Gelelektrophorese - TCI @ Uni-Hannover.de
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Grundprinzipien und Durchführung<br />
Konzentrationen <strong>de</strong>r Ampholyte muß gleich im Gel sein,<br />
sonst treten Lücken im pH Spektrum auf.<br />
2% Ampholyte im Gel<br />
Nach anlegen <strong>de</strong>s elektrischen Fel<strong>de</strong>s richten sich die<br />
gela<strong>de</strong>nen Teilchen aus und bil<strong>de</strong>n <strong>de</strong>n Gradienten<br />
Die Trägerampholyte mit <strong>de</strong>m niedrigsten pI wan<strong>de</strong>rn bis<br />
an das anodische En<strong>de</strong> <strong>de</strong>s Gels, die Ampholyte mit<br />
<strong>de</strong>m höchsten pI wan<strong>de</strong>rn an das kathodische En<strong>de</strong>.<br />
Der Gradient kann nach langer Focussionszeit anfangen<br />
zu driften (Katho<strong>de</strong>ndrift). Ban<strong>de</strong>n wer<strong>de</strong>n unscharf,<br />
basische Proteine gehen verloren.<br />
Vorteil: Trägerampholyte wirken als Zwitterionen und<br />
halten Proteine in Lösung<br />
PD Dr. Cornelia Kasper<br />
<strong>TCI</strong><br />
Institut für<br />
Technische Chemie