azidbildung zu vermeiden, Leitungen mit reichlich Wasser nachspülen, wenn die
azidhaltigen Lösungen nach Inaktivierung über den Abfluss entsorgt werden.
Einige Reagenzien enthalten ProClin 300 (0.04%, 0.1 % und/oder 0,5%).
Xi Reizend
R43 : Sensibilisierung durch Hautkontakt möglich
S28-37 : Bei Berührung mit der Haut sofort mit reichlich Wasser und Seife abwaschen.
Geeignete Schutzhandschuhe tragen.
8 - REKONSTITUTION DER REAGENZIEN
ANMERKUNG : Die Reagenzien vor der Verwendung auf Raumtemperatur (18 - 30°C) bringen.
Mikrotiterplatte (R1)
Jeder Trägerrahmen mit 12 Streifen ist in einem versiegelten Folienbeutel verpackt. Den Beutel mit
einer Schere oder einem Skalpell 0,5 bis 1 cm über der Versiegelung aufschneiden. Den Beutel öffnen

und den Rahmen herausnehmen. Die unbenutzten Streifen wieder zurück in den Beutel geben. Den
Beutel sorgfältig verschließen und wieder bei +2-8 °C lagern.
Konzentrierte Waschlösung (20X) : R2
Um die gebrauchsfertige Waschlösung herzustellen, im Verhältnis 1:20 mit destilliertem
Wasserverdünnen. Mischen.
Für einen Streifen werden 75 ml gebrauchsfertige Waschlösung benötigt.
Konzentriertes Anti-HBe-Konjugat (R7a)
R7a im Verhältnis 1 : 5 mit vorbereiteter R2-Lösung entsprechend der Anzahl der verwendeten
Teststreifen verdünnen :
Anzahl verwendeter Streifen Volumen von R7a (ml) Mit R2 auffüllen auf (ml)
1 0,2 1
2 0,4 2
3 0,6 3
4 0,8 4
5 1 5
6 1,2 6
7 1,4 7
8 1,6 8
9 1,8 9
10 2 10
11 2,2 11
12 2,4 12
Mischen.
Das Konjugat R7a kann unverdünnt benutzt werden. Folgendes Verfahren wird empfohlen : 80 µl der
verdünnten Waschlösung (R2) zu 20 µl Anti-HBe-Konjugat R7a geben. Mischen.
Konzentriertes HBe Ag-Konjugat (R7b)
In gleicher Weise wie für das Konjugat R7a vorgehen.
Farbentwicklungslösung (R8 + R9)
Reagenz (R9) im Verhältnis 1:11 mit Reagenz R8 verdünnen (Beispiel: 1 ml Reagenz R9 in 10 ml
Reagenz R8). Homogenisieren.
Für 1 bis 10 Teststreifen sind 10 ml erforderlich und ausreichend.
9 - HALTBARKEIT - LAGERUNG
Den Kit bei +2-8°C lagern. Bei dieser Lagertemperatur kann jedes Reagenz bis zum auf der Packung
angegebenen Verfallsdatum verwendet werden, sofern nicht anders vorgeschrieben.
R1 : Nach dem Öffnen des vakuumversiegelten Beutels sind die bei +2-8 °C im sorgfältig
wiederversiegelten Beutel gelagerten Mikrowell-Streifen 1 Monat lang verwendbar.
R2 : Die verdünnte Waschlösung kann bei Raumtemperatur (+2-30°C) 2 Wochen gelagert werden.
Die konzentrierte Waschlösung (R2) kann bei +2-30°C gelagert werden.
R7a : Das verdünnte Konjugat für den Anti-HBe-Test kann bis zu 8 Stunden bei Raumtemparatur (18-30°C)
gelagert werden. Die Arbeitskonjugatlösung sollte bei Raumtemperatur (18-30°C) lichtgeschützt
aufbewahrt werden.
R7b : Das verdünnte Konjugat für den HBe-Ag-Test kann bis zu 8 Stunden bei Raumtemparatur (18-30°C)
gelagert werden. Die Arbeitskonjugatlösung sollte bei Raumtemperatur (18-30°C) lichtgeschützt
aufbewahrt werden.
R8 + R9 : Nach der Rekonstitution bleibt das im Dunkeln gelagerte Reagens bei Raumtemperatur
(18-30°C) 6 Stunden verwendbar.
10 - PROBEN
Die Entnahme der Blutprobe erfolgt gemäß der üblichen Vorgehensweise.
Der Test sollte mit unverdünntem Serum oder Plasma (in EDTA-, Citrat, ACD-basierten
Antikoagulanzien gesammelt) durchgeführt werden.
Das Serum bzw. Plasma so bald wie möglich extrahieren, um eine Hämolyse zu vermeiden. Proben,
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die Gerinnsel enthalten, müssen vor dem Test durch Zentrifugation geklärt werden.
Aufgeschwemmte Fibrinaggregate oder -partikel können zu falsch positiven Ergebnissen führen.
Die Proben sollten bei 2 bis 8°C gelagert werden, sofern das Testen innerhalb von 7 Tagen erfolgt,
andernfalls sollten sie bei -20°C tiefgefroren aufbewahrt werden.
Wiederholtes Einfrieren/Auftauen vermeiden.
Zum Transport sind die Proben gemäß den Bestimmungen für den Transport infektiöser Mittel zu
verpacken. Nach Möglichkeit sollten die Proben tiefgefroren transportiert werden.
KEINE KONTAMINIERTEN, HYPERLIPÄMISCHEN ODER STARK HÄMOLYTISCHEN SEREN VERWENDEN.
ANMERKUNG : Proben mit einem Bilirubingehalt bis 100 mg/l, lipämische Proben mit einem
Trioleingehalt bis 36 g/l sowie hämolytische Proben mit einem Hämoglobingehalt bis 2,5 mg/ml
beeinträchtigen die Ergebnisse nicht.
Bei negativen, mit 45 mg/ml Albumin aufgestockten Proben wurde eine Abnahme der Werte beobachtet.
11 - TESTDURCHFÜHRUNG
Der HBe Ag- und der Anti-HBe-Test können mit der gleichen Platte durchgeführt werden. In diesem
Fall wie folgt vorgehen:
Anti-HBe-Test : Reihen 1 - 6
HBe-Ag-Test : Reihen 7 - 12
a) Anti-HBe-Testverfahren
1. Die Waschlösung vorbereiten.
2. Einen oder mehrere Streifen aus der Schutzpackung entnehmen. Unbenutzte Streifen wieder in die
Packung stecken und verschließen.
3. In jede Vertiefung Folgendes pipettieren:
A1, B1, C1 : 100 µl der negativen Kontrolle (R3)
D1 : 100 µl der positiven Kontrolle (R4)
E1, F1, G1 : 100 µl der Probe
Ja nachdem, welches System verwendet wird, können die Positionen der Kontrolllösungen oder
die Reihenfolge der Dispensierung verändert werden.
Bitte beachten : Es gibt einen deutlichen Farbunterschied zwischen leeren Vertiefungen und
Vertiefungen, die Probe enthalten (gelb). Das Vorhandensein von Probe in den Vertiefungen kann
durch spektrophotometrisches Ablesen bei 490 nm (einfache Wellenlänge) überprüft werden.
Siehe Abschnitt 13 : SPEKTROPHOTOMETRISCHE ÜBERPRÜFUNG DER PROBEN- UND
REAGENZPIPETTIERUNG.
4. Rasch 50 µl neutralisierendes HBe-Antigen (R6) pro Vertiefung zugeben. Homogenisieren.
Mit Klebefolie abdecken und 3 Stunden ± 10 Minuten bei 37°C ± 1°C inkubieren.
Bitte beachten : Die Verteilung des neutralisierenden violettfarbenen HBe-Antigens (R6) kann bei
diesem Schritt optisch kontrolliert werden. Das Vorhandensein von neutralisierendem HBe-Antigen
in den Vertiefungen kann durch spektrophotometrisches Ablesen bei 490 nm (einfache
Wellenlänge) überprüft werden. Siehe Abschnitt 13 : SPEKTROPHOTOMETRISCHE
ÜBERPRÜFUNG DER PROBEN- UND REAGENZPIPETTIERUNG.
5. Vor dem Ende von Schritt 4 die verdünnte Konjugatlösung R7a vorbereiten.
6. Die Klebefolie entfernen. Den Inhalt aller Vertiefungen in einen Behälter für infektiöse Abfälle
absaugen. Die Mikrotiterplatte viermal waschen.
7. 100 µl der verdünnten Konjugatlösung (R7a) schnell in alle Vertiefungen pipettieren (siehe Abschnitt
8 : REKONSTITUTION DER REAGENZIEN). Alternativ kann das Konjugat R7a ohne Vorverdünnung
benutzt werden. Hierfür wird folgendes Verfahren empfohlen : Zunächst 80 µl der verdünnten
Waschlösung (R2) in jede Vertiefung und anschließend 20 µl des Anti-HBe-Konjugats R7a (5fach)
zugeben. Homogenisieren.
Mit Klebefolie abdecken und 30 Minuten bei 37°C ± 1°C (mindestens 25 Minuten, höchstens 40
Minuten) inkubieren. Folie entfernen, den Inhalt aller Vertiefungen in einen Behälter für infektiöse
Abfälle absaugen und fünfmal waschen.
Bitte beachten : Die Verteilung der verdünnten violettfarbenen Konjugatlösung R7a kann bei
diesem Schritt optisch kontrolliert werden. Das Vorhandensein der verdünnten Konjugatlösung
R7a in den Vertiefungen kann durch spektrophotometrisches Ablesen bei 620 nm
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(einfache Wellenlänge) überprüft werden. Siehe Abschnitt 13 : SPEKTROPHOTOMETRISCHE
ÜBERPRÜFUNG DER PROBEN- UND REAGENZPIPETTIERUNG.
8. Direkt vor der Verwendung die Farbentwicklungslösung (R8 + R9) vorbereiten. Siehe Abschnitt 8 :
REKONSTITUTION DER REAGENZIEN.
9. 80 µl der Farbentwicklungslösung schnell in alle Vertiefungen pipettieren. Die Platte lichtgeschützt
bei Raumtemperatur (+18-30°C) 30 Minuten ± 5 Minuten stehen lassen.
Bitte beachten : Die Verteilung der violetten Entwicklungslösung kann bei diesem Schritt optisch
kontrolliert werden : Es gibt einen deutlichen Farbunterschied zwischen leeren Vertiefungen
und Vertiefungen, die bereits violette Lösung enthalten. Siehe Abschnitt 13 : SPEKTRO-
PHOTOMETRISCHE ÜBERPRÜFUNG DER PROBEN- UND REAGENZPIPETTIERUNG.
10.Rasch 100 µl Stopplösung (R10) in jede Vertiefung geben.
Bitte beachten : Die Verteilung der farblosen Stopplösung kann bei diesem Schritt optisch
kontrolliert werden. Nach Zugabe der Stopplösung wird das pinkfarbene Substrat bei negativen
Proben farblos, bei positiven Proben hingegen wird das blaue Substrat gelb.
11.Den Boden der Platte sorgfältig abwischen. Bis zum Ablesen des Ergebnisses mindestens 4
Minuten nach Zugabe der Stopplösung abwarten, jedoch innerhalb von 30 Minuten nach Stoppen
der Reaktion mit einem Plattenleser bei 450/620 nm ablesen.
b) HBe-Ag-Testverfahren
1. Die Waschlösung vorbereiten.
2. Einen oder mehrere Streifen aus der Schutzpackung entnehmen. Unbenutzte Streifen wieder in die
Packung stecken und verschließen.
3. In jede Vertiefung Folgendes pipettieren:
A1, B1, C1 : 100 µl der negativen Kontrolle (R3)
D 1 : 100 µl der positiven Kontrolle (R5)
E1, F1, G1 : 100 µl der Probe
Ja nachdem, welches System verwendet wird, können die Positionen der Kontrolllösungen oder
die Reihenfolge der Dispensierung verändert werden.
Bitte beachten : Es gibt einen deutlichen Farbunterschied zwischen leeren Vertiefungen und
Vertiefungen, die Probe enthalten (gelb). Das Vorhandensein von Probe in den Vertiefungen kann durch
spektrophotometrisches Ablesen bei 490 nm (einfache Wellenlänge) überprüft werden. Siehe Abschnitt
13 : SPEKTROPHOTOMETRISCHE ÜBERPRÜFUNG DER PROBEN- UND REAGENZPIPETTIERUNG.
4. Mit Klebefolie abdecken und 3 Stunden ± 10 Minuten bei 37°C ± 1°C inkubieren.
5. Vor dem Ende von Schritt 4 die Konjugatlösung R7b vorbereiten.
6. Die Klebefolie entfernen. Den Inhalt aller Vertiefungen in einen Behälter für infektiöse Abfälle
absaugen. Die Mikrotiterplatte viermal waschen.
7. Rasch 100 µl der verdünnten Konjugatlösung (R7b) in jede Vertiefung geben. Alternativ kann das
Konjugat R7b unverdünnt verwendet werden. Hierfür wird folgendes Verfahren empfohlen:
Zunächst 80 µl der verdünnten Waschlösung (R2) in jede Vertiefung und anschließend 20 µl des
Anti-HBe-Konjugats R7b (5fach) geben. Homogenisieren.
Mit Klebefolie abdecken und 30 Minuten bei 37°C ± 1°C (mindestens 25 Minuten, höchstens 40
Minuten) inkubieren. Folie entfernen, den Inhalt aller Vertiefungen in einen Behälter für infektiöse
Abfälle absaugen und fünfmal waschen.
Bitte beachten: Die Verteilung der verdünnten türkisfarbenen Konjugatlösung R7b kannbei diesem
Schritt optisch kontrolliert werden. Das Vorhandensein der verdünnten Konjugatlösung R7a in den
Vertiefungen kann durch spektrophotometrisches Ablesen bei 620 nm (einfache Wellenlänge)
überprüft werden. Siehe Abschnitt 13 : SPEKTROPHOTOMETRISCHE ÜBERPRÜFUNG DER
PROBEN- UND REAGENZPIPETTIERUNG.
8. Direkt vor der Verwendung die Farbentwicklungslösung (R8 + R9) vorbereiten.
9. 80 µl der Farbentwicklungslösung (R8 + R9) schnell in alle Vertiefungen pipettieren. Die Platte
lichtgeschützt bei Raumtemperatur (+18-30°C) 30 ± 5 Minuten stehen lassen.
Bitte beachten : Die Verteilung der violetten Entwicklungslösung kann bei diesem Schritt optisch
kontrolliert werden : Es gibt einen deutlichen Farbunterschied zwischen leeren Vertiefungen
und Vertiefungen, die bereits violette Lösung enthalten. Siehe Abschnitt 13 :
SPEKTROPHOTOMETRISCHE ÜBERPRÜFUNG DER PROBEN- UND REAGENZPIPETTIERUNG.
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10.Rasch 100 µl Stopplösung (R10) in jede Vertiefung geben.
Bitte beachten: Die Verteilung der farblosen Stopplösung kann bei diesem Schritt optisch
kontrolliert werden. Nach Zugabe der Stopplösung wird das pinkfarbene Substrat bei negativen
Proben farblos, bei positiven Proben hingegen wird das blaue Substrat gelb.
11.Den Boden der Platte sorgfältig abwischen. Bis zum Ablesen des Ergebnisses mindestens
4 Minuten nach Zugabe der Stopplösung abwarten, jedoch innerhalb von 30 Minuten nach
Stoppen der Reaktion mit einem Plattenleser bei 450/620 nm ablesen.
c) Gleichzeitiger Test für Anti-HBe und HBe Ag (auf der gleichen Platte)
Die Vorgehensweise ist die gleiche wie oben beschrieben. Einziger Unterschied ist die
Probenpipettierung, die wie folgt aussieht:
Anti-HBe-Test : Reihen 1 - 6
HBe-Ag-Test : Reihen 7 - 12
12 - BERECHNUNG UND AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE
a) Anti-HBe-Test
1. Mittlere Extinktion (= Optische Dichte O.D.) der Bestimmungen der negativen Kontrolle berechnen:
Mittlere Extinktion (OD R3)
Beispiel : Negative Kontrolle R3 OD
1 1,607
2 1,410
3 1,552
Gesamt-OD = 4,569
Mittlere Extinktion (OD R3) = Gesamt-Extinktion / 3 = 4,569 / 3 = 1,523
Es darf nur ein R3-Extinktionswert verworfen werden, wenn dieser um mehr als 25% vom Mittelwert
abweicht.
Anschließend die mittlere Extinktion mit den beiden übrigen Werten berechnen.
2. Berechnung des Grenzwertes
Für jede Platte wird der Grenzwert anhand folgender Formel berechnet:
Grenzwert = Mittelwert (OD R3) x 0,4
Beispiel :
Mittlere Extinktion (OD R3) = 1,523
Grenzwert = 1,523 x 0,4 = 0,609
3. Validierung des Assays für den Anti-HBe-Test
Mittlere Extinktion (OD R3) > 0,900
OD R4 < 0,150.
4. Berechnung des Verhältnisses
Für jede Probe wird das Verhältnis anhand folgender Formel berechnet :
Verhältnis = Extinktion der Probe / Grenzwert
5. Auswertung der Ergebnisse
Die Proben gelten als :
positiv, wenn das Verhältnis gleich oder kleiner als 0,9 ist (Verhältnis ≤ 0,9)
negativ, wenn das Verhältnis größer als 1,1 ist (Verhältnis > 1,1)
Liegt ein Ergebnis zwischen 0,9 und 1,1, sollte der Anti-HBe-Test mit einer zweiten Probe
durchgeführt werden.
Eine anfänglich positive Probe sollte in Doppelbestimmung erneut getestet werden. Ist nach der
Testwiederholung mindestens 1 der 2 Bestimmungen wiederholt positiv, gilt die Probe als positiv.
b) HBe Ag-Test
1. Mittlere Extinktion (= Optische Dichte O.D.) der Bestimmungen der negativen Kontrolle berechnen:
Mittlere Extinktion (OD R3)
Beispiel : Negative Kontrolle R3 OD
1 0,023
2 0,022
3 0,026
Gesamt-OD = 0,071
24

Mittlere Extinktion (OD R3) = Gesamt-OD / 3 = 0,071 / 3 = 0,024
Es darf nur ein R3-Extinktionswert verworfen werden, wenn dieser um mehr als 25% vom Mittelwert
abweicht.
Anschließend die mittlere Extinktion mit den beiden übrigen Werten berechnen.
2. Berechnung des Grenzwertes
Für jede Platte wird der Grenzwert anhand folgender Formel berechnet :
Grenzwert = Mittelwert (OD R3) x + 0,025
Beispiel :
Mittlere Extinktion (ODR3) = 0,024
Grenzwert = 0,024 + 0,025 = 0,049
3. Validierung des Assays für den HBe Ag-Test
Mittlere Extinktion (OD R3) < 0,060
OD R5 > 0,800.
4. Berechnung des Verhältnisses
Für jede Probe wird das Verhältnis anhand folgender Formel berechnet :
Verhältnis = Extinktion der Probe / Grenzwert
5. Auswertung der Ergebnisse
Die Proben gelten als :
positiv, wenn das Verhältnis größer oder gleich 1 ist (Verhältnis ≥ 1)
negativ, wenn das Verhältnis kleiner als 1 ist (Verhältnis < 1)
Eine anfänglich positive Probe sollte in Doppelbestimmung erneut getestet werden. Ist nach der
Testwiederholung mindestens 1 der 2 Bestimmungen positiv, gilt die Probe als positiv.
13 - SPEKTROPHOTOMETRISCHE ÜBERPRÜFUNG DER PROBEN-
UND REAGENZPIPETTIERUNG
1 - Anti-HBe-TEST
Vorhandensein von Probe und Kontrolle
Das Vorhandensein von Probe und Kontrolle in den Vertiefungen kann durch automatisches Ablesen
bei 490 nm überprüft werden. Jede Vertiefung mit Probe bzw. Kontrolle muss eine Extinktion von
über 0,050 aufweisen.
Vorhandensein von neutralisierendem HBe-Antigen (R6)
Das Vorhandensein von neutralisierendem HBe-Antigen in den Vertiefungen kann durch
automatisches Ablesen bei 490 nm mit einer Berechnung von DOD überprüft werden.
DOD = (OD490 Probe (oder Kontrolle) mit R6) – (OD490 Probe (oder Kontrolle) alleine)
DOD muss größer als 0,150.
Vorhandensein von konzentriertem Anti-HBe-Konjugat (R7a)
Das Vorhandensein von verdünntem Konjugat R7a in den Vertiefungen kann durch automatisches
Ablesen bei 620 nm überprüft werden.
Die Extinktion jeder Vertiefung muss größer oder gleich 0,070 und kleiner oder gleich 0,200 sein.
Vorhandensein von enzymatischer Entwicklungslösung (R8 + R9)
Das Vorhandensein von Entwicklungslösung in den Vertiefungen kann durch automatisches Ablesen
bei 490 nm überprüft werden.
Der Extinktionswert jeder Vertiefung muss größer als 0,100 sein.
2 - HBe Ag-Test
Vorhandensein von Probe und Kontrolle
Das Vorhandensein von Probe und Kontrolle in den Vertiefungen kann durch automatisches Ablesen
bei 490 nm überprüft werden. Jede Vertiefung mit Probe bzw. Kontrolle muss eine Extinktion von
über 0,050 aufweisen.
Vorhandensein von konzentriertem HBe Ag-Konjugat (R7b)
Das Vorhandensein von verdünntem Konjugat R7b in den Vertiefungen kann durch automatisches
Ablesen bei 620 nm überprüft werden.
Der Extinktionswert jeder Vertiefung muss größer als 0,210 sein.
25

Vorhandensein von enzymatischer Entwicklungslösung (R8 + R9)
Das Vorhandensein von Entwicklungslösung in den Vertiefungen kann durch automatisches Ablesen
bei 490 nm überprüft werden.
Der Extinktionswert jeder Vertiefung muss größer als 0,100 sein.
14 - LEISTUNGSMERKMALE DES TESTS
Die unten zusammengefassten Leistungsmerkmal von Monolisa HBe Ag-Ab PLUS wurden in zwei
unterschiedlichen Labors mit Proben von Blutspendern, Patienten und Serokonversionspanels bestimmt.
1 - HBe Ag-Test
Spezifität
Die Spezifität des Tests bei insgesamt 200 nach dem Zufallsprinzip ausgewählten Proben von
Blutspendern lag bei 100% [98,51 – 100%], (IC95). Darüber hinaus wurde die Spezifität mit
Patientenproben bestimmt. Sie lag bei 100% [99,28 – 100%] (IC95, 416/416 Proben).
Die Analyse von 195 Patienten mit verschiedenen pathologischen Befunden oder Zuständen ohne
Bezug zu Hepatitis B (Schwangerschaft, Rheumafaktor, anti-nukleäre Antikörper, Ig-Antikörper von
der Maus oder andere Viren- oder Bakterieninfektionen) ergab eine Spezifität von 99,49% [97,18 –
99,99%] (IC 95, 194/195 als negativ befundene Proben).
Analytische Sensitivität
Die Sensitivitätsgrenze des Tests wurde bei der Evaluierung mit dem PEI-Standard auf 0,64 E/ml
[0,49 – 0,84] (IC 95) geschätzt.
Sensitivität
Die Sensitivität wurde mit 203 positiven Proben von Patienten mit chronischer HBV-Infektion in der
Nachuntersuchung und mit im Handel erhältlichen Serokonversionspanels getestet. Die Sensitivität
lag bei diesen Proben bei 99,51% [97,29 – 99,99%] (IC 95, 202/203 Proben).
Reproduzierbarkeit des Assays
Die Reproduzierbarkeit von Monolisa HBe Ag-Ab PLUS (HBe Ag) wurde anhand der Analyse von
4 Proben bestimmt : 1 negative Probe, 1 für HBe Ag schwach positive Probe, 1 für HBe Ag stark
positive Probe und 1 für HBe Ag mäßig positive Probe.
Zur Ermittlung der Intraassay-Reproduzierbarkeit wurden diese 4 Proben 30mal in einer Messreihe
untersucht. Zur Ermittlung der Interassay-Reproduzierbarkeit wurden diese 4 Proben in
Doppelbestimmung über 20 Tage in 2 Messreihen jeden Tag untersucht.
Die Ergebnisse sind nachfolgend aufgeführt :
Tabelle 1 : Intra-Assay-Reproduzierbarkeit
n = 30 Probe 1 Probe 2 Probe 3 Probe 4
Mittleres Verhältnis 3,56 5,29 27,24 45,56
Standard-abweichung (SA) 0,05 0,35 0,63 2,88
VK (%) 14,20 6,53 2,31 6,33
Tabelle 2 : Inter-Assay-Reproduzierbarkeit
n = 80 Probe 1 Probe 2 Probe 3 Probe 4
Mittleres Verhältnis 0,51 8,19 27,33 46,35
Standard-abweichung (SA) 0,12 1,17 3,26 4,98
VK (%) 23,86 14,27 11,92 10,74
2 - Anti-HBe-Test
Spezifität
Die Spezifität des Tests bei insgesamt 200 nach dem Zufallsprinzip ausgewählten Proben von
Blutspendern lag bei 100% [98,51 – 100%], (IC95). Darüber hinaus wurde die Spezifität mit 206
Patientenproben bestimmt. Sie lag bei 98,54% [95,80 - 99,70%] (IC95, 203/206 Proben).
198 Patienten mit verschiedenen pathologischen Befunden oder Zuständen ohne Bezug zu Hepatitis
B (Schwangerschaft, Rheumafaktor, anti-nukleäre Antikörper, Ig-Antikörper von der Maus oder
andere Viren- oder Bakterieninfektionen) wurden getestet. 3 Proben wurden als positiv befunden
(2 HCV-positive Proben und 1 Rheumafaktor-positive Probe).
Die Spezifität dieser Population lag bei 98,48% [95,64 - 99,69%] (IC 95, 195/198 als negativ
befundene Proben).
26

Diese Proben wurden erneut getestet. Die Rheumfaktor-positive Probe wurde als wiederholt reaktiv
befunden. Von den beiden HCV-positiven Proben wurde eine als negativ und die andere als nicht
eindeutig befunden.
Sensitivität
Die Sensitivitätsstudien wurden mit 220 positiven Proben von Patienten mit chronischer HBV-
Infektion in der Nachuntersuchung und mit im Handel erhältlichen Serokonversionspanels
durchgeführt. Die Sensitivität lag bei 98,64% [96,07 – 99,72%] (IC 95, 217/220 Proben).
Reproduzierbarkeit des Assays
Die Reproduzierbarkeit von Monolisa HBe Ag-Ab PLUS (Anti-HBe) wurde anhand der Analyse von
4 Proben bestimmt : 1 negative Probe, 1 für Anti-HBe schwach positive Probe, 1 für Anti-HBe stark
positive Probe und 1 für Anti-HBe mäßig positive Probe.
Zur Ermittlung der Intraassay-Reproduzierbarkeit wurden diese 4 Proben 30mal in einer Messreihe
untersucht. Zur Ermittlung der Interassay-Reproduzierbarkeit wurden diese 4 Proben in
Doppelbestimmung über 20 Tage in 2 Messreihen jeden Tag untersucht.
Die Ergebnisse sind nachfolgend aufgeführt:
Tabelle 1 : Intra-Assay-Reproduzierbarkeit
n = 30 Probe 1 Probe 2 Probe 3 Probe 4
Mittleres Verhältnis 3,15 0,69 0,42 0,03
Standard-abweichung (SA) 0,05 0,04 0,04 0,00
VK (%) 1,7 5,7 10,5 6,6
Tabelle 2 : Inter-Assay-Reproduzierbarkeit
n = 80 Probe 1 Probe 2 Probe 3 Probe 4
Mittleres Verhältnis 2,39 0,81 0,59 0,3
Standard-abweichung (SA) 0,23 0,077 0,09 0,01
VK (%) 9,6 9,5 14,5 39,3
15 - LITERATUR
1-MIYAKAWA Y.; MAYUMI M.; (1985)
Hepatitis Be antigen and antibody (HBe Ag/Anti-HBe) in Hepatitis B. Academic Press., chap. 4: 47-76
2-KANNO A.; OHORI H., MATSUDA K.; NAKAYAMA H.; MIYAZAKI Y.; ISHIIM.; SUZUKI H.; OHTSUKI
M.; GOTO Y. (1987)
Virological significance of HBe Ag subtypes (HBe Ag/1 and HBe Ag/2) in patients with type B
hepatitis. Hepatology; 7 (1) 15-19
3-BRECHOT C.; (1987)
Les marqueurs et la prévention des infections par le virus de l’hépatite B en 1987. Encyclopédie
Médicochirurgicale; Instantanés Médicaux, 4; 9-12
4-THIERS V.; BOUCHARDEAU F.; COUROUCE A.M.; TIOLLAIS P.; BRECHOT C., (1986)
L’ADN du virus de l’hépatite B comme marqueur de multiplication virale: comparaison avec
l’antigène HBe et l’anticorps anti Hbe. La Presse Médicale: 15: 1219-1222
5-LAROUZE B., PENALBA C., DAZZA M.C. (1983)
Signification des marqueurs sériques du virus de l’hépatite B. Biologiste et praticien; 56; 13-22
6-ALDERSHVILE J., FROSNER G.G.; NIELSEN J.O.; HARDT F. DEINHARTD F.; SKINHOJ P., (1980)
Hepatitis Be antigen and antibody measured by radioimmuno-assay in acute hepatitis B surface
antigen positive hepatitis. J. Infect. dis.: 141 (3), 293-297
7-TAKAHASHI K.; IMAI M., TSUDA F., TAKAHASHI T., MIYAKAWA Y. MAYUMI M. (1976)
Association of Dane particles with e antigen in the serum of asymptomatic carriers of hepatitis B
surface antigen. J. of Immunol. 117 (1); 102 – 105
27

IVD
(GB) - CE marking (European directive 98/79/CE on in vitro diagnostic medical devices)
(FR) - Marquage CE (Directive européenne 98/79/CE relative aux dispositifs médicaux de diagnostic in vitro)
(ES) - Marcado CE (Directiva europea 98/79/CE sobre productos sanitarios para diagnóstico in vitro)
(IT) - Marchiatura CE (Direttiva europea 98/79/CE relativa ai dispositivi medico-diagnostici in vitro)
(DE) - CE Konformitätskennzeichnung (Europäische Richtlinie 98/79/EG über In-vitro-Diagnostika)
(PT) - Marcação CE (Directiva europeia 98/79/CE relativa aos dispositivos médicos de diagnóstico in vitro)
(SE) - CE-märkning (Europeiskt direktiv 98/79/EG om medicintekniska produkter för in vitro-diagnostik)
(DK) - CE-mærkningen (Europa direktiv 98/79/EF om medicinsk udstyr til in vitro-diagnostik)
(GR) - CE ( 98/79/CE in vitro )
(PL) - CE oznaczenie (Dyrektywa unijna 98/79/CE dotycząca produktów medycznych do badań in vitro)
(LT) - CE ženklas (Europos sąjungos direktyva 98/79/CE dėl in vitro diagnostikos medicinos prietaisų)
(HU) - CE jelzés (98/79/CE Európai Irányelv az in vitro orvosi diagnosztikai eszközökről)
(EE) - CE märgistus (Euroopa direktiiv 98/79/CE in vitro diagnostikameditsiiniseadmete kohta)
(SK) - CE označenie o zhode (Európska direktíva 98/79/CE pre in vitro diagnostické zdravotnícke postupy)
(CZ) - CE značka (Evropská direktiva 98/79/CE o diagnostických zdravotnických prostředcích in vitro)
(NO) - CE-merking (EU-direktiv 98/79/CE om medisinsk utstyr til in vitro-diagnostikk)
(RO) - Marca CE (Directiva europeana 98/79/CE pentru dispozitive medicale de diagnostic in vitro)
(BG) - СЕ маркировка (Европейска директива 98/79/CE за ин витро диагностичните медицински изделия)
(GB) - For in vitro diagnostic use
(FR) - Pour diagnostic in vitro
(ES) - Para diagnóstico in vitro
(IT) - Per uso diagnostico in vitro
(DE) - In-vitro-Diagnostikum
(PT) - Para uso em diagnóstico in vitro
(SE) - In vitro-diagnostik
(DK) - In vitro diagnose
(GR) - in vitro
(PL) - Do stosowania in vitro
(LT) - in vitro diagnostikai
(HU) - Csak in vitro diagnosztikai alkalmazásra
(EE) - In vitro diagnostiliseks kasutamiseks
(SK) - Na diagnostiku in vitro
(CZ) - Pro diagnostiku in vitro
(NO) - Til in vitro-diagnostikk
(RO) - Pentru diagnostic in vitro
(BG) - За ин витро диагностика
(GB) - Manufacturer
(FR) - Fabricant
(ES) - Fabricante
(IT) - Produttore
(DE) - Hersteller
(PT) - Fabricante
(SE) - Tillverkad av
(DK) - Fremstillet af
(GR) -
(PL) - Producent
(LT) - Gamintojas
(HU) - Gyártó
(EE) - Tootja
(SK) - Výrobca
(CZ) - Výrobce
(NO) - Produsent
(RO) - Producător
(BG) - Производител
(GB) - Batch code
(FR) - Code du lot
(ES) - Código de lote
(IT) - Codice del lotto
(DE) - Chargen-Bezeichnung
(PT) - Código do lote
(SE) - Batchnr
(DK) - Batchkoden
(GR) -
(PL) - Numer serii
(LT) - Serijos numeris
(HU) - Gyártási szám
(EE) - Partii kood
(SK) - Číslo šarže
(CZ) - Číslo šarže
(NO) - Partikode
(RO) - Număr de lot
(BG) - Партиден номер
(GB) - Catalogue number
(FR) - Référence catalogue
(ES) - Número de catálogo
(IT) - Numero di catalogo
(DE) - Bestellnummer
(PT) - Número de catálogo
(SE) - Katalognummer
(DK) - Katalognummer
(GR) -
(PL) - Numer katalogu
(LT) - Katalogo numeris
(HU) - Cikkszám
(EE) - Katalooginumber
(SK) - Katalógové číslo
(CZ) - Katalogové číslo
(NO) - Katalognummer
(RO) - Număr de catalog
(BG) - Каталожен номер
(GB) - Authorised Representative
(FR) - Représentant agréé
(ES) - Representante autorizado
(IT) - Distributore autorizzato
(DE) - Bevollmächtigter
(PT) - Representante Autorizado
(SE) - Auktoriserad representant
(DK) - Autoriseret repræsentant
(GR) -
(PL) - Upoważniony Przedstawiciel
(LT) - Įgaliotasis atstovas
(HU) - Meghatalmazott Képviselő
(EE) - Volitatud esindaja
(SK) - Autorizovaný zástupca
(CZ) - Zplnomocněný zástupce
(NO) - Autorisert representant
(RO) - Reprezentant autorizat
(BG) - Упълномощен представител
(GB) - Expiry date YYYY/MM/DD
(FR) - Date de peremption AAAA/MM/JJ
(ES) - Estable hasta AAAA/MM/DD
(IT) - Da utilizzare prima del AAAA/MM/GG
(DE) - Verwendbar bis JJJJ/MM/TT
(PT) - Data de expiração AAAA/MM/DD
(SE) - Utgångsdatum ÅÅÅÅ/MM/DD
(DK) - Anvendes før ÅÅÅÅ/MM/DD
(GR) - YYYY/MM/DD
(PL) - Data ważności YYYY/MM/DD
(LT) - Galioja iki YYYY/MM/DD
(HU) - Szavatossági idő ÉÉÉÉ/HH/NN
(EE) - Aegumistähtaeg AAAA/KK/PP
(SK) - Použiteľné do RRRR/MM/DD
(CZ) - Datum exspirace RRRR/MM/DD
(NO) - Utløpsdato ÅÅÅÅ/MM/DD
(RO) - Data expirarii AAAA/LL/ZZ
(BG) - Срок на годност година/месец/ден

(GB) - Storage temperature limitation
(FR) - Limites de températures de stockage
(ES) - Temperatura límite
(IT) - Limiti di temperatura di conservazione
(DE) - Lagertemperatur
(PT) - Limites de temperatura de armazenamento
(SE) - Temperaturbegränsning
(DK) - Temperaturbegrænsning
(GR) -
(PL) - Temperatura przechowywania
(LT) - Saugojimo temperatūriniai apribojimai
(HU) - Tárolási hőmérsékleti határok
(EE) - Piirangud säilitustemperatuurile
(SK) - Skladovacia teplota od do
(CZ) - Teplotní rozmezí od do
(NO) - Oppbevaringstemperatur
(RO) - Limitele de temperatură la stocare
(BG) - Температурни граници на съхранение
(GB) - Consult Instruction for use
(FR) - Consulter le mode d'emploi
(ES) - Consulte las instrucciones de uso
(IT) - Consultare le istruzioni per uso
(DE) - Siehe Gebrauchsanweisung
(PT) - Consulte o folheto informativo
(SE) - Se bruksanvisningen
(DK) - Se instruktion før brug
(GR) -
(PL) - Sprawdź instrukcję
(LT) - Ieškokite informacijos vartojimo instrukcijoje
(HU) - Olvassa el a használati utasítást
(EE) - Kasutamisel vaata instruktsiooni
(SK) - Katalógové číslo
(CZ) - Viz návod k použití
(NO) - Se bruksanvisninger
(RO) - Consultati prospectul de utilizare
(BG) - Виж инструкцията за употреба

Bio-Rad
3, bd Raymond Poincaré
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