Técnicas Cromatográficas - UNAM

Técnicas acopladas
Otra de las aplicaciones de esta técnica, es la identificación de analitos desconocidos, ya sea como
productos secundarios de síntesis, análisis de herbicidas y pesticidas, impurezas de drogas comerciales,
ó la identificación inequívoca de sustancias de estructura similar, para las que un simple espectro masas
es insuficiente; cabe mencionar que el acoplamiento HPLC-MS es una herramienta muy selectiva que se
emplea hoy día permite la identificación de algunos péptidos y proteínas.
Equipo de HPLC acoplado a MS
6.2 Cromatografía HPLC acoplada a Ultravioleta (UV)
El Detector de Ultravioleta Visible es el más común acoplado a HPLC, se usa cuando los componentes
absorben radiación UV- visible, como los compuestos aromáticos, alquenos, moléculas con enlaces C-O,
C-N, C-S. Pueden ser de longitud de onda fija o variable (arreglo de diodos).
La detección UV-visible no es destructiva, es estable en el tiempo y se afecta poco por la
temperatura, por lo que se puede colectar los componentes por separado. Se considera a la detección
UV como selectiva ya que se elige la longitud de onda de mayor absorbancia de acuerdo con la sustancia
que se desea conocer, pero debe tenerse en cuenta que en el rango del UV lejano (190-220nm) la
mayoría de los compuestos está en el orden de los nanogramos (ng), lo que posibilita el análisis de
cantidades trazas.
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