pivovarství a kvasné technologie 2007 - Vysoká škola chemicko ...

More documents

Recommendations

Info

4. seminář – Pivovarství a kvasné technologie 2007, 29.-30.3.2007, ÚKCHB, VŠCHT Praha___________________________________________________________________________Využití genetických metod k identifikaci bakterií rodu BacillusKrobová Laurecie, Melzoch KarelÚstav kvasné chemie a bioinženýrství, VŠCHT PrahaK identifikaci bakterií byly zvoleny dvě metody – RAPD (Random AmplifiedPolymorphic DNA) a amplifikace genů pro 16S rRNA a 23S rRNA pomocíPCR s následnou restrikcí PCR produktu pomocí vhodných restrikčníchendonukleáz (PCR-RFLP metoda).Jako modelové organismy byly vybrány dva mezofilní druhy bakterií (Bacilluscereus a Bacillus subtilis) a jeden zástupce termofilních bakterií (Geobacillusstearothermophilus).Izolace DNA byla provedena pomocí komerčních kitů od firem Qiagen a Sigma-Aldrich. Oba kity byly srovnány z hlediska výtěžnosti, čistoty izolované DNA aceny jednoho pokusu. Pro RAPD a PCR metody bylo nutné provést optimalizacikoncentrací jednotlivých složek v reakčním mixu.Nejprve byla použita RAPD metoda, která však nebyla funkční. Proto bylopřistoupeno k PCR-RFLP analýze, díky které byly zjištěny nesrovnalosti vesbírce mikroorganismů. Na základě tohoto zjištění byla opět zkoušena RAPDanalýza, tentokrát se skutečnými zástupci rodu Bacillus. Metody byly použityk identifikaci vybraných zástupců bakterií v reálných i uměle vytvořenýchsměsných kulturách.V závěru jsou diskutovány výhody a nevýhody jednotlivých technik, časovánáročnost a schopnost identifikace zástupců rodu Bacillus.26
4. seminář – Pivovarství a kvasné technologie 2007, 29.-30.3.2007, ÚKCHB, VŠCHT Praha___________________________________________________________________________Optimalizace kultivačních podmínek pro produkci proteinů pomocígeneticky upravené kvasinky Pichia pastorisNorek Michal, Paulová LeonaÚstav kvasné chemie a bioinženýrství, VŠCHT PrahaCílem práce bylo optimalizovat proces produkce trypsinogenu pomocí kvasinkyPichia pastoris. Ke studiu sloužily jednak kontinuální kultivace v uspořádáníchemostatu, kdy byly v ustáleném stavu kultivace zaručeny přesně definovanépodmínky nezávislé na čase, a jednak přítokované kultivace v prostředís vysokou koncentrací buněk.V první části experimentální práce byly proměřovány transientní a ustálenéstavy kontinuální kultivace v uspořádání chemostatu, kdy byl jako zdroj uhlíku aenergie v produkční fázi použit methanol nebo směsný substrátmethanol/glukosa. Maximální koncentrace trypsinogenu 190 mg.l -1 a maximálníspecifické produktivity 3,60 mg.g -1 suš .h -1 bylo dosaženo při zřeďovací rychlosti0,1 h -1 , za podmínek, kdy použitým zdrojem uhlíku a energie ve vsádkové fázibyl glycerol a v produkční fázi methanol.Ve druhé části experimentální práce byly prováděny přítokované kultivace, přikterých byl sledován vliv složení substrátu a režimu přítokování na produkcitrypsinogenu.. Maximální koncentrace trypsinogenu 527 mg.l -1 a maximálníspecifické produktivity 0,72 g.g -1 suš .h -1 bylo dosaženo za podmínek, kdypoužitým zdrojem uhlíku a energie v růstové fázi byl glycerol, v produkční fázimethanol a kdy pH produkční fáze bylo sníženo na hodnotu 5,2.27
Page 1 and 2: 4. seminářPIVOVARSTVÍ A KVASNÉ
Page 3 and 4: 4. seminář - Pivovarství a kvasn
Page 23: 4. seminář - Pivovarství a kvasn

pivovarství a kvasné technologie 2007 - Vysoká škola chemicko ...

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?