Unità tecnica UTAGRI

REAL-TIME PCRDeterminazione mediante real time qPCR della carica batterica totale edell’entità della contaminazione da E. coli e S. aureus sulla matricevegetale.• Il DNA è stato estratto da foglie di lattughino (Lactuca sativa L.) prelevate da tredifferenti packaging: uno tradizionale (F) e due innovativi (A e C);Metodi per l’estrazione del DNA utilizzati‣ Metodo SDS‣ FastDNA SPIN Kit (Qbiogene)‣ DNeasy mericon Food Kit (Qiagen)‣ Nucleo spin gdna clean-up (Macherey-Nagel)• Sono stati utilizzati primers universali, disegnati sul gene 16S rRNA, per ladeterminazione della carica batterica totale e primers specie-specifici, disegnatisul gene nuc e sul gene uidA, per la determinazione rispettivamente di S. aureused E. Coli (Lee et al. 2011).Coppie di primers utilizzate27F e 338R27F e 519R338F e 519R519F e 907RS. aureus F e RE. Coli F e RPatrizia De Rossi, Antonella Del Fiore, Francesca Lecce