6. Validación <strong>de</strong> “Spot” y “Tissue-print” RT-PCR a tiempo real. Comparación con técnicas serológicas y cálculo <strong>de</strong> parámetros <strong>de</strong> diagnóstico Tabla 6.14: Estima <strong>de</strong> la s<strong>en</strong>sibilidad y especificidad <strong>de</strong> ELISA-DASI y “Spot” RT-PCR a tiempo real mediante mo<strong>de</strong>los lat<strong>en</strong>tes Mo<strong>de</strong>lo 7 g Mo<strong>de</strong>lo 6 f Mo<strong>de</strong>lo 5 e Mo<strong>de</strong>lo 4 d Mo<strong>de</strong>lo 3 c Mo<strong>de</strong>lo 2 b Mo<strong>de</strong>lo 1 a DIC 121,45 96,63 121,41 120,75 94,96 96,93 Se1 0,894 (0,861-0,952) h 0,889 (0,861-0,917) i 0,908 (0,871-0,952) i 0,884 (0,856-0,915) i 0,891 (0,864-0,919) i 0,876 (0,832-0,912) i 0,847 (0,807-0,890) i Sp1 0,999 (0,997-1,000) 0,999 (0,996-0,999) 0,998 (0,995-1,000) 0,999 (0,996-1,000) 0,998 (0,993-0,999) 0,992 (0,971-1,000) 0,987 (0,967-0,998) Se2 1,000 (1,000-1,000) 0,982 (0,973-0,988) 0,999 (0,995-1,000) 0,975 (0,967-0,982) 0,981 (0,971-0,988) 0,971 (0,915-0,997) 0,939 (0,911-0,962) Sp2 0,968 (0,933-0,990) 0,969 (0,948-0,985) 0,958 (0,928-0,981) 0,968 (0,946-0,985) 0,965 (0,943-0,984) 0,951 (0,919-0,976) 0,950 (0,918-0,976) Pr1 0,413 (0,361-0,450) 0,405 (0,375-0,433) 0,394 (0,361-0,427) 0,406 (0,376-0,435) 0,403 (0,373-0,432) 0,402 (0,369-0,436) 0,413 (0,376-0,448) Pr2 0,624 (0,590-0,659) 0,622 (0,587-0,655) 0,618 (0,583-0,652) 0,625 (0,590-0,659) 0,621 (0,587-0,655) 0,633 (0,592-0,679) 0,650 (0,610-0,690) Pr3 0,026 (0,012-0,041) 0,027 (0,015-0,045) 0,026 (0,014-0,043) 0,027 (0,015-0,045) 0,026 (0,013-0,044) 0,020 (0,004-0,040) 0,017 (0,003-0,038) rhoD 0,111 (0,053-0,179) 0,024 (-0,005-0,066) 0,438 (0,072-0,717) 0,584 (0,464-0,714) rhoDc 0,001 (-0,007-0,023) 0,115 (0,004-0,312) 0,330 (0,015-0,640) 0,431 (0,054-0,691) 128 (DIC: Deviance information criterion; Se1: S<strong>en</strong>sibilidad <strong>de</strong> ELISA-DASI; Sp1: Especificidad <strong>de</strong> ELISA-DASI; Se2: S<strong>en</strong>sibilidad <strong>de</strong> “Spot” RT-PCR a tiempo real; Sp2: Especificidad <strong>de</strong> “Spot” RT- PCR a tiempo real; Pr1: Preval<strong>en</strong>cia población nº1; Pr2: Preval<strong>en</strong>cia población nº2; Pr3: Preval<strong>en</strong>cia población nº 3; rhoD: Correlación <strong>en</strong>tre resultados positivos (S<strong>en</strong>sibilidad); rhoDc: Correlación <strong>en</strong>tre resultados negativos (Especificidad)) a Mo<strong>de</strong>lo 1: basado <strong>en</strong> razones <strong>de</strong> máxima verosimilitud (Hui y Walter, 1980) b Mo<strong>de</strong>lo 2: mo<strong>de</strong>lo bayesiano asumi<strong>en</strong>do in<strong>de</strong>p<strong>en</strong><strong>de</strong>ncia condicional <strong>en</strong>tre pruebas, con las sigui<strong>en</strong>tes distribuciones previas: Se1 (β (108,41; 18,49)), Sp1 (β (34,17; 1,34)), Se2 (β (262,96; 20,72)), Sp2 (β (42,11; 1,84)), Pr1 (β (79,55; 146,88)), Pr2 (β (50,69; 35,53)), Pr3 (β (1,84; 42,11)) c Mo<strong>de</strong>lo 3: mo<strong>de</strong>lo bayesiano asumi<strong>en</strong>do in<strong>de</strong>p<strong>en</strong><strong>de</strong>ncia condicional <strong>en</strong>tre pruebas, no asumi<strong>en</strong>do ninguna distribución previa (β (1,1)) para Se1,Sp1,Se2 y Sp2. En el resto <strong>de</strong> parámetros mismas distribuciones previas que <strong>en</strong> Mo<strong>de</strong>lo 2 d Mo<strong>de</strong>lo 4: mo<strong>de</strong>lo bayesiano asumi<strong>en</strong>do <strong>de</strong>p<strong>en</strong><strong>de</strong>ncia condicional <strong>en</strong>tre pruebas, asumi<strong>en</strong>do mismas distribuciones previas que <strong>en</strong> Mo<strong>de</strong>lo 2. Pruebas 1 (ELISA-DASI), Pruebas 2 (“Spot” RT-PCR) e Mo<strong>de</strong>lo 5: mo<strong>de</strong>lo bayesiano asumi<strong>en</strong>do <strong>de</strong>p<strong>en</strong><strong>de</strong>ncia condicional <strong>en</strong>tre pruebas, asumi<strong>en</strong>do mismas distribuciones previas que <strong>en</strong> Mo<strong>de</strong>lo 2. Pruebas 1(“Spot” RT-PCR), Pruebas 2 (ELISA-DASI) f Mo<strong>de</strong>lo 6: mo<strong>de</strong>lo bayesiano asumi<strong>en</strong>do <strong>de</strong>p<strong>en</strong><strong>de</strong>ncia condicional <strong>en</strong>tre pruebas, no asumi<strong>en</strong>do ninguna distribución previa para Se2 y Sp2. En el resto <strong>de</strong> parámetros mismas distribuciones previas que <strong>en</strong> Mo<strong>de</strong>lo 2. Pruebas 1 (ELISA-DASI), Pruebas 2 (“Spot” RT-PCR) g Mo<strong>de</strong>lo 7: mo<strong>de</strong>lo bayesiano asumi<strong>en</strong>do <strong>de</strong>p<strong>en</strong><strong>de</strong>ncia condicional <strong>en</strong>tre pruebas, no asumi<strong>en</strong>do ninguna distribución previa para Se1 y Sp1. En el resto <strong>de</strong> parámetros mismas distribuciones previas que <strong>en</strong> Mo<strong>de</strong>lo 2. Pruebas 1 (“Spot” RT-PCR), Pruebas 2 (ELISA-DASI) h Valor estimado mediante razones <strong>de</strong> máxima verosimilitud e intervalos <strong>de</strong> confianza bootstrap i Mediana e intervalo <strong>de</strong> probabilidad (95%) estimado mediante métodos bayesianos
6. Validación <strong>de</strong> “Spot” y “Tissue-print” RT-PCR a tiempo real. Comparación con técnicas serológicas y cálculo <strong>de</strong> parámetros <strong>de</strong> diagnóstico No hubo gran<strong>de</strong>s difer<strong>en</strong>cias <strong>en</strong>tre los valores estimados <strong>de</strong> s<strong>en</strong>sibilidad y especificidad <strong>de</strong> ambas técnicas empleando los difer<strong>en</strong>tes mo<strong>de</strong>los. Únicam<strong>en</strong>te se observa que aplicando el Mo<strong>de</strong>lo 7, la estimación <strong>de</strong> la s<strong>en</strong>sibilidad <strong>en</strong> ambas pruebas <strong>de</strong> diagnóstico fue m<strong>en</strong>or que con los otros mo<strong>de</strong>los. El programa TAGS (Mo<strong>de</strong>lo 1) ti<strong>en</strong>e la cualidad <strong>de</strong> po<strong>de</strong>r indicar si las dos asunciones que asum<strong>en</strong> las razones <strong>de</strong> verosimilitud <strong>de</strong> Hui y Walter (1980) (in<strong>de</strong>p<strong>en</strong><strong>de</strong>ncia <strong>en</strong>tre los test y s<strong>en</strong>sibilidad y especificidad <strong>en</strong>tre las poblaciones son constantes) se cumpl<strong>en</strong>. Para ello se aplica un test χ 2 <strong>de</strong> la Deviance (Pouillot et al., 2002). En nuestro caso el test fue significativo, por tanto alguna <strong>de</strong> las dos asunciones pue<strong>de</strong> no estar justificada. Así, <strong>en</strong> la Tabla 6.15 se expon<strong>en</strong> los resultados al analizar las tres poblaciones in<strong>de</strong>p<strong>en</strong>di<strong>en</strong>tem<strong>en</strong>te. Se empleó un mo<strong>de</strong>lo asumi<strong>en</strong>do in<strong>de</strong>p<strong>en</strong><strong>de</strong>ncia condicional <strong>en</strong>tre las pruebas y asumi<strong>en</strong>do distribuciones previas (mismas aplicadas <strong>en</strong> el Mo<strong>de</strong>lo 2). Tabla 6.15: Estima <strong>de</strong> la s<strong>en</strong>sibilidad y especificidad <strong>de</strong> ELISA-DASI y “Spot” RT-PCR a tiempo real <strong>en</strong> cada una <strong>de</strong> las tres poblaciones mediante métodos bayesianos d Se1 e Sp1 Se2 Sp2 f g a P1 129 b P2 c P3 0,858 (0,807-0,907) h 0,928 (0,903-0,950) 0,856 (0,789-0,910) 0,999 (0,994-1.000) 0,997 (0,986-1.000) 0,997 (0,998-1.000) 0,971 (0,957-0,982) 0,971 (0,957-0,982) 0,930 (0,897-0,955) 0,942 (0,902-0,982) 0,987 (0,960-0,998) 0,984 (0,970-0,994) a Población 1: Parcela situada <strong>en</strong> Llíria muestreada <strong>en</strong> abril <strong>de</strong> 2007 b Población 2: Parcela situada <strong>en</strong> Llíria muestreada <strong>en</strong> mayo <strong>de</strong> 2008 c Población 3: Nueva parcela situada <strong>en</strong> Llíria muestreada <strong>en</strong> abril <strong>de</strong> 2008 d S<strong>en</strong>sibilidad <strong>de</strong> ELISA-DASI e Especificidad <strong>de</strong> ELISA-DASI f S<strong>en</strong>sibilidad <strong>de</strong> “Spot” RT-PCR a tiempo real g Especificidad <strong>de</strong> “Spot” RT-PCR a tiempo real h Mediana e intervalo <strong>de</strong> probabilidad (95%) estimado mediante métodos bayesianos
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CAPÍTULO 2. OBJETIVOS GENERALES
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Bibliografía in citrus aphids. In:
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Bibliografía Mensah, R.K., Harris
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Bibliografía Narváez, G., Skande
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Bibliografía Powell, C.A., Pelosi
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Bibliografía Edited by Hilf M E, D
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Bibliografía Simel, D.L., Samsa,
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Bibliografía Torrance-Rynard, V.L
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223 ANEJOS A.1 Cálculo de la proba
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227 Anejos Tabla A.2 bis: Volumen d