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Manual Ecuador.FH10 - Oficina Regional de la FAO para América ...

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Es muy importe <strong>la</strong> <strong>de</strong>tección precoz y <strong>la</strong> rápida visita al predio porque con buenas<br />

muestras se pue<strong>de</strong> ais<strong>la</strong>r el virus, y conocer el posible origen <strong>de</strong> <strong>la</strong> enfermedad.<br />

La tipificación genética permite <strong>de</strong>terminar <strong>la</strong> secuencia nucleotídica <strong>de</strong> porciones<br />

<strong>de</strong>l genoma vírico <strong>de</strong> los serotipos ais<strong>la</strong>dos, con ello realizar estudios <strong>de</strong> epi<strong>de</strong>miología<br />

molecu<strong>la</strong>r, <strong>para</strong> <strong>de</strong>terminar el origen más probable <strong>de</strong> un virus mediante <strong>la</strong> e<strong>la</strong>boración<br />

<strong>de</strong>l correspondiente árbol filogenético.<br />

El frasco don<strong>de</strong> se coloca <strong>la</strong> muestra <strong>de</strong>be ser <strong>de</strong> boca ancha con un medio preservante<br />

como tampón <strong>de</strong> glicerina fosfatada, <strong>la</strong> que a<strong>de</strong>más tiene el agregado <strong>de</strong> un indicador<br />

<strong>de</strong> pH. Se utiliza rojo <strong>de</strong> fenol que da un color rosado en condiciones normales, cuando<br />

el medio se acidifica gira al color amarillo. Es muy importante tener en cuenta que si<br />

el color <strong>de</strong>l medio esta amarillo no se podrá ais<strong>la</strong>r virus <strong>de</strong> <strong>la</strong> muestra, pues a pH 6 o<br />

menor el virus se inactiva.<br />

Es conveniente utilizar solo un frasco por animal y que el medio cubra totalmente<br />

<strong>la</strong> muestra <strong>de</strong> epitelio.<br />

La cantidad <strong>de</strong> muestras a obtener <strong>de</strong>pen<strong>de</strong>rá <strong>de</strong> <strong>la</strong> calidad <strong>de</strong> <strong>la</strong>s mismas, si <strong>la</strong>s<br />

muestras son <strong>de</strong> pobre calidad hay que muestrear todos los animales posibles, al<br />

seleccionar animales <strong>para</strong> su inspección y el retiro <strong>de</strong> muestras es conveniente que<br />

sean animales don<strong>de</strong> <strong>la</strong> enfermedad recién comienza, pues tendrá vesícu<strong>la</strong>s sin romper<br />

que darán muestras <strong>de</strong> alta calidad, incluso es recomendable extraer muestras <strong>de</strong> linfa<br />

con una pequeña jeringa con aguja estéril.<br />

En cambio <strong>para</strong> <strong>de</strong>terminar <strong>la</strong> antigüedad <strong>de</strong> <strong>la</strong> infección es conveniente seleccionar<br />

aquellos animales que en primer término se vieron enfermos.<br />

Se <strong>de</strong>ben i<strong>de</strong>ntificar los animales muestreados.<br />

Si los animales presentan lesiones ya cicatrizadas, no habrá posibilida<strong>de</strong>s <strong>de</strong> extraer<br />

muestras <strong>de</strong> epitelio <strong>de</strong>s<strong>de</strong> don<strong>de</strong> pueda ais<strong>la</strong>rse el virus. Sin embargo se pue<strong>de</strong><br />

extraer material esofágico-faríngeo utilizando un colector (copa PROBANG) raspando<br />

<strong>la</strong> mucosa <strong>de</strong> <strong>la</strong> zona faríngea y anterior al esófago, <strong>para</strong> ello es conveniente que los<br />

animales tengan un ayuno <strong>para</strong> evitar que <strong>la</strong>s muestras se contaminen con<br />

regurgitaciones. Para el material esofágico-faríngeo se utiliza el medio EARLE 2x o<br />

solución Hank´s.<br />

Para <strong>la</strong> conservación y envío <strong>de</strong> <strong>la</strong>s muestras, se <strong>de</strong>ben usar frascos <strong>de</strong> plástico o <strong>de</strong><br />

vidrio <strong>de</strong> buena calidad con tapas <strong>de</strong> rosca y una cinta sel<strong>la</strong>dora sobrepuesta en <strong>la</strong><br />

tapa.<br />

Los contenedores primarios ya sel<strong>la</strong>dos, se <strong>de</strong>ben envolver en material que permita<br />

su amortiguación <strong>de</strong> golpes en el tras<strong>la</strong>do. Todos estos contenedores se <strong>de</strong>ben poner<br />

en un envase secundario, el que <strong>de</strong>be ser hermético y resistente al agua (plástico o<br />

metal).<br />

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