Praktikumsanleitung „Hefefermentation“ - Hochschule Mannheim
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Institut für Biologische Verfahrenstechnik<br />
www.che.hs-mannheim.de/ibv<br />
<strong>Praktikumsanleitung</strong> „Hefefermentation“<br />
Prof. Dr. P.M. Kunz, Dr.-Ing. I. Sommer, Dr. S. Schilling 27.03.2013<br />
4.3 Visualisierung der Spaltung von Stärke durch Amylasen<br />
Ziel:<br />
Auffrischen und Vertiefen der Kenntnisse und Techniken zu den Themen<br />
- Herstellen von Agar-Platten<br />
- Beimpfen von Agar-Platten<br />
- Steriltechnik<br />
- Färbung von Stärke mit Lugol‘scher Lösung<br />
Aufgaben: Anfärben von Stärke-Agar-Platten mit Lugol‘scher Lösung zur<br />
Visualisierung der Stärke-Spaltung durch Amylasen<br />
Für diese Untersuchungen wird über eine Färbungsreaktion die Spaltung von reiner<br />
Stärke bzw. Mehl durch kommerzielle Amylasen, Amylasen im Speichel, Honig bzw. in<br />
den Hefen auf einem Mehl- bzw. Stärkeagar visualisiert.<br />
Materialien:<br />
- Agarplatten mit Stärke- bzw. Mehlagar<br />
- Techn. Amylase<br />
- Speichelprobe<br />
- Honig<br />
- Hefelösung aus 4.1<br />
- Sterilbank<br />
- Sterile Pipettespitzen + Pipette<br />
- Alkohol-Lösung zum Desinfizieren<br />
- Lugol‘sche Lösung (1%ige gebrauchsfertige Lösung<br />
- Brutschrank<br />
- Metallröhrchen oder ähnliches zum Ausstanzen des Agars<br />
Bereits vorbereitet:<br />
Es wurden 4 verschiedene Agar-Typen entsprechend der unten stehenden<br />
Konzentrationsangaben hergestellt, je einer mit Mehl und einer mit Stärke. Von beiden<br />
wurde bei einem Ansatz das Mehl bzw. die Stärke mit autoklaviert und bei dem anderen<br />
Ansatz erst nach dem Autoklavieren zugesetzt, um die Wirkung von Hitze auf die Stärke<br />
und somit auf die Verwertbarkeit durch Hefen verdeutlichen zu können.<br />
- 7,5 g Agar + 4 g Mehl<br />
- 7,5 g Agar<br />
- 7,5 g Agar + 4 g Stärke<br />
- 7,5 g Agar<br />
Ad 500 mL mit VE-Wasser. Zu 2) und 4) je 4 g Mehl bzw. Stärke nach dem Autoklavieren.<br />
13-03-27_SchillingSommer-Pflichtpraktikum Hefe doc.docx Seite 14 von 20<br />
Institut für Biologische Verfahrenstechnik - <strong>Hochschule</strong> <strong>Mannheim</strong><br />
Paul-Wittsack-Str. 10, 68163 <strong>Mannheim</strong> Tel. (0621) 292-6304/6471 Fax: (0621) 292-6470<br />
E-mail: p.kunz@hs-mannheim.de, I.Sommer@hs-mannheim.de, S.Schilling@hs-mannheim.de
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