Diagnostic LCR SERION ELISA classic - virion\serion

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2.1.3 Diagramme synoptique du déroulement du test IgG/IgM/IgA SERION ELISA classic (voir aussi pour cela le mode d’emploi fourni dans le kit de test respectif) Dilution des échantillons (patients) : Sérum: 1:400 / 1:1000 LCR : 1:2 / 1:10 Dépôt dans les puits des prélèvements dilués et des sérums de contrôle/standard prêts à l’emploi (100 µl) INCUBATION 60 min./ 37°C chambre humide LAVER Addition de la solution de conjugué dilué (100 µl) INCUBATION 30 min./ 37°C chambre humide LAVER Addition de la solution de substrat (100 µl) INCUBATION 30 Min./ 37°C chambre humide Addition de la solution d’arrêt (100 µl) MESURE D’EXTINCTION À 405 nm français 9
2.2. Exploitation Un certificat de contrôle qualité accompagné d’une table des valeurs et d’une courbe standard est fourni dans chaque kit. Sur le certificat de contrôle de qualité, les "valeurs théoriques" du sérum standard, dont la zone de validité ainsi que les 4 paramètres de la formule d’évaluation pour l’exploitation automatisée du test sont indiquées. La lecture des valeurs en U/ml à partir de la table des valeurs n’est pas adapté au diagnostic du LCR. 2.2.1 Exploitation manuelle Pour l’exploitation du test, une courbe standard a été jointe, au moyen de laquelle chaque valeur de DO obtenue lors du test peut être affectée à l’activité d’anticorps correspondante. La valeur de témoin du substrat (blanc) doit être déduite de tous les résultats de la mesure, avant toute exploitation. Les variations de tests survenant d’un jour à l’autre ou d’un laboratoire à l’autre (dite Variance d’inter-essais) sont compensées par la multiplication de la valeur actuelle mesurée de l’échantillon du patient par un facteur de correction F : F = Valeur théorique DO (du sérum standard) Valeur journalière DO (du sérum standard) Ce procédé est nécessaire pour ajuster et normaliser le niveau actuel de mesure de l’utilisateur à la courbe standard spécifique du lot. Tout d’abord, les variations journalières doivent être corrigées par le calcul d’un facteur : 1. À partir des 2 valeurs d’extinctions de la valeur moyenne du standard, établir et vérifier si la valeur se trouve dans l’intervalle de validité indiquée. 2. Calcul du facteur "F" : La valeur théorique indiquée du standard est divisée par la valeur moyenne d’extinction : F = Valeur théorique d’extinction standard / Valeur moyenne d’extinction standard. 3. Toutes les valeurs mesurées des échantillons de patient sont multipliées par "F". 4. Grâce aux valeurs mesurées corrigées au moyen de la courbe des standards, les activités des anticorps peuvent être lues en UI/ml ou U/ml. 1) français 10
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