小麦ERF类转录因子生物信息学分析 - abc

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PCR 引物设计及其分析刘佳明 TEL: 18910218863 Email: 459494314@qq.com 重大工程楼 523 室 2013/1/22
引物设计时应注意的问题 1、引物长度 (primer length) 15-30 bp 不应大于 38 2、引物序列在模板内应当没有相似性较高 , 尤其是 3’ 端相似性较高的序列 , 否则容易导致错配引物 3’ 端出现 3 个以上的连续碱基 , 如 GGG 或 CCC, 也会使错误引发机率增加 3、序列 Tm 值 (melting temperature) 如 :Tm=4 ( G+C )+2 ( A+T ) 4、G+C 含量 (composition) 40-60 % 5、引物二聚体及发夹结构 (duplex formation and hairpin) 6、避免在引物的 3’ 端使用碱基 A 2013/1/22
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Page 44 and 45: • 目前已经初步验证

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