caracterización de lacasas producidas por un hongo termofílico ...

Figura 5. Perfil de separación de proteína y de las enzimas lacasa 1 (A) y lacasa 2
(B) producidas por el hongo EUM1, en cromatografía de intercambio
aniónico. Las fases móviles fueron: amortiguador Tris-HCl, pH 7.3, 50 mM
y el mismo amortiguador con 0.5 M de NaCl, para hacer un gradiente de 0
a 100 %, a un flujo de 5 mL/min.
6.5. Cromatografía por filtración en gel
En este nuevo paso de purificación de la lacasa 2, se obtuvo un pico de 2,800
U/L (75.67 U/mg) de actividad a los 16 mL de separación. En este mismo volumen
salió el pico de proteína (37 μg/mL), el cual no fue igual de definido que la actividad,
lo que indica que aun pueden haber proteínas contaminantes (Figura 6). Sin
embargo con el volumen de separación de 16 mL, se estimó el peso molecular
aparente de la lacasa nativa, el cual fue de aproximadamente 62 KDa (Anexo 2), y se
encuentra dentro del rango de peso molecular de las lacasas extracelulares, que
están entre 60 a 80 KDa (Thurston, 1994).
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