tese mestrado-ribas - Embrapa Acre, 30 anos fazendo ciência

2.4.4. Teste de paternidade múltipla
A existência de políades na espécie estudada conduziu ao
desenvolvimento de um estudo rápido, para compreender melhor a sua influência
no processo de distribuição dos gametas durante o cruzamento entre plantas.
Utilizando a metodologia aplicada por MUONA et al. (1991), para a
Acacia melanoxylon R. Br., desenvolveram-se testes que permitiram avaliar a
possibilidade de mais de uma políade poder fecundar a mesma flor. Os testes
baseiam-se no grau de parentesco entre as sementes de cada fruto, podendo variar
de irmãs completas (uma única políade) a meias-irmãs.
Mediante o uso dos genótipos resultantes da interpretação dos locos
Sod-2, Dia-1, Dia-3 e 6Pgdh-2 para as sementes dos frutos colhidos das nove
árvores do pomar, em 1998, e dos genótipos maternos estimados pelo MLTR,
foram obtidos os alelos multilocos trazidos pelos grãos de pólen que participaram
da fertilização e formação de cada semente. Em seguida, utilizaram-se três
critérios para detectar a paternidade múltipla para cada fruto:
1 - Presença de mais de dois tipos de alelos no conjunto de grãos de
pólen de um único fruto.
2 - Teste de segregação multilocos, aplicado somente para os frutos que
receberam contribuição paternal de dois tipos distintos de alelos, para mais de um
loco. Os frutos foram testados para verificar a evidência de segregação dos alelos
nos diferentes locos, comparando as freqüências genotípicas encontradas com as
esperadas em condição de segregação multilocos independente. O resultado de
ocorrência de paternidade múltipla baseia-se na distribuição uniforme dos
gametas nas classes genotípicas, segundo a distribuição dos alelos existentes nos
gametas masculinos e femininos. A hipótese de paternidade múltipla foi testada a
1%.
3 - Presença de mais de oito cópias do mesmo alelo comum aos grãos de
pólen, em um loco. Este método baseia-se na premissa de que, se existe uma
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