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Alimentos probióticos. Presente y futuro

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ALIMENTOS PROBIÓTICOS.<br />

PRESENTE Y FUTURO<br />

Dr. Jorge Reinheimer<br />

Instituto de Lactología Industrial (INLAIN)<br />

Facultad de Ingeniería Química (FIQ)<br />

UNL - CONICET<br />

SANTA FE – ARGENTINA<br />

jorreinh@fiq.unl.edu.ar<br />

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Milestones in the History or Fermented Foods.


PROBIÓTICOS<br />

Microorganismos vivos que, administrados en<br />

adecuadas dosis (como parte de un alimento), otorgan<br />

un beneficio a la salud del consumidor (FAO, 2002)<br />

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BACTERIAS USADAS COMO<br />

PROBIÓTICOS PARA HUMANOS<br />

o<br />

Bifidobacterias (B. longum, B. lactis, B. infantis,<br />

B. bifidum).<br />

o<br />

Lactobacilos ( L. acidophilus, L. casei, L. paracasei,<br />

L. rhamnosus, L. johnsonii, L. reuteri).<br />

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Cepa<br />

PRINCIPALES CEPAS PROBIÓTICAS<br />

CON ESTUDIOS CLÍNICOS PUBLICADOS<br />

Efecto clínico sobre:<br />

-Lactobacillus rhamnosus GG (Valio) 1, 2, 4, 5, 6, 7, 8, (12), 14, 15<br />

-Lactobacillus paracasei Shirota (Yakult) 2, 5, 6, 9, (10), 11, (12), 15<br />

-Bifidobacterium lactis Bb12 (Chr Hansen) 1, 2, 3, 4, 5, 6, 11, 15<br />

-Saccharomyces cereviseae boulardii (Biocodex) 2, 3, 4, 5, 7, 11<br />

-Lactobacillus acidophilus La5 (Chr Hansen) 2, 4, 5, 6, 11<br />

-Lactobacillus johnsonii La1 (Nestle) 6, 11, 14, 15<br />

-Enterococcus faecium SF68 (Cernelle) 2, 5, 10, (12), 13<br />

-Lactobacillus reuterii (Biogaia) 1, 5, (10), (12)<br />

-Bifidobacterium longum BB536 (Morinaga) 2, 5?, 11, (12), (15)<br />

-Bifidobacterium breve (Yakult) (1), 5<br />

-Lactobacillus acidophilus NFCM (Rhodia US) 1?, 5, 6, (12)<br />

-Lactobacillus plantarum 299v (ProViva, Sweden) 5, 13<br />

-Lactobacillus rhamnosus GR-1 (Urex Biotech.) 16<br />

-Lactobacillus fermentum RC-14 (Urex Biotech) 16<br />

-Lactobacillus acidophilus LB (Lacteol) 1, 2<br />

1= Diarrea por rotavirus; 2= Diarrea asociada a antibióticos; 3= Diarrea por Clostridium difficile; 4= Diarrea del<br />

viajero; 5= Otras diarreas bacterianas agudas; 6= intolerancia a la lactosa; 7= Vaginitis bacteriana; 8= Eczema<br />

atópico y alergia alimentaria; 9= Cáncer de vejiga; 10= Colesterol; 11= Constipación crónica; 12= Cáncer<br />

intestinal; 13= Síndrome de intestino irritable; 14= Helicobacter pylori; 15= Modulación de la respuesta inmune;<br />

16= Infecciones uro-genitales; ?= Evidencia dudosa; ()= Sólo datos en animales y/o biomarkers.<br />

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REQUISITOS A CUMPLIR POR UN<br />

MICROORGANISMO PROBIÓTICO<br />

1<br />

Ser de origen humano (especificidad de especie).<br />

2<br />

Status GRAS (generally recognized as safe).<br />

3<br />

4<br />

5<br />

Resistencia tecnológica ( al proceso industrial y al<br />

producto).<br />

Resistencia a las barreras biológicas ( lisozima,<br />

acidez HCl, bilis).<br />

Estudios clínicos que avalen su valor probiótico.<br />

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EFECTOS ADJUDICADOS AL CONSUMO DE<br />

PROBIÓTICOS Y LECHES FERMENTADAS<br />

Disminución de síntomas de intolerancia a la lactosa<br />

Modulación del tránsito intestinal<br />

Modulación de actividades metabólicas de la microflora<br />

Modulación de RI en intestino y sitios distantes<br />

Disminución de hipertensión arterial<br />

Disminución de niveles de colesterol circulante<br />

Prevención de eczemas atópicos<br />

Prevención de diferentes tipos de diarreas<br />

Prevención de enfermedad inflamatoria intestinal (IBD)<br />

Prevención de infecciones entéricas<br />

Prevención de infecciones nasofaríngeas<br />

Prevención de enfermedades autoinmunes<br />

Prevención de sepsis en pacientes graves<br />

Prevención de enterocolitis necrotizantes<br />

Prevención de infección por H. pilory<br />

Prevención de cáncer (colon, mamas)<br />

Prevención de caries<br />

Prevención de infecciones dérmicas<br />

Prevención de diabetes


ALIMENTOS PROBIÓTICOS<br />

o<br />

En teoría, cualquier alimento podría ser transformado<br />

en un alimento probiótico si tecnológicamente se<br />

resuelve la incorporación de las bacterias probióticas<br />

y si éstas mantienen la viabilidad y func. en el mismo.<br />

o<br />

Se han tratado de incorporar las bacterias probióticas a<br />

alimentos de consumo masivo (ej.: productos lácteos).<br />

o<br />

El alimento es sólo un vehículo de las bacterias<br />

probióticas. La presencia de éstas normalmente<br />

no modifica las características del producto<br />

(organolépticas, químicas, nutritivas, etc.).<br />

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REQUISITOS A CUMPLIR PARA<br />

GARANTIZAR EL EFECTO PROBIÓTICO<br />

1<br />

Mantenerse viable en el producto, en altas<br />

concentraciones (>10 6 UFC / ml ó g) hasta<br />

la fecha de vencimiento.<br />

2<br />

La ingesta debe ser continua.<br />

3<br />

Capacidad de adhesión al epitelio intestinal<br />

(aumenta la permanencia en intestino).<br />

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DOSIS<br />

Criterio japonés: 10 9 células<br />

(equivalente a 100g de un yogur que contiene 10 7 UFC/g)<br />

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PROBIÓTICOS<br />

Mercado en<br />

expansión<br />

Interés de los consumidores<br />

en el rol de la dieta sobre el<br />

mantenimiento de la salud<br />

En los países desarrollados, los alimentos <strong>probióticos</strong><br />

constituyen el 60-70% del mercado total de alimentos<br />

funcionales.<br />

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EMPLEO ACTUAL DE<br />

PROBIÓTICOS EN ALIMENTOS<br />

Espacios refrigerados<br />

del supermercado<br />

Productos<br />

lacteos<br />

Leches<br />

Fermentadas<br />

Quesos<br />

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LECHES FERMENTADAS PROBIÓTICAS<br />

o<br />

La más popular alternativa comercial hasta el momento<br />

o<br />

Principal ventaja: el proceso tradicional de elaboración<br />

se adapta muy bien al agregado de bacterias probióticas:<br />

antes de la fermentación (yogur firme) o después (yogur<br />

batido y líquido).<br />

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LECHES FERMENTADAS.....<br />

¿adecuado vehículo para <strong>probióticos</strong>?<br />

o<br />

Elevado contenido de ácido láctico.<br />

o<br />

Presencia de numerosos aditivos alimentarios.<br />

o<br />

Oxígeno disuelto.<br />

o<br />

Interacciones cultivos iniciadores–cultivos <strong>probióticos</strong>.<br />

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QUESOS PROBIÓTICOS<br />

A)<br />

o<br />

o<br />

QUESOS FRESCOS<br />

- no hay maduración<br />

- se almacenan en refrigeración (4-6º C)<br />

- shelf life limitado<br />

- pueden ser ajustados a bajo tenor de sal y grasa<br />

EJEMPLOS DEL MERCADO<br />

carriers ideales<br />

Queso Cottage probiótico: el primero en su tipo salió al mercado<br />

en Alemania (1998).<br />

- contiene L. acidophilus LA5 y B. animalis BB12.<br />

- no fue testeado el efecto probiótico del producto todavía.<br />

BIOQUESO Ilolay Vita: se comercializa en Argentina desde 1999.<br />

- Queso fresco (pH=5,2; grasa 12%; sal 1%; humedad 58%).<br />

- contiene L. casei, L. acidophilus y B. bifidum.<br />

- efectos <strong>probióticos</strong> del producto demostrados<br />

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Supervivencia de cultivos <strong>probióticos</strong> y acidificantes en queso<br />

fresco diet durante el almacenamiento refrigerado (5º).


VIABILIDAD + FUNCIONALIDAD<br />

Gut mucosal immunomodulation by probiotic fresh cheese.<br />

M. Medici, C.G. Vinderola, G. Perdigón. International Dairy Journal 14 (2004) 611–618<br />

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QUESOS PROBIÓTICOS<br />

B)<br />

QUESOS MADURADOS<br />

- maduración más o menos prolongada<br />

- etapa de cocción en el proceso<br />

- contenido de sal<br />

menos adecuados<br />

como carriers<br />

(semiduros y duros)<br />

o<br />

EJEMPLO DEL MERCADO<br />

Queso comercializado en Finlandia desde 2000.<br />

Contiene L. rhamnosus GG.<br />

- efecto probiótico del producto no testeado<br />

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Bifidobacteria counts 1 in Cheddar cheese during ripening.


QUESOS COMO CARRIERS<br />

DE BACTERIAS PROBIÓTICAS<br />

o<br />

Factores protectivos: matriz proteína-grasa, baja acidez y<br />

capacidad buffer. Importantes para:<br />

- mantener la viabilidad celular en el producto.<br />

- proteger a las bacterias en el pasaje gastrointestinal (H Cl, bilis, etc).<br />

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QUESOS PROBIÓTICOS<br />

Mercado exitoso?<br />

Los informes revelan, a nivel mundial, que las ventas de<br />

quesos <strong>probióticos</strong> nunca despegaron, al contrario que<br />

para los yogures <strong>probióticos</strong>.<br />

o<br />

o<br />

o<br />

o<br />

Motivos?<br />

muchos consumidores no perciben al queso como un alimento<br />

saludable (sal, grasa)<br />

resistencia a modificar quesos típicos<br />

(agregado de <strong>probióticos</strong><br />

adulteración)<br />

Los productores de quesos deben clarificar el mensaje<br />

de marketing para captar consumidores<br />

(mejorar la salud digestiva<br />

y testear el efecto funcional)<br />

demasiado general<br />

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PRODUCTOS LÁCTEOS CONGELADOS<br />

COMO CARRIERS PROBIÓTICOS<br />

Factores de injuria celular<br />

A)<br />

Formación de cristales de hielo<br />

- alteraciones en la permeabilidad de la membrana celular<br />

- deshidratación intracelular<br />

Pérdida de viabilidad celular durante el congelamiento<br />

Sustancias naturales crioprotectoras: caseína, sacarosa, grasa<br />

B)<br />

Oxígeno<br />

la incorporación de aire es<br />

necesaria para dar volumen<br />

C)<br />

pH (cremas heladas = 7; cremas heladas fermentadas < 5,5)<br />

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PRODUCTOS LÁCTEOS<br />

CONGELADOS PROBIÓTICOS<br />

35 nuevos postres congelados <strong>probióticos</strong> se lanzaron<br />

al mercado entre 2006 y 2008, en un grupo de países<br />

integrados por España, Irlanda, Bélgica, India y China.<br />

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PRODUCTOS LÁCTEOS<br />

CONGELADOS PROBIÓTICOS<br />

o<br />

CREMAS HELADAS<br />

- L. acidophilus y B. bifidum Herkmat y Mc Mahon, 1992.<br />

- L. acidophilus, B. lactis y L. paracasei Haynes y Playne, 2002.<br />

- L. johnsonii La1 Alamprese y col., 2002.<br />

- L. acidophilus y B. lactis Kailasaphy y Sultana, 2003.<br />

o<br />

CREMAS HELADAS FERMENTADAS<br />

- L. acidophilus (Danisco) + yogur congelado High Culture Frozen Yoghurt (2009) –<br />

testeado clínicamente (USA)<br />

- L. acidophilus + Bifidobacterium sp. (+ St + Lb) yogur congelado Ravula y Shah, 1998.<br />

- L. acidophilus + B. longum (+ St + Lb) yogur congelado Davidson y col., 2000.<br />

- L. acidophilus + B. bifidum (+ St) BIOGARDE (comercializada en Alemania<br />

desde mediados de los 80´s).<br />

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CHOCOLATE PROBIÓTICO<br />

o Barry Callebaunt<br />

Pro Benefit (USA) -2009<br />

Chocolate para manufactura de productos, excluidos<br />

productos de panadería (cocción), líquido y sólido, blanco<br />

y negro, con hasta 1 año de supervivencia de los<br />

<strong>probióticos</strong>.<br />

o<br />

The Wright Group<br />

Probiotic chocolates<br />

(L. fermentum)<br />

(USA) - 2009<br />

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PRODUCTOS VEGETALES PROBIÓTICOS<br />

o<br />

ESPECIES USADAS<br />

Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri (starter probiótico).<br />

o<br />

CEREALES CON MAYOR POTENCIAL<br />

Avena y cebada (mayor contenido de glucanos, que no se altera<br />

durante la fermentación).<br />

o<br />

b glucanos<br />

-Efecto hipocolesterémico (reductor del riesgo vascular)<br />

-Potencial efecto anticancerígeno<br />

-Prebiótico (estimula el desarrollo de bifidobacterias)<br />

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PRODUCTOS VEGETALES PROBIÓTICOS<br />

o<br />

PRO VIVA<br />

La primera bebida probiótica, no láctea, a nivel<br />

mundial, exitosamente comercializada en Suecia<br />

desde 1994, y luego en Finlandia, Dinamarca, Reino<br />

Unido, Alemania (PRIMA VITA) y Bélgica (PRO VIE).<br />

o<br />

GOD HÄLSA<br />

Crema helada, baja en grasa, comercializada en<br />

Suecia.<br />

Suspensión hervida de harina de avena<br />

Fermentación con L. plantarum 299 V<br />

5 % de harina fermentada en<br />

jugo de frutas (PRO VIVA)<br />

20 % de harina fermentada<br />

(GOD HÄLSA)<br />

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PRODUCTOS CÁRNICOS PROBIÓTICOS<br />

o<br />

EMBUTIDOS<br />

Erkkilä y col., 2001;<br />

Työppönen y col., 2003.<br />

Probióticos potenciales: L. rhamnosus, L. paracasei, L. casei, B. lactis.<br />

Factores de stress: pH (< 5), maduración prolongada, secado.<br />

Cultivo starter/ probiótico.<br />

Productos en el mercado<br />

Salame, con 3 <strong>probióticos</strong><br />

(L. acidophilus, L. casei +<br />

Bifidobacterium).<br />

El primer producto en su tipo<br />

Alemania (1998).<br />

Símil salame, fermentado<br />

con L. rhamnosus.<br />

Japón (1998).<br />

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SELECCIÓN DE CEPAS PROBIÓTICAS EN EL FUTURO<br />

análisis genómico<br />

cepas<br />

“potencialmente<br />

probióticas”<br />

ensayos in vitro<br />

ensayos in vivo (obligatorios)<br />

cepa “probiótica”<br />

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FUTURO DE LOS ALIMENTOS PROBIÓTICOS<br />

Caracterización de nuevas cepas probióticas<br />

Nuevos alimentos <strong>probióticos</strong> para usos específicos<br />

Grupos etarios con<br />

requerimientos<br />

metabólicos específicos:<br />

-recién nacidos<br />

-adolescentes<br />

-jóvenes<br />

Personas con<br />

enfermedades<br />

específicas:<br />

-colon irritable<br />

-cáncer intestinal<br />

Personas con microflora<br />

intestinal comprometida:<br />

-pacientes irradiados<br />

-cirugías intestinales<br />

-tratamiento de AB<br />

Requerimientos<br />

- mayor conocimiento de las cepas.<br />

- nuevos procesos tecnológicos, para nuevos alimentos y bebidas.<br />

- nuevos métodos para proteger las células de <strong>probióticos</strong> durante la manufactura,<br />

packaging y almacenamiento.<br />

- liberación programada de <strong>probióticos</strong> (por pH, enzimas, tiempo) en específicos sitios<br />

del tracto gastrointestinal.<br />

- desarrollo de alimentos simbióticos.<br />

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BIFIDOBACTERIAS DE LECHE MATERNA<br />

6<br />

5<br />

4<br />

Log (CFU/ml)<br />

3<br />

2<br />

1<br />

0<br />

LM1 (5) LM1(12) LM2 (5) LM2 (10) LM3 (7) LM3 (10) LM4 (2) LM4 (6) LM5 (5) LM5 (7) LM6 (1) LM7 (1) LM8 (1) LM9 (1) LM10 (1) LM11 (1) LM12 (1) LM13 (1) LM14 (1) LM15 (1) LM16 (1)<br />

Muestras<br />

MRS anaerobiosis para rec total (verde)<br />

MRS pH 5.5 anaerobiosis (bif) (rojo)<br />

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Instituto de Lactología Industrial (INLAIN)<br />

Área de Microbiología<br />

Responsable: Dr. Jorge Reinheimer<br />

Investigadores CONICET: Dr. Gabriel Vinderola<br />

Dra. Ana Binetti<br />

Dra. Andrea Quiberoni<br />

Dra. María Luján Capra<br />

Dra. Daniela Guglielmotti<br />

Investigadora UNL: Mag. Viviana Suárez<br />

Becarios Doctorales CONICET: Bioqca. Patricia Burns<br />

Ing. Mariángeles Briggiler Marco<br />

Becario Posdoctoral CONICET: Dr. Diego Mercanti<br />

Becario UNL: Sr. Fernando Molinari<br />

Tesinistas: Sr. Lisandro Laferriere<br />

Srta. Florencia Zacarías<br />

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