Efectos de alicina y enalapril en ratas con hipertensión ...

AJH (Ed. Esp.) 2001; 3: 410-414
OCTUBRE 1997-VOL. 10, N.º 10, PARTE 2
AJH-
Original
Efectos de alicina y enalapril en ratas con
hipertensión, hiperlipidemia e
hiperinsulinemia inducidas por fructosa
Amitai Elkayam, David Mirelman, Edna Peleg, Meir Wilchek, Talia Miran, Aharon Rabinkov,
Sigal Sadetzki, Talma Rosenthal
Se estudiaron los efectos de una preparación sintética de
alicina, un constituyente activo del ajo, sobre la presión
arterial (PA), concentraciones de triglicéridos y de insulina
en ratas Sprague-Dawley, en las cuales la alimentación con
fructosa en cantidades elevadas produjo hiperinsulinemia,
hipertensión e hipertrigliceridemia. Los resultados se compararon
con los del antihipertensivo enalapril. Tres grupos
de ratas Sprague-Dawley se alimentaron con una dieta enriquecida
en fructosa durante 5 semanas. Durante las 2 últimas
semanas, 10 animales recibieron sólo la dieta con fructosa,
10 recibieron alicina y 10 recibieron enalapril. La
presión arterial, la insulina y los triglicéridos se midieron al
comienzo del experimento y después de tres y cinco semanas
recibiendo la dieta de fructosa, una dieta con fructosa y
alicina o una dieta con fructosa y enalapril. La alicina redujo
la PA desde el nivel máximo (después de tres semanas de
dieta con fructosa) desde 153,4 ± 8 mm Hg a 139,7 ± 12
mm Hg después de dos semanas de tratamiento con alicina;
la insulina desde 11,7 ± 3,7 ng/ml en la dieta con fructosa a
6,92 ± 3,3 ng/ml con alicina; y los triglicéridos desde 132,8
± 18 mg/dl en la dieta con fructosa a 59,6 ± 27 mg/dl con
alicina. El efecto similar de alicina y enalapril sobre la PA,
la insulina y los triglicéridos refuerza la posibilidad de combinar
los sistemas no farmacológicos con el tratamiento farmacológico.
Am J Hypertens 2001; 14: 377-81.
Palabras clave: Alicina, ajo, presión arterial, insulina,
triglicéridos, ratas Sprague-Dawley.
E
l ajo, conocido botánicamente como Allium sativum
L. (Familia Liliceae), se originó en el sur de
Asia y se consume actualmente en todas las partes
del mundo como especia, como alimento y como remedio
casero 1-3 . Se han publicado algunos estudios que documentan
la acción cardioprotectora del ajo en la reducción de
lípidos 4-9 , reducción de la PA 2,4 , como antioxidante 10 , como
potenciador de la actividad fibrinolítica 6 , inhibidor de la
agregación plaquetaria 6,11 y reductor de la glucosa sanguínea
4 . Aunque estos datos destacan el papel potencial del ajo
para evitar y controlar los trastornos cardiovasculares, los
resultados de los estudios son poco constantes y a veces
contradictorios debido a las diferencias y a las deficiencias
Instituto Chorley para la Investigación de la Hipertensión (AE,
EP, TR) y Departamento de Epidemiología Clínica (SS), Centro
Médico Chaim Sheba, Tel Hashomer, Israel; Facultad de Medicina
Sackler (SS, TR), Universidad de Tel Aviv, Tel Aviv, Israel; y Departamento
de Investigación de las Membranas y de Biofísica (DM,
MW, TM, AR), Instituto de Ciencias Weizmann, Rehovot, Israel.
© 2001 by the American Journal of Hypertension, Ltd.
Published by Elsevier Science, Inc.
de las metodologías 12 . Estas deficiencias oscilan desde la
variedad de formas en que se investigó el ajo, hasta las
pequeñas muestras de pacientes, uso de pacientes con perfiles
lipídicos normales 13,14 , estudios no aleatorios, estudios
no ciegos 15 , falta de detalles en la selección o metodología
de la bioquímica sanguínea, e inadecuada descripción de
los métodos y de los pacientes. Una prueba de la poca fiabilidad
de los estudios publicados es la edición de pocos
trabajos con resultados negativos 16 .
Nuestro desarrollo de un procedimiento semisintético para
la preparación de grandes cantidades de alicina pura, un constituyente
activo del ajo 17-19 , ha permitido que se realicen varios
estudios 20-23 . Su efecto sobre el perfil lipídico ya se ha demostrado
21 . La biodisponibilidad de la alicina se convirtió en un
instrumento para realizar un estudio controlado sobre sus
efectos sobre la PA, triglicéridos y concentraciones de insulina
en el modelo de Raven, en el cual la alimentación con cantidades
elevadas de fructosa producía hiperinsulinemia, hipertensión
e hipertrigliceridemia en ratas Sprague-Dawley.
0895-7061/97/$17.00
PII S0895-7061(97)00327-0

ALICINA Y ENALAPRIL CON HIPERTENSIÓN, HIPERLIPIDEMIA E HIPERINSULINEMIA 411
Materiales y métodos
La alicina se produjo como sustancia pura por la reacción
de la alinasa de ajo inmovilizada con una preparación de
aliína sintética [(+)S-2-propenil-L-cisteína-S-óxido], idéntica
en propiedades químicas a la aliína natural, según
Mirelman et al. 18 . La pureza y concentración de la alicina
obtenida se determinó por cromatografía líquida de alta
resolución (CLAR), como se había publicado anteriormente
17,19 . En los experimentos descritos en este estudio, la concentración
de alicina usada fue de 1,8-2,0 mg/ml en 50
mmol/l de tampón fosfato a pH 6,5. La solución pura de
alicina, mantenida a 4ºC, fue relativamente estable durante
las semanas del experimento y la concentración se determinó
sistemáticamente.
Ratas macho de la raza Sprague-Dawley (Anilab, Tal
hasahachar, Israel), que pesaban inicialmente 240-250 g,
fueron alimentadas con pienso estándar para ratas (Koffolk,
Tel Aviv) y mantenidas en un ciclo de 14 horas de
luz/10 horas de oscuridad. Tres grupos compuestos de 30
ratas se alimentaron con una dieta enriquecida en fructosa
(Harlan, Teklad, Madison, WI) durante cinco semanas, de
la forma siguiente: grupo 1, 10 animales se alimentaron
sólo con fructosa (grupo control); grupo 2, 10 animales
recibieron 8 mg/kg/día de alicina por intubación oral
durante las dos últimas semanas de la dieta con fructosa;
grupo 3, 10 animales recibieron 20 mg/kg/día de enalapril
en el agua de beber durante las dos últimas semanas de la
dieta con fructosa.
La dieta con fructosa se compuso de un 21% de proteínas,
5% de grasa, 60% de carbohidratos (fructosa), 0,49%
de sodio y 0,49% de potasio. Esta composición fue similar
a la de la dieta del pienso, excepto en que la fructosa sustituyó
al almidón como componente carbohidrato.
La presión arterial sistólica se midió una vez a la semana
y los triglicéridos y la insulina tres veces: inicialmente
antes del alimento con fructosa (x 0
), después de tres semanas
de alimentación con fructosa (x 1
) y después de dos
semanas más (x 2
).
La presión arterial sistólica se midió con las ratas conscientes
por el método indirecto de la anilla en la cola, usando
un esfigmomanómetro y un transductor de pulso neumático
(Narco Biosystems, Houston, Tejas). Se registró
como PAS la media de cinco lecturas consecutivas.
Se recogieron muestras de sangre por punción del seno
retrorbital, bajo anestesia, después de 5 horas de ayuno al
comienzo del experimento y a las 3 y 5 semanas. Las
muestras se centrifugaron, se separaron en alícuotas, se
congelaron y se determinó en ellas la concentración de
insulina (Rat insulin 125 I Ria kit, Incstar, Stillwater, MN)
y de triglicéridos (Equipo GPO-PAP de triglicéridos, Boehringer
Mannheim, Alemania).
Los datos se analizaron usando a cada rata como su propio
control. Se calcularon dos diferencias: 1) ∆1 que es la
diferencia entre tres semanas de alimentación con fructosa
(x 1
) y los valores iniciales (x 0
); y 2) ∆2 que es la diferencia
entre los niveles después de cinco semanas (x 2
) y x 1
.
Las medias de los grupos iniciales (x 0
) se compararon por
análisis de varianza (ANOVA). Se investigaron los cumplimientos
del modelo (distribución normal de residuos,
igualdad de varianza) y, cuando se violaron, se aplicó el
análisis de varianza por rangos de Kruskal-Wallis de una
vía. Se computadorizaron la estadística descriptiva, las
medias y los errores estándar de ∆1 y ∆2 (ajustados para x 0
y x 1
, respectivamente). Debido a las comparaciones múltiples,
sólo los valores de p

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32,7 mg/dl y 58,6 ± 31,3 mg/dl, respectivamente). No hubo
diferencias significativas en los valores iniciales de la PA
en los tres grupos de tratamiento (p>0,008).
En la Tabla 1 se muestra que los modelos de insulina de
la PA de los tres grupos –alicina, enalapril y fructosa solo
(controles)– fueron similares después de tres semanas recibiendo
la dieta de fructosa (∆1), y que los triglicéridos
variaron sólo en el grupo que recibió enalapril.
Después de otras dos semanas más de tratamiento, enalapril
y alicina redujeron la PA significativamente en comparación
con la del grupo que recibió la dieta de fructosa
sólo (p

ALICINA Y ENALAPRIL CON HIPERTENSIÓN, HIPERLIPIDEMIA E HIPERINSULINEMIA 413
de la insulina en suero y la tolerancia a la glucosa en conejos
con diabetes leve por aloxano, similar a la acción hipoglucémica
de tolbutamida 38 .
La investigación de los efectos reductores del colesterol
y los triglicéridos debidas al ajo ha producido resultados
contradictorios. Adler y Holub 40 encontraron que la combinación
de aceite de pescado y ajo reducía los triglicéridos
más que el aceite de pescado solo, pero Zimmerman y
Zimmerman 41 manifestaron que el 10-13% de reducción
del colesterol total y de los triglicéridos era similar a la
encontrada con los fibratos prescritos extensamente. En un
metaanálisis de ocho estudios clínicos sobre el ajo, Silagy
y Neil 12 encontraron un porcentaje similar de reducción de
los triglicéridos séricos, mientras que Mader 42 encontró un
porcentaje incluso mayor, del 17%, en un estudio multicéntrico
de gran tamaño.
Una fuente de datos contradictoria puede ser que se usaron
diferentes preparaciones de ajo, en las que se incluyeron
polvo seco, zumo y aceite, diferentes bases y dosis y
cantidades imprecisas.
La mayoría de los estudios usaron preparaciones de polvo
seco de ajo en dosis de 600 a 900 mg/día, que es el
equivalente a 1,8 a 2,7 g/día de ajo fresco 14,29-31,42-47 . Aunque
la media de 5 g de ajo aportará 10 mg de alicina (1 g de
ajo produce 2 mg de alicina), no se puede extraer de estas
cifras la cantidad de ajo que una persona debería consumir
para alcanzar una dosis terapéutica de alicina; esto permanece
sin determinarse.
Especial interés tiene la observación de Bordia 48 y Lau
et al. 49 , quienes observaron que cuando se ingiere por primera
vez un complemento alimenticio de ajo se produce
una elevación inicial del colesterol-triglicéridos y de
LDL/VLDL. Lau et al. 49 sugirieron que la elevación podría
deberse a la movilización de los lípidos tisulares hacia la
circulación.
En experimentos a corto plazo en los que se usaron cultivos
primarios de hepatocitos, que han demostrado su utilidad
como herramientas de screening de las propiedades
anticolesterogénicas del ajo, también se confirmó el efecto
reductor del ajo del colesterol y de los lípidos 50 . De acuerdo
con estos investigadores, el efecto reductor del triacilglicerol
parece deberse a la inhibición de la síntesis de ácidos
grasos. El ajo también redujo los triglicéridos en
plasma de ratas alimentadas con manteca de cerdo 51 . En un
estudio del Instituto Weizmann, que usó el mismo producto
de alicina que usamos nosotros en nuestro experimento,
se demostró el efecto beneficioso sobre el perfil sérico de
conejos blancos de Nueva Zelanda hiperlipidémicos alimentados
con una dieta rica en colesterol y alicina 21 .
Las variaciones de las preparaciones del ajo, las concentraciones,
las dosis y la reducción del tratamiento en
estos estudios con personas y animales se eliminaron en
nuestra investigación, puesto que la alicina pura dio una
dosis concentrada uniforme y la duración del tratamiento
fue igual en todos los animales. El efecto de la alicina
sobre la presión arterial, la insulina y los triglicéridos, que
actuó de la misma forma que el inhibidor de la enzima conversora
de angiotensina, refuerza la tendencia que existe
actualmente en combinar medios no farmacológicos con el
tratamiento médico.
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