Diagenode Atemwegsgrippe A/B Echtzeit-PCR-Kit

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Seite | 15 Beschreibung Mögliche Ursachen Korrekturmaßnahmen PCR wird durch exogene oder endogene Probentest wiederholen. Substanzen gehemmt Ziel- und interne Kontrolle verstärken sich nicht. Das Ziel verstärkt sich, aber nicht die interne Kontrolle. Spikes treten in allen Verstärkungskurven gleichzeitig auf. Sehr geringe Fluoreszenz in allen Proben, auch der internen Kontrolle Liquid-Handling Probleme Das Ziel hat die interne Kontrolle während der Reaktion um die Ressourcen gebracht. Spannungsschwankungen Primer oder Sondenverfall Problem mit dem Instrument Überprüfen Sie die URR und Mikrofluidik-Kartusche um festzustellen, wo die Liquid-Handling Probleme aufgetreten sind und wiederholen Sie die Probe. Falls das Problem weiter besteht kontaktieren Sie Ihren lokalen BD- Vertreter. Verifizieren Sie, dass die Probe eine Frühversorgung hat. Überprüfen Sie, dass das System mit dem USV verbunden ist (Unterbrechungsfreie Stromversorgung) Prüfen Sie das Verfallsdatum des Kits und ob das das Kit korrekt gelagert wurde. Näheres entnehmen Sie bitte dem BD MAX Benutzerhandbuch Nähere Informationen entnehmen Sie bitte dem Teil zur “Problemlösung” im BD MAX TM System Benutzerhandbuch. Bei weiteren Fragen zu Problemlösung und Problembehebung kontaktieren Sie bitte Ihren lokalen BD Vertreter oder den Diagenode Kundendienst. Diagenode sa / CHU - Tour GIGA - B34 – 3.Stock // Avenue de l’Hôpital, 1 // 4000 Liège (Sart Tilman) // Belgien // Telefon: (+32) 4 364 20 50 // E -Mail: info@diagenode.com
DIAGENODE Atemwegsgrippe A/B Echtzeit-PCR GEBRAUCHSANWEISUNG 12.1 Analytische Sensitivität unter Berücksichtigung der Reinigung Die analytische Nachweisgrenze unter Berücksichtigung der Reinigung (Sensitivitätslimit) wurde für das Diagenode Atemwegsgrippe A/B Echtzeit-PCR-Kit in einem ESwab Liquid Amies Medium und in einer Matrix für nasopharyngeale Absaugung (NPA) bestimmt. Die analytische Nachweisgrenze unter Berücksichtigung der Reinigung wird unter der Verwendung von quantifizierten, inaktiven Grippe A/B Erregern bestimmt. Um die analytische Sensitivität des Diagenode Atemwegsgrippe A/B Echtzeit-PCR-Kit für die Erkennung von Atemwegsgrippe A in ESwab und nasopharyngealer Matrix zu bestimmen, wurden die Atemwegsgrippe A Verdünnungsreihen dementsprechend von 1 500 bis 12 Kopien/ml in einem Liquid Amies Medium und in einem Pool von Atemwegsgrippe A-negativen nasopharyngealen Abstrichen gesetzt. Um die analytische Sensitivität des Diagenode Atemwegsgrippe A/B Echtzeit-PCR-Kit für die Erkennung von Atemwegsgrippe B in ESwab und nasopharyngealer Matrix zu bestimmen, wurden die Atemwegsgrippe B Verdünnungsreihen dementsprechend von 3 250 bis 25 Kopien/ml in einem Liquid Amies Medium und von 5.000 zu 39 Kopien/ml in einem Pool von Atemwegsgrippe B-negativen nasopharyngealen Abstrichen gesetzt. Die Proben wurden mit dem BD MAX-System in Verbindung mit dem Diagenode Atemwegsgrippe A/B Echtzeit-PCR-Kit analysiert. Das Testen wurde an 3 verschiedenen Tagen mit 12 Replikaten durchgeführt. Die LOD-Berechnungen wurden durch eine Probit-Analyse bestimmt. Analytische Sensitvität (LOD), definiert als die niedrigste Konzentration bei der ≥ 95% der Replikate positiv getestet werden, wird in der folgenden Tabelle angegeben. Test Matrix LOD Atemwegsgrippe A ESwab 170 k/ml NPA 614 k/ml Atemwegsgrippe B ESwab 1 719 k/ml NPA 1 271 k/ml 12.2. Präzision Die Präzisionsdaten des Diagenode Atemwegsgrippe A/B Echtzeit-PCR-Kit wurden mithilfe des BD MAX-Systems gesammelt und ermöglichen die Ermittlung der Variabilität innerhalb eines Durchlaufs (=Intra-Test Variabilität) (Variabilität von mehreren Ergebnissen von Proben der selben Konzentration innerhalb eines Experiments) und der Variabilität zwischen den Durchläufen (=Inter-Test Variabilität) (Variabilität von mehreren Ergebnissen des Tests über vier Durchläufe, die an 3 verschiedenen Tagen durchgeführt wurden) des Diagenode Atemwegsgrippe A/B Echtzeit-PCR-Kit im BD MAX System. Die gesammelten Daten wurden verwendet um die Standardabweichung und den Variationskoeffizient des jeweiligen Erregers sowie der internen PCR-Kontrolle zu bestimmen. Die Präzisionsdaten des Diagenode Atemwegsgrippe A/B Echtzeit-PCR-Kit im BD MAX System wurden mithilfe von ESwabs und einer nasopharyngealen Aspiraten-Matrix versetzt mit einer niedrigen Konzentration (Konzentration auf das LOD beschränkt in Anbetracht der Extraktion der betroffenen Erreger in der entsprechenden Matrix) von inaktiven Erregern von Atemwegsgrippe A und Atemwegsgrippe B gesammelt.
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