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tese mestrado-ribas - Embrapa Acre, 30 anos fazendo ciência

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2.2. Preparo do material para análise de isoenzimas<br />

Tanto as sementes coletadas das 60 árvores em 1997 (<strong>30</strong> no pomar de<br />

sementes e <strong>30</strong> na coleção regional) quanto aquelas dos frutos das nove árvores<br />

coletadas em 1998 foram preparadas para análise de isoenzimas, na Universidade<br />

Federal de Viçosa, viçosa-MG.<br />

Das sementes coletadas em 1997, utilizaram-se grupos de 75 a 125<br />

sementes por árvore-matriz. As sementes foram acondicionadas para germinação<br />

sobre papel germitest, umedecido com água deionizada, dentro de caixas gerbox,<br />

em geminador mantido a 25°C, com 100% de umidade relativa e sob luz<br />

contínua. Foram feitas contagens das sementes germinadas a cada 24 horas, como<br />

também a seleção para análise de isoenzimas.<br />

Para essa análise, selecionaram-se as 20 sementes que germinaram<br />

primeiro, por grupo de sementes de cada árvore-matriz. Obtiveram-se, portanto,<br />

<strong>30</strong> famílias com 20 indivíduos, para a coleção regional e para o pomar de<br />

sementes. O termo família refere-se a sementes obtidas por polinização livre,<br />

coletadas em uma única árvore, podendo incluir meios-irmãos e irmãos<br />

completos, conforme a origem do pólen.<br />

Já as sementes coletadas em 1998 foram mantidas dentro dos frutos até o<br />

momento de serem colocadas para germinar, nas mesmas condições citadas<br />

anteriormente. No entanto, as sementes de cada fruto foram dispostas dentro do<br />

mesmo gerbox, visando manter o controle por fruto e por região da copa de cada<br />

uma das nove árvores amostradas no pomar.<br />

2.3. Procedimentos eletroforéticos<br />

As análises eletroforéticas foram realizadas no Laboratório de Patologia<br />

Florestal e Marcadores Moleculares/BIOAGRO da Universidade Federal de<br />

Viçosa.<br />

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