Técnicas Cromatográficas - UNAM

Cromatografía en fase líquida a columna abierta
El volumen total de la columna, Vt es la suma del volumen del líquido afuera de la matriz de gel
(V0, volumen de la fase móvil que eludirá a una molécula completamente excluida ), el volumen del
líquido dentro de la matriz (Vi) y el volumen de la matriz de gel (Vm).
V V0
K
El volumen de elusión (Ve) se puede relacionar con V0 y Vi: e
d i
Kd es el coeficiente de distribución volumétrica: K d ( Ve
V
0)
/ Vi
Kd caracteriza el comportamiento de retención del soluto. Representa la fracción del volumen del gel
que es accesible a la molécula en cuestión. Si Kd se grafica contra el logaritmo del peso molecular se una
serie de solutos similares en forma y densidad molecular, se obtiene:
En un rango pequeño de Kd, el rango de fraccionamiento, la curva se aproxima a una línea recta:
K d
A Blog
M
La separación por cromatografía en gel está influenciada por las propiedades de los poros de la
red tridimensional, y la naturaleza del material que forma el poro. Se distinguen dos tipos de material
para el gel: xerogeles y aerogeles. Los xerogeles son geles simples; consisten en polímeros
entrecruzados que se engrosan en contacto con el solvente para formar un medio porosos relativamente
suave. Los aerogeles son sólidos porosos que son penetrados por el disolvente; algunos ejemplos es el
vidrio y silica porosos. El nombre de los geles más comúnmente utilizados: Sephadex, Strygel, Biogel
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