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Expressão da alfa e beta amilase durante a germinação de cevada Santos et al. 71<br />
quando este momento ocorre durante a<br />
germinação porque é crucial para obter máxima<br />
produção da enzima para assegurar a<br />
degradação do amido em açúcares mais simples<br />
utilizados no processo fermentativo e para se ter<br />
um controle do tempo de germinação.<br />
Provavelmente os aumentos e<br />
diminuições na síntese da alfa amilase estão<br />
relacionadas a processo fisiológico na formação<br />
do grão e no desenvolvimento e início da<br />
germinação. Essa síntese está submetida ao<br />
controle hormonal das giberelinas na camada de<br />
aleurona (Maya-ampudia & Bernal-lugo, 2006;<br />
Muralikrishna & Nirmala, 2005).<br />
Durante as oito primeiras horas de<br />
germinação (Figura 3), foi observada redução,<br />
da atividade específica da enzima beta-amilase<br />
de 81% em relação ao total inicial da enzima.<br />
Isso pode estar relacionado provavelmente com<br />
a forma compacta em que a beta amilase está<br />
presente no grão de cevada, não tendo sua<br />
atividade totalmente evidenciada. Outras<br />
diminuições durante a germinação também<br />
foram observadas em trabalhos por Molinacano<br />
et al. (2001).<br />
Figura 3 - Perfil de formação da beta amilase em atividade específica<br />
No intervalo de tempo restante, a<br />
atividade da enzima foi sempre crescente<br />
(Figura 3) o que concorda com os resultados<br />
obtidos por Ziegler (1999) e Evans et al.<br />
(1997), que relataram aumentos sensíveis na<br />
atividade enzimática no decorrer da<br />
germinação. Foram observados três aumentos<br />
marcantes na atividade específica nos tempos<br />
de germinação de 24, 32 e 64 horas. Os<br />
resultados estão parcialmente de acordo com os<br />
de Kunze (1996), que relatou um aumento da<br />
enzima nos segundo e terceiro dias de<br />
germinação. As atividades dessa enzima podem<br />
estar relacionadas a processos fisiológicos<br />
ocorrentes na formação do grão e no inicio do<br />
desenvolvimento da germinação. Esses<br />
resultados estão de acordo com as pesquisas<br />
efetuadas por Evans et al. (1997) que também<br />
observou as maiores produções da beta amilase<br />
durante o desenvolvimento do grão tendo as<br />
maiores atividades no segundo dia de<br />
germinação e nos dias subsequentes, que podem<br />
estar relacionados à mudança da forma<br />
compacta para forma livre que ocorre nessa<br />
enzima. Em pesquisas realizadas por Wang et<br />
al. (2003) o autor afirma que a beta-amilase é<br />
sintetizada e acumulada durante<br />
desenvolvimento do grão, apresenta-se em duas<br />
formas principais: um complexo de proteína<br />
insolúvel (forma compacta) principalmente<br />
associado com a periferia dos grânulos de<br />
amido, e uma forma solúvel ou livre. A forma<br />
compacta é ligada por pontes de dissulfeto<br />
situadas na periferia dos endospermas dos<br />
grânulos de amido. A forma compacta não é<br />
completamente inativa, mas expressa uma<br />
fração da atividade após a liberação. A ativação<br />
enzimática pode ser em decorrência da redução<br />
das ligações dissulfeto levando a uma mudança<br />
na conformação na parte ativa ou em<br />
conseqüência de alguma despolimerização de<br />
oligômeros.<br />
A atividade de beta-amilase nesse<br />
experimento passou de 0,0510 U/mg (tempo<br />
zero) para 0,1136 U/mg (tempo 84 horas), um<br />
aumento de 2,23 vezes (Figura 3). A<br />
otimização do tempo de germinação<br />
adequado para atingir o nível de atividade da<br />
Revista Brasileira de Produtos Agroindustriais, Campina Grande, v.12, n.1, p.67-73, 2010