ÜBUNGSDURCHFÜHRUNG

LU – 164.254 Instrumentelles und Bioanalytischen Labor Stand 26.02.2013
Das Grundprinzip der (Flüssigkeits)Chromatographie und speziell der IC wird hier nicht bzw.
nur ansatzweise erklärt – es ist aber Prüfungsstoff und z.B. in den Unterlagen der Vorlesung
ACII enthalten. Informationen finden Sie auch in den ersten zwei Abschnitten der Unterlagen
von Dionex (Principles and Troubleshooting Techniques in IC) im File ‚Allgemeines zur IC‘.
Die Probenaufgabe erfolgt über ein sog. 6-Wege Ventil, die
verwendete Probenschleife erfasst ein Volumen von 10μl.
Abbildung 2: 6-Wege Ventil a.) Befüllen der Probenschleife, b.) Transport der Probe in die Säule
Durch die Probenschleife ist neben der Aufgabe eines genau definierten Volumens auch die
Injektion bei Atmosphärendruck möglich, ohne dass große Druckschwankungen im System
entstehen.
Die Auftrennung der Anionen erfolgt anschließend über eine Vorsäule (AG14A „Guard
Column“) und eine Trennsäule (AS14A „Separator Column“). Die Art der stationären Phase
ist in beiden Säulen gleich. Es handelt sich dabei um eine Polymerpackung (Polystyrol mit
Divenylbenzol querverlinkt, makroporös, 100 Å). Dieses „Substrat“ wird anschließend mit
ionischen Resten modifiziert, bei diesem System mit quaternären Ammoniumgruppen. Diese
Gruppen tragen eine positive elektrische Ladung, wodurch ein Anion gebunden werden
kann. So konkurrieren die Anionen des Eluenten mit den Anionen des Analyten um diese
Stellen in der Säule:
Harz-N + R 3 HCO 3 ֿ+ A ֿ → Harz-N + R 3 A ֿ + HCO 3 ֿ
Harz-N + R 3 HCO 3 ֿ + B ֿ → Harz-N + R 3 B ֿ + HCO 3 ֿ
Die Trennung der Anionen wird dabei durch ihre unterschiedliche Affinität zur stationären
Phase bestimmt. Der sog. Selektivitätskoeffizient K charakterisiert diesen
Gleichgewichtsprozess:
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