Técnicas Cromatográficas - UNAM

Cromatografía en fase líquida a columna abierta
Aplicaciones. Desalinización: Largas moléculas de origen biológico son separadas de especies
ionizables o inorgánicas. Un ejemplo en la separación de la hemoglobina y NaCl en un gel Sephadex.
La cromatografía en gel se utiliza para separar proteínas, péptidos, ácidos nucléicos,
polisacáridos, enzimas, hormonas y los químicos en polímeros, para determinar distribuciones de pesos
moleculares en mezclas de polímeros.
2.9 Cromatografía de intercambio iónico.
El intercambio iónico es un proceso donde una solución de un electrolito se pone en contacto
con una resina de intercambio iónico y los iones activos de la resina son remplazados por las especies
iónicas de carga similar del analito. Ocurre un intercambio de iones de signo igual entre una solución y
un sólido esencialmente insoluble en contacto con la solución.
Las resinas cambiadoras de iones están constituidas por una red tridimensional de cadenas
polímeras entrelazadas con cadenas cortas que tienen grupos funcionales ionizables. Se tiene una fase
insoluble con sitios iónicos fijos de una sola carga, muestra que las especies de carga contraria se
mueven libremente a su alrededor se pueden sustituir por otros iones de la misma carga, a condición de
que se mantenga la electroneutralidad. Una resina típica se prepara por polimerización de estireno y
divinilbenceno.
Cambiadores catiónicos. Los grupos funcionales ácidos se pueden introducir fácilmente, tienen el
protón disociado, pero no libres para abandonar la resina, excepto cuando se sustituyen por otros iones
positivos.
Cambiadores aniónicos. Si se introducen grupos funcionales básicos, la resina intercambia aniones. Los
cambiadores aniónicos se preparan con aminas, obteniéndose in grupo amonio, y por tanto, un medio
básico.
Las propiedades más importantes que determinan el funcionamiento de una resina:
o Tamaño de las partículas – velocidad de intercambio y permeabilidad de la columna.
o Naturaleza de los grupos funcionales – tipo de los iones intercambiables.
o Fuerza de los grupos funcionales – coeficiente de distribución.
o Número de grupos funcionales – capacidad de la resina.
Capítulo 3 Página 31