Versuch 9 - LDH

Proteinchemisches Praktikum SS 2012 Sabine Bauer, Carolin Absmeier
Jedoch lässt sich aus dieser Darstellung v max und somit Km kaum bestimmen. Daher trugen wir in einem
Lineweaver-Burk Diagramm die reziproke Geschwindigkeit gegen die reziproke Substratkonzentration auf.
So entstand ein linearer Graph. Zieht man ein Regressionsgerade durch die Punkte bis hin zur Ordinate und
Abszisse, so lassen sich Km und v max mit Hilfe der Schnittpunkte der Gerade mit den Achsen ermitteln. Die
Gerade schneidet die x-Achse bei -1/Km und die y-Achse bei 1/vmax.
1/v in[min/µmol]
1/vmax
-1/Km
[1/S]in[1/mM]
Abbildung 6: Lineweaver-Burk Diagramm aus Tabelle 3 (im Anhang vergrößert)
Die Formel für die Ausgleichsgerade lautet: y=0,9192*x+12,3561
Mit Hilfe dieser Formel wurden die Werte für -1/Km und 1/v max ermittelt:
Für die Berechnung von -1/Km wurde y gleich Null gesetzt
Für -1/Km ergibt sich also ein Wert von -12,3561 1/mM
Für die Berechnung von 1/v max benötigten wir den y-Achsenabschnitt
Dieser lässt sich aus der Geradengleichung ablesen:
Für 1/v max ergibt sich so ein Wert von 12,3561 min/µmol
Durch Umrechnen erhielt man die exakten Werte für die Michaeliskonstante und die Maximale Geschwindigkeit.
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