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3. MATERIAL E MÉTODOS
3.1 - Locais de coleta, obtenção e preservação do material:
Em função da rota migratória proposta por Barthem & Goulding (1997),
espécimens de Brachyplatystoma flavicans foram coletados em três pontos ao longo do
sistema Estuário – Amazonas – Solimões, sendo estes: a região do estuário em Belém,
Manaus e Letícia (fig. 06). Em cada local, 15 indivíduos foram obtidos junto ao
desembarque pesqueiro nos anos de 1998 e 1999. Devido ao fato de a dourada ser
alvo da pesca artesanal e esse tipo de pesca caracterizar-se por incluir embarcações
de pequeno porte, as pescarias são invariavelmente feitas em localidades próximas a
estes desembarques. Com isso, foi assegurado que os espécimens amostrados foram
coletados num raio inferior a que 30 km do local do desembarque. Além dos
espécimens de dourada, um indivíduo de Brachyplatystoma vaillantii coletado em
Belém também foi incluído nas análises como grupo irmão, na tentativa de
referenciar a variabilidade intra-específica de B. flavicans em relação à variabilidade
interespecífica encontrada entre estes dois pimelodídeos. As amostras de tecido
(músculo) dos espécimens foram retiradas com material cirúrgico esterilizado e
preservadas em álcool 80% até a extração do DNA em laboratório.
3.2 - Métodos laboratoriais
A figura 07 apresenta um esquema com as principais etapas envolvidas no
presente trabalho.
3.2.1 - Extração de DNA
O DNA de cada espécimen foi extraído através de técnicas padronizadas
seguindo-se o protocolo descrito em Alves-Gomes et al. (1995) e detalhado
subseqüentemente.
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