Ciclo reproductivo, cultivo en criadero y en el medio natural de la ...

4. Desarrollo embrionario y larvario
4.2.3 PROCESADO PARA EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN
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Desde la aparición de la gástrula hasta la larva D se recogió una muestra cada
dos horas, para su posterior visionado en el microscopio electrónico de transmisión.
Al igual que para el microscopio electrónico de barrido, la fijación de las
muestras se realizó con glutaraldehído y la postfijación con tetraóxido de osmio.
Posteriormente se deshidrataron con la siguiente escala de acetonas:
acetona al 50% (1x 10 min)
acetato de uranilo 1% en acetona al 70% (1x 60 min)
acetona al 70% (2x 15 min)
acetona al 80% (2x 15 min)
acetona al 90% (2x 15 min)
acetona al 95% (2x 15 min)
acetona al 100% (2x 15 min)
Después de que las muestras fueron deshidratadas se impregnaron en resina
Spurr, en nevera a 4ºC y rotor:
1 Spurr: 3 acetona (1x 2 h)
1 Spurr: 1 acetona (1x 2 h)
3 Spurr: 1 acetona (1x 3‐4 h)
Posteriormente se incluyeron en resina total a temperatura ambiente:
resina total (1x 2‐5 h)
resina total (1x 12 h)
resina total (1x 2 h)
Finalmente se incluyeron en resina Spurr, a 60ºC durante 48 h.