caracterización de lacasas producidas por un hongo termofílico ...

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Lista de Tablas Página Tabla 1. Usos de lacasas en la industria……..……………….………………….. Tabla 2. Soluciones requeridas para preparar el gel de separación, con 12% 6 de acrilamida……………………………………………...………...……… Tabla 3. Soluciones requeridas para preparar el gel de apilamiento, con 5% 29 de acrilamida………………………………………………….……...…….. Tabla 4. Etapas de purificación de la lacasa 2 producida por el hongo 29 silvestre EUM1………………………………………………………..……. Tabla 5. Comparación de constantes cinéticas de la lacasa producida por el 44 hongo EUM1 contra la lacasa de Novo a 40ºC…………………..…….. Tabla 6. Parámetros cinéticos aparentes de las lacasas parcialmente 49 purificadas a diferentes temperaturas, con ABTS como sustrato…..… Tabla 7. Parámetros cinéticos aparentes de las lacasas parcialmente 50 purificadas a diferentes temperaturas, con 2,6-DMP como sustrato……………………………………………..……………………….. Tabla 8. Estabilidad a los disolventes de la lacasas parcialmente 50 purificadas……………………………………………………….………..... 54 v
Lista de Figuras Figura 1. Hongo termofílico silvestre MA2M2 aislado a partir de madera…….. Figura 2. Hongo EUM1 en medios de extracto de malta al 2 %. Incubado a 40°C durante 4 días. …………….…….……….……………………….. Figura 3. Producción de lacasas por el hongo EUM1 en medio de bran flakes Figura 4. Porcentajes de actividad de lacasa de los precipitados a diferentes concentraciones de saturación de sulfato de amonio……………….. Figura 5. Perfil de separación de proteína y de las enzimas lacasa 1 y lacasa 2 producidas por el hongo EUM1, en cromatografía de intercambio aniónico, después de precipitar con sulfato de amonio……………... Figura 6. Perfil de separación de proteína y actividad de la enzima lacasa producida por el hongo EUM1……………………………...………….. Figura 7. Zimograma de las lacasas parcialmente purificadas, con ABTS como sustrato. …………….…………….…………….……….…….….. Figura 8. Gel de proteína revelado con plata, de las etapas de purificación….. Figura 9. Efecto del pH de las lacasas parcialmente purificadas producidas por el hongo silvestre EUM1……………………………………………. Figura 10. Efecto de la temperatura de las lacasas parcialmente purificadas producidas por el hongo silvestre EUM1……………………………… Figura 11. Gráfico de Arrhenius………………………………………………….... Figura 12. Cinéticas de Michaelis-Menten con ABTS como sustrato………….. Figura 13. Cinética de Michaelis-Menten con 2,6-DMP como………………….. Figura 14. Actividad de lacasas del hongo EUM1 con diferentes concentraciones de etanol y acetonitrilo…………….………………... Figura. 15. Zimograma de actividad con ABTS como sustrato…………………. Página 16 36 38 39 41 42 43 44 45 47 48 51 52 53 55 vi
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7. Discusión Para realizar este tr
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8. Resumen de resultados • El Hon
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9. Conclusión Las lacasas producid
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