Forensisk Veterinærpatologi - Sveriges Radio
Forensisk Veterinærpatologi - Sveriges Radio
Forensisk Veterinærpatologi - Sveriges Radio
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
DET BIOVIDENSKABELIGE FAKULTET<br />
FOR FØDEVARER, VETERINÆRMEDICIN OG NATURRESSOURCER<br />
KØBENHAVNS UNIVERSITET<br />
<strong>Forensisk</strong> <strong>Veterinærpatologi</strong><br />
Forsidebilledet er fra Institut for Sygdomsbiologis billedarkiv<br />
og viser arbejdet i en gammel sektionssal.<br />
Veterinært speciale<br />
Stud. med. vet. Kirstin Dahl-Pedersen V9419<br />
Stud. med. vet. Christina Krarup V9411<br />
Vejleder: Professor Henrik Elvang Jensen<br />
Institut for Sygdomsbiologi<br />
December 2008<br />
Ben fra so hævet på<br />
grund af<br />
osteomyelitis og<br />
arthritis (fra<br />
billedarkiv).<br />
Hudstykker fra<br />
svin med multiple<br />
slaglæsioner (fra<br />
billedarkiv).<br />
Histologisk snit (x20).<br />
Martius Scarlet Blue<br />
farvning viser blå,<br />
nekrotiske<br />
muskelceller.<br />
Forvoksning af<br />
hjørnetænder hos<br />
orne (fra billedarkiv).<br />
1
Resumé<br />
Formål: Specialets mål er at klarlægge forskellige problemstillinger i forbindelse<br />
med forensisk veterinærpatologi og dyreværnssager. Der fokuseres særligt på<br />
slag hos svin og tilbagedateringen af disse.<br />
Baggrund: Institut for Sygdomsbiologi har i årene 1999‐2008 modtaget 345 sager<br />
vedrørende kvæg og svin til forensisk undersøgelse. Arkivet med disse sager er<br />
ikke tidligere systematisk opgjort.<br />
Metoder: På baggrund af et litteraturstudium er begrebet forensisk patologi<br />
defineret, og der er gjort rede for lovgivning, myndigheder, det inflammatoriske<br />
respons og vævsspecifikke reaktioner. Arkivets sager er metodisk opgjort og<br />
kategoriseret efter læsionstype (vanrøgt, slag, skuldersår, frakturer, ledlidelser,<br />
osteomyelitis samt andet). Et repræsentativt udpluk af sagerne om slag hos svin<br />
er nøjere gennemgået ved histologisk undersøgelse (H&E, Perl’s Prussian Blue,<br />
Martius Scarlet Blue, Toluidine Blue, Lysozym, MAC 387, Naphthol AS‐D<br />
Chloroacetate (Specific Esterase)).<br />
Resultater: De histologiske undersøgelser bekræfter, at læsioner kan<br />
tilbagedateres med timers præcision, som det er beskrevet i litteraturen.<br />
Farvemetoden Martius Scarlet Blue kan muligvis anvendes til påvisning af<br />
muskeldegeneration/‐nekrose. Opgørelsen af arkivet viser at ledlidelser,<br />
frakturer og vanrøgt er de hyppigste diagnoser hos kvæg, mens de hyppigste<br />
diagnoser hos svin er skuldersår, ledlidelser og slag. Opgørelsen viser desuden at<br />
sager om slag er i kraftig stigning; at der er stor forskel i indrapporteringsraten<br />
slagterierne imellem; at der ofte ikke indsendes tilstrækkeligt materiale til<br />
forensisk undersøgelse, og at der i flere tilfælde er uenighed om diagnosen<br />
mellem indsender og patolog.<br />
2
Abstract<br />
Objectives: The object of this study is to try to explain the different set of<br />
problems in relation to forensic veterinary pathology and animal cruelty cases.<br />
Special attention is paid to the beating of pigs (blunt force trauma).<br />
Background: From 1999 to 2008 the Institute of Pathobiology has received 345<br />
cases regarding cattle and pigs for forensic examination. The archive containing<br />
these cases has never before been systematically made up.<br />
Methods: Based upon a study of literature the concept of forensic pathology is<br />
defined and legislation, authorities, inflammation and reactions of specific tissues<br />
are explained. The cases in the archive have been methodically made up and<br />
subdivided according to type of lesion (neglect, blunt force trauma, decubital<br />
ulcers, fractures, joint diseases, osteomyelitis and other). A representative<br />
selection of the cases regarding the beating of pigs has undergone thorough<br />
histological examination (H&E, Perl’s Prussian Blue, Martius Scarlet Blue,<br />
Toluidine Blue, Lysozym, MAC 387, Naphthol AS‐D Chloroacetate (Specific<br />
Esterase)).<br />
Results: The histological examinations confirmed that lesions can be dated with a<br />
precision of hours, as described in the literature. The staining method Martius<br />
Scarlet Blue might have an ability to show degeneration/necrosis of muscle fibres.<br />
The making up of the archive showed that regarding cattle the most common<br />
diagnoses are: Joint diseases, fractures and neglect. Regarding pigs the most<br />
common diagnoses are: Decubital ulcers, joint diseases and blunt force trauma. It<br />
is further shown that beating of pigs is reported more and more often; that there<br />
are big differences between abattoirs and the number of cases they submit; that<br />
often not enough material is submitted to forensic examination and that there<br />
often is discrepancy between the diagnosis made by the sender of the case and<br />
the one made by the pathologist.<br />
3
Forord<br />
Dette speciale er udarbejdet på Institut for Sygdomsbiologi, Det<br />
Biovidenskabelige Fakultet for Fødevarer, Veterinærmedicin og Naturressourcer,<br />
Københavns Universitet i efteråret 2008.<br />
Udarbejdelse af speciale er en del af kanditatdelen på Veterinærmedicin og skal<br />
dokumentere, at vi er i stand til at vælge, afgrænse og formidle et fagligt relevant<br />
emne indenfor veterinærmedicin, i dette tilfælde forensisk veterinærpatologi.<br />
Dette speciale henvender sig til veterinærstuderende, dyrlæger og andre med<br />
interesse for dyreværnssager, da det giver overblik over problemstillinger<br />
indenfor dyreværnssager.<br />
Under specialets tilblivelse har vi fået stor opbakning af vores altid engagerede<br />
vejleder Professor Henrik Elvang Jensen, til hvem der rettes en stor tak. En stor<br />
tak gives ligeledes til hele afdelingen på Institut for Sygdomsbiologi for deres<br />
imødekommenhed. Her kan særligt nævnes sekretær Kirsten Chemnitz for hjælp<br />
med journalerne, bioanalytikerne Hanne Hornemann Møller, Betina Andersen og<br />
Lisbeth Kiørboe fra Laboratoriet for Histopatologi for snit og farvninger, og<br />
betjent Dennis Brok for hjælp med kamera og billedmaterialet.<br />
Tak til dyrlæge og faglig sekretær hos Det Veterinære Sundhedsråd, Lissi<br />
Vestergaard Karlsen, for hjælp og uddybning af journalerne.<br />
Tak til Mette M. Bindslev, Maria M. Haugaard, Asbjørn Toft Dahl, Ulf Leth Dahl,<br />
Birgitte Wædeled og Trine Hallund for korrekturlæsning og konstruktiv kritik.<br />
Ikke mindst en stor tak for uvurderlige opbakning hjemmefra, tak til Mikkel,<br />
Søren og vores familier for hjælp og støtte ved tilblivelsen af dette speciale, samt<br />
specielt stor tak for børnepasning til mor Hannebeth.<br />
Frederiksberg, december 2008<br />
5
Kirstin Dahl‐Pedersen V9419 Christina Krarup V9411<br />
6
Indholdsfortegnelse<br />
Resumé.................................................................................................................................... 2<br />
Abstract................................................................................................................................... 3<br />
Forord ...................................................................................................................................... 5<br />
Indledning............................................................................................................................... 9<br />
Materialer og Metoder ....................................................................................................... 12<br />
Histokemiske farvninger .............................................................................................. 12<br />
Immunhistokemiske farvninger .................................................................................. 12<br />
Teoretisk del<br />
Komparativ forensisk patologi....................................................................................... 15<br />
Lovgivning......................................................................................................................... 16<br />
Straf .................................................................................................................................... 17<br />
Myndigheder.................................................................................................................... 19<br />
Politi ................................................................................................................................ 19<br />
Fødevarestyrelsen........................................................................................................ 20<br />
Det Veterinære Sundhedsråd ................................................................................... 20<br />
Patologi og den patologiske undersøgelse................................................................ 21<br />
Inflammation og opheling ......................................................................................... 22<br />
Vævsreaktioner............................................................................................................ 25<br />
Tilbagedatering................................................................................................................ 28<br />
Praktisk analytisk del<br />
Journalerne....................................................................................................................... 31<br />
Vanrøgt.......................................................................................................................... 31<br />
Skuldersår ...................................................................................................................... 31<br />
Fraktur ............................................................................................................................ 32<br />
Forvoksninger................................................................................................................ 32<br />
Led.................................................................................................................................. 33<br />
Osteomyelitis................................................................................................................. 33<br />
7
Andet ............................................................................................................................. 34<br />
Slag..................................................................................................................................... 34<br />
Resultater .............................................................................................................................. 37<br />
Journalerne....................................................................................................................... 37<br />
Kvæg ............................................................................................................................. 37<br />
Svin ................................................................................................................................. 38<br />
Sager, der involverer flere dyr.................................................................................... 38<br />
Indsendere .................................................................................................................... 39<br />
Slagterier........................................................................................................................ 39<br />
Indsendt præparat...................................................................................................... 41<br />
Overensstemmelse mellem indsenderens og patologens diagnose................. 43<br />
Antallet af dyreværnssager ....................................................................................... 44<br />
Slag hos svin...................................................................................................................... 46<br />
Supplerende farvninger.............................................................................................. 48<br />
Diskussion.............................................................................................................................. 52<br />
Konklusion ............................................................................................................................ 56<br />
Perspektivering .................................................................................................................... 58<br />
Bilagsoversigt ....................................................................................................................... 63<br />
8
Indledning<br />
I dyreværnslovens (LBK nr. 1343 af 04/12/2007) kapitel 1, § 1 står, at ”dyr skal<br />
behandles forsvarligt og beskyttes bedst muligt mod smerte, lidelse, angst, varigt mén og<br />
væsentlig ulempe” 1 . Af tal fra Rigspolitiets årstabel (se fig. 1) ses, at der mellem<br />
1996 og 2006 er der sket en tredobling i antallet af anmeldelser af overtrædelser<br />
af dyreværnsloven (alle dyrearter). Dette kan skyldes, at der er flere, der<br />
overtræder dyreværnsloven eller at flere anmelder lovovertrædelser – eller begge<br />
dele. Faktum er, at der er kommet et øget fokus på dyrevelfærd og dyreværn<br />
gennem årene.<br />
Figur 1. Antal anmeldelser af overtrædelse af dyreværnsloven. (Tal fra Rigspolitiets årstabel 2004<br />
og 2006)<br />
I medierne belyses med jævne mellemrum forskellige problemstillinger indenfor<br />
landbruget, og forbrugerne er blevet mere bevidste om, hvordan<br />
produktionssystemerne påvirker produktionsdyrenes livskvalitet. For at sikre<br />
produktionsdyrenes velfærd, såvel som fødevaresikkerheden. må der gribes ind<br />
ved overtrædelse af de love, bekendtgørelser og forordninger, der er opsat som<br />
minimumskrav. Det er, ifølge dyreværnsloven, en dyrlæges pligt, hvis denne<br />
bliver gjort bekendt med overtrædelse af dyreværnsloven, at gribe ind og<br />
underrette myndighederne. I forbindelse med myndighedernes behandling af<br />
dyreværnssager kan det være nødvendigt at indsende døde dyr eller dele heraf<br />
til en forensisk patologisk undersøgelse på Institut for Sygdomsbiologi. Denne<br />
undersøgelse tjener til at afklare veterinærmedicinske spørgsmål til brug for det<br />
retslige efterspil.<br />
9
Dette speciale er baseret på sådanne forensiske sager, vedrørende svin og kvæg,<br />
indsendt til Institut for Sygdomsbiologi fra 1999 til og med august 2008.<br />
Problemformuleringen lyder således:<br />
Specialet består af en teoretisk og en praktisk analytisk del. I den teoretiske del redegøres<br />
der for tilbagedateringen af læsionstyper, og der drages komparative aspekter til den<br />
humane retsmedicin. I den praktisk analytiske del gennemgås og opgøres de forensiske<br />
sager vedrørende produktionsdyr indsendt til Institut for Sygdomsbiologi i perioden<br />
1999‐2008. I forbindelse med de hyppigst forekommende tilfælde gennemgås et udvalg af<br />
cases fra arkivet, hvor såvel de makroskopiske som de mikroskopiske forandringer<br />
bestemmes og relateres til konklusioner fra de teoretiske overvejelser.<br />
Den teoretiske del baserer sig på et bredt litteraturstudium. Hensigten er dels at<br />
give en generel forståelse af begrebet forensisk patologi samt de væsentlige love<br />
og myndigheder; dels at give et dybere indblik i patologien, idet der gøres rede<br />
for inflammation, opheling og muligheder for tilbagedatering, særligt i<br />
forbindelse med diagnosen slag. Den praktisk analytiske del bygger på en<br />
metodisk opgørelse af de forensiske sager vedrørende kvæg og svin samt<br />
praktisk tilbagedatering af slag ved evaluering af histologiske snit i forskellige<br />
farvninger jf. de teoretiske betragtninger.<br />
Specialet er begrænset til kun at beskæftige sig med sager indsendt til Institut for<br />
Sygdomsbiologi. Det betyder selvsagt, at materialet kun repræsenterer et udsnit<br />
af de dyreværnssager, der forekommer på landsplan. Dyrene findes oftest i<br />
forbindelse med det levende syn eller kødkontrol på slagterierne. Inden de når<br />
hertil, kan der allerede være sket en frasortering: Dyr med alvorlige og<br />
komplicerede læsioner kan være sendt til destruktion eller bortskaffet på anden<br />
måde, og disse problemstillinger kommer ikke med i opgørelsen Dyr, der<br />
transporteres i sidste tiendedel af drægtigheden, optræder heller ikke i<br />
materialet, da drægtighed i sig selv ikke er en patologisk tilstand. Specialet er<br />
yderligere afgrænset til kun at omhandle sager vedrørende kvæg og svin. De<br />
øvrige sager i arkivet drejer sig om heste, katte, hunde, får og geder, der alle kan<br />
betragtes som hobby‐ eller kæledyr, og det vil blive for omfattende at inkludere<br />
disse sager, der oftest omhandler andre problemstillinger end de, der ses hos<br />
produktionsdyrene.<br />
10
Vi er ved gennemgang af sagerne stødt på personfølsomme informationer, men<br />
har naturligvis været underlagt tavshedspligt og har behandlet sagerne fortroligt.<br />
11
Materialer og Metoder<br />
I forbindelse med specialets opstart er materiale fra 18 sager omhandlende slag<br />
hos svin indsamlet med henblik på nøjere histologisk undersøgelse.<br />
Præparaterne er udtaget i relation til de makroskopisk synlige blødninger og<br />
farvet med Hematoxylin og Eosin (H&E), se bilag 1 for protokol. Derudover er<br />
der, i ønsket om at præcisere tilbagedateringen, foretaget supplerende<br />
histokemiske og immunhistokemiske farvninger.<br />
Histokemiske farvninger<br />
Perl’s Prussian Blue: Farver hæmosiderin, som er forventeligt at se tre døgn<br />
posttraumata. Ferrojern farves blåt, mens cellekerner farves røde. Se bilag 2 for<br />
protokol.<br />
Martius Scarlet Blue: Farver fibrin: Helt nyt fibrin (< 16 t) gult/orange,<br />
intermediært fibrin (>16 t) rødt og gammelt fibrin blåt. Se bilag 3 for protokol.<br />
Toluidine Blue: Farver ikke specifikt for noget, der undersøges her, men en<br />
søgning på internettet ansporede til at afprøve om farvningen kunne bruges til at<br />
udpege nekrotiske muskelfibre2 . Se bilag 4 for protokol.<br />
Immunhistokemiske farvninger<br />
Lysozym: Farver leukocytter brunlige; makrofager stærkest og neutrofile svagere.<br />
Se bilag 5 for protokol.<br />
MAC 387: Farver leukocytter røde; neutrofile stærkest og makrofager svagere. Se<br />
bilag 6 for protokol.<br />
Naphthol AS‐D Chloroacetate (Specific Esterase): Farver leukocytter, særligt<br />
neutrofile, lilla. Se bilag 7 for protokol.<br />
De histologiske snit og farvninger er præpareret af Laboratoriet for<br />
Histopatologi. De supplerende farvninger er foretaget i tre omgange af to<br />
forskellige bioanalytikere. Til den histologiske undersøgelse er benyttet et Leica<br />
DM LB (objekt størrelse 5x, 10x, 20x, 40x og 63x) og Olympus BX 60 mikroskop<br />
(objekt størrelse 4x, 10x, 20x, 40x og 60x) og billeder af de histologiske snit blev<br />
taget med et Leica DC 500 kamera. Instituttets makroskopiske billedarkiv er<br />
gennemgået med henblik på at finde egnede billeder til illustration af specialet.<br />
12
Teoretisk del<br />
13
Veterinær forensisk patologi<br />
<strong>Forensisk</strong> (af latin forensis) betyder retslig eller juridisk. Patologi (af græsk pathos<br />
og logia) betyder læren om sygdomme og sygdomsmanifestationer gennem<br />
studiet af organer, væv og celler3 . <strong>Forensisk</strong> patologi er patologiske<br />
undersøgelser, der tjener til at afklare medicinske spørgsmål i juridiske<br />
anliggender4 .<br />
Den humane forensiske patologi er en gammel videnskab, der med sikkerhed<br />
kan spores så langt tilbage som 1248 e. Kr., hvor den kinesiske bog Xiyuan Jilu<br />
(The Washing Away Of Wrongs) beskriver, hvorledes man hos mennesker kan<br />
skelne mellem død som følge af drukning og død som følge af kvælning2 .<br />
Målet med forensiske undersøgelser af mennesker er oftest at hjælpe til<br />
opklaringen af forbrydelser, typisk mistænkelige dødsfald og mord. Patologien<br />
er her blot et af mange forensiske specialer, af andre kan til eksempel nævnes<br />
forensisk odontologi, entomologi og toksikologi5 . Veterinær forensisk patologi er<br />
til sammenligning et forholdsvis nyt felt, men det øgede fokus på dyrevelfærd og<br />
dyreværn gør, at det er en disciplin i hastig udvikling.<br />
<strong>Forensisk</strong>e, veterinærpatologiske undersøgelser finder anvendelse i forbindelse<br />
med dyreværnssager, handelssager eller forsikringsspørgsmål. Målet for<br />
patologens arbejde er at erkende læsioner, sygdomsprocesser og abnormaliteter<br />
og herefter stille den patoanatomiske diagnose og beskrive sine fund sagligt og<br />
udførlig i en attest, der skal kunne forstås af lægfolk. Patologen skal ud fra sine<br />
fund objektivt prøve at vurdere for eksempel, om skaderne er accidentielle eller<br />
non‐accidentielle, om de er påført af mennesker eller ej, eller om de er opstået<br />
ante eller post mortem. I fald de er opstået ante mortem, er det af stor betydning<br />
at prøve at tilbagedatere læsionen. Derimod er det aldrig patologens opgave at<br />
forsøge at bevise noget eller tage stilling til spørgsmål om skyld og straf4 .<br />
14
Komparativ forensisk patologi.<br />
”A comparative approach means that one can learn from studies on different species and<br />
then apply the findings to taxa where specific information may be limited or lacking” ‐<br />
J.E.Cooper 5 .<br />
Indenfor human medicin har forensisk patologi været en disciplin i mange år og<br />
er udviklet til en specialiseret gren. Tilsvarende specialisering findes ikke inden<br />
for veterinærmedicin og det kan derfor være nødvendigt for veterinære<br />
patologer at trække på den ekspertise, der findes i humant regi. Desuden kan der<br />
hentes viden fra andre discipliner. Cooper nævner i den forbindelse discipliner<br />
som entomologi, odontologi, etologi, botanik og zoologi5 .<br />
Den grundlæggende anatomi og fysiologi hos pattedyr er slående ens, men når<br />
dyr benyttes som modeller for biomedicinsk forskning, kan det kræve<br />
ekstrapolation af parametre for at kunne benyttes humant. Artsspecifikke<br />
forskelle kan dog gøre sammenligninger umulige, og valg af dyreart influerer<br />
derfor på modellernes egnethed. Der ses en generel accept af vidensdeling fra<br />
dyr til mennesker, men det omvendte kan også være tilfældet, når der søges svar<br />
på veterinære problemstillinger. I den humane forensiske patologi har en<br />
præcisering af tilbagedateringen af læsioner været forsøgt i mange år. Den viden,<br />
man har i dag, er fremkommet ved både eksperimentelle og observationelle<br />
undersøgelser6 . Obduktioner på mennesker benyttes ofte i forbindelse med en<br />
forensisk efterforskning, hvor dødstidspunktet, dødsårsagen og eventuelle<br />
læsioners relation til døden forsøges klarlagt til brug for en videre efterforskning.<br />
Sektioner på dyr som et led i en forensisk efterforskning udgør derimod en<br />
mindre del af det totale antal sektioner. Sektioner udføres rutinemæssigt som et<br />
led i sygdomsudredning på baggrund af dyrets kæledyrsværdi, avls‐, jagt‐,<br />
konkurrence‐ eller landbrugsværdi. Gerningsstedsundersøgelser, som er et<br />
kapital for sig i sager vedrørende mennesker, er sjældent aktuelle indenfor<br />
veterinære sager, men kan være relevante i for eksempel vanrøgtsager.<br />
I den humane forensiske patologi benyttes begrebet ”battered child syndrome”<br />
om fysisk mishandling af børn. Dette har dannet grundlag for tilsvarende<br />
betegnelse indenfor veterinær patologi, ”battered pet syndrome” 5,7,8 . Flere<br />
undersøgelser viser, at personer, der er voldelige mod dyr også har tendens til<br />
vold mod børn/andre mennesker4,9 , men det er en problematik, der ligger<br />
udenfor dette speciales afgrænsning.<br />
15
Lovgivning<br />
Dyreværnsloven er en såkaldt rammelov med ret generelle bestemmelser. Dens<br />
overordnede formål er at sikre, at dyr behandles ordentligt og at den, der holder<br />
dyr, drager omsorg for dem, som det kan læses ud af lovens to første paragraffer:<br />
Ӥ 1. Dyr skal behandles forsvarligt og beskyttes bedst muligt mod smerte, lidelse, angst,<br />
varigt mén og væsentlig ulempe.<br />
§ 2. Enhver, der holder dyr, skal sørge for, at de behandles omsorgsfuldt, herunder at de<br />
huses, fodres, vandes og passes under hensyntagen til deres fysiologiske, adfærdsmæssige<br />
og sundhedsmæssige behov i overensstemmelse med anerkendte praktiske og<br />
videnskabelige erfaringer.”<br />
På transportområdet findes særlige regler: Transportforordningen (Rådets<br />
forordning (EF) nr. 1/2005 af 22. december 2004 om beskyttelse af dyr under<br />
transport og dermed forbudne aktiviteter m.v.) og transportbekendtgørelsen<br />
(Bekendtgørelse nr. 1729 af 21. december 2006 om beskyttelse af dyr under<br />
transport), som supplerer ovennævnte forordning. De uddyber de hensyn, der<br />
skal tages i forbindelse med transport af dyr, for eksempel godkendelse af<br />
transportmiddel, arealkrav og planlægning af transport. Af særlig interesse i<br />
denne sammenhæng er dog hovedsagligt bestemmelserne vedrørende<br />
transportegnethed. Fra transportforordningens bilag 1, kapitel 1 ”Egnethed til<br />
transport” skal her blot anføres udvalgte punkter:<br />
”2. Tilskadekomne dyr og dyr, som har fysiologiske skavanker eller undergår en<br />
patologisk proces, betragtes som ikke egnede til transport, især hvis der er tale om<br />
a) dyr, som er ude af stand til at bevæge sig ved egen kraft uden smerter eller at gå uden<br />
støtte<br />
b) dyr med et alvorligt åbent sår eller en prolaps”<br />
”3. Syge eller tilskadekomne dyr kan dog betragtes som egnede til transport, såfremt de<br />
a) er lettere tilskadekomne eller syge og ikke vil blive påført yderligere lidelser som følge af<br />
transporten; i tvivlstilfælde skal der anmodes om veterinærrådgivning”<br />
”4. Dyr, der bliver syge eller kommer til skade under transport, skal adskilles fra de andre<br />
dyr og ydes førstehjælp så hurtigt som muligt. De skal underkastes passende<br />
16
dyrlægebehandling og om nødvendigt nødslagtes eller aflives, uden at de påføres unødige<br />
lidelser.”<br />
Fødevarestyrelsen har endvidere udsendt ”Meddelelse om skærpelse af<br />
transportegnethedsvurderingen af dyr på samlesteder og ved udførsel” i maj<br />
200510 . Her gennemgås en række patologiske tilstande med henblik på at<br />
præcisere, hvornår disse lidelser gør dyr uegnede til transport. Til eksempel kan<br />
nævnes, at svin med navlebrok større end 15 cm i diameter vurderes som<br />
uegnede til almindelig transport, og det samme gælder dyr med åbne sår, der er<br />
større end 3 cm i diameter og ikke tørre og er under afheling. Syge dyr kan, ifald<br />
nødslagtning på stedet ikke er påkrævet, transporteres til slagtning under særlig<br />
hensyntagen: På et velstrøet leje, adskilt fra andre dyr og ledsaget af slagteattest.<br />
Tvivl om et dyrs transportegnethed bør altid komme dyret til gode10 .<br />
Straf<br />
Ved overtrædelse af dyreværnsloven kan man straffes med bøde, frihedsstraf<br />
eller rettighedsfrakendelse: I henhold til lovens § 28 kan man straffes med bøde<br />
eller fængsel i op til 1 år, hvis man ”ved overanstrengelse, vanrøgt eller på anden<br />
måde behandler dyr uforsvarligt”. Der sondres ved strafudmålingen mellem<br />
uforsvarlig og grovere uforsvarlig behandling og mishandling. Som<br />
udgangspunkt anvendes følgende ”minimums‐strafpositioner” ved<br />
overtrædelser af ikke‐erhvervsmæssig karakter: Uforsvarlig behandling af dyr 1.<br />
gang: 2.000 kr., 2. gang: 3.000 kr. Grovere uforsvarlig behandling af dyr 1. gang:<br />
5.000 kr., 2. gang: 7.500 kr11 .<br />
I dyreværnslovens § 28, stk. 7 fastslås det, at ”det anses som en skærpende<br />
omstændighed, hvis overtrædelsen er begået i forbindelse med udøvelse af erhverv,<br />
herunder dyretransporter”. Dette afspejles i bødestørrelserne: Uforsvarlig<br />
behandling af dyr 1. gang: 5.000 kr., 2. gang: 7.500 kr. Grovere uforsvarlig<br />
behandling af dyr 1. gang: 10.000 kr., 2. gang: 15.000 kr40 .<br />
Er der tale om decideret mishandling, gælder det, for såvel erhvervsmæssige som<br />
ikke‐erhvervsmæssige overtrædelser, at straffen er op til 1 års fængsel; dog op til<br />
2 år, hvis der er tale om gentagelsestilfælde1 .<br />
Af dyreværnslovens § 29 fremgår videre, at hvis man kendes skyldig i grovere<br />
uforsvarlig behandling eller mishandling af dyr, kan man frakendes retten til at<br />
eje, bruge, passe eller slagte eller i det hele beskæftige sig personligt med dyr for<br />
altid eller for en nærmere fastsat periode. Forbuddet kan eventuelt begrænses til<br />
17
at omfatte bestemte arter af dyr, og overtrædelse straffes med bøde eller fængsel<br />
indtil 6 måneder.<br />
18
Myndigheder<br />
Såvel politiet som Fødevarestyrelsen og Det Veterinære Sundhedsråd kan<br />
indsende materiale til forensisk undersøgelse på Institut for Sygdomsbiologi med<br />
henblik på klarlægning af den patoanatomiske diagnose og, om muligt,<br />
tilbagedatering af læsionen.<br />
Politi<br />
Overtrædelser af dyreværnsloven skal politianmeldes, idet det generelt gælder,<br />
at anmeldelser om strafbare forhold indgives til politiet jf. retsplejelovens § 742<br />
(LBK nr. 1069 af 06/11/2008). Såvel almindelige borgere som dyrlæger kan<br />
indgive anmeldelse. For dyrlæger gælder dog den særlige regel, at en dyrlæge,<br />
der bliver bekendt med at dyreværnsloven ikke overholdes, og at et dyr<br />
behandles uforsvarligt, er pligtig til at politianmelde dette forhold og kan straffes<br />
med bøde ved udeladelse, jf. dyreværnslovens § 20, medmindre forholdet ikke er<br />
groft og i øvrigt rettes straks.<br />
Politiet vil efter at have modtaget anmeldelse iværksætte en efterforskning, hvis<br />
det skønnes, at der er begået noget strafbart jf. retsplejelovens § 742 stk. 2.<br />
Politiet/anklagemyndigheden kan forelægge sagen Fødevarestyrelsen og Det<br />
Veterinære Sundhedsråd. Det bør ifølge Rigsadvokatens meddelelse 2/2008<br />
”Sager om overtrædelse af dyreværnslovgivningen” ske i tilfælde, hvor<br />
overtrædelsen antages at kunne udgøre grovere uforsvarlig behandling eller<br />
mishandling af dyr11 .<br />
Sagens type afgør, om den skal forelægges for enten Fødevarestyrelsen eller Det<br />
Veterinære Sundhedsråd i henhold til ”Bekendtgørelse nr. 120 af 28. februar 2005<br />
om forelæggelse af veterinærfaglige spørgsmål for Det Veterinære Sundhedsråd<br />
og Fødevarestyrelsen”:<br />
”§1. Parterne i straffesager og offentlige myndigheder kan forelægge konkrete<br />
veterinærfaglige spørgsmål for Fødevarestyrelsen til udtalelse.<br />
Stk. 2. Parterne i straffesager kan i sager af principiel karakter forelægge sagen direkte for<br />
Det Veterinære Sundhedsråd”<br />
Om en sag kan betragtes som principiel fremgår af ”Vejledning om<br />
bekendtgørelse om forelæggelse af veterinærfaglige spørgsmål for Det<br />
19
Veterinære Sundhedsråd og Fødevarestyrelsen”. Anklagemyndigheden bør<br />
således ikke rette almindelige forespørgsler til Det Veterinære Sundhedsråd, men<br />
i stedet sende disse til Fødevarestyrelsen. Fælles for de spørgsmål, der stilles til<br />
enten Fødevarestyrelsen eller Det Veterinære Sundhedsråd er, at spørgsmålene<br />
ikke må stilles således, at der lægges op til en bevismæssig vurdering eller en<br />
stillingtagen til skyldighed i bestemte lovovertrædelser, idet det er op til<br />
domstolene at foretage sådanne vurderinger. Udtalelserne skal alene være<br />
vejledende med hensyn til, om en lovovertrædelse skal klassificeres som<br />
værende enten uforsvarlig behandling, groft uforsvarlig behandling eller<br />
mishandling af dyr11 .<br />
Fødevarestyrelsen<br />
Fødevarestyrelsen er en del af Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og Fiskeri og<br />
består af hovedkontoret i Mørkhøj og de tre fødevareregioner Nord (dækker<br />
Nord‐, Vest‐ og Østjylland), Syd (dækker Syd‐ og Sønderjylland og Fyn) og Øst<br />
(dækker Sjælland, Lolland‐Falster og Bornholm). Styrelsen tager sig af<br />
regeldannelse på og kontrol med fødevare‐ og veterinærområdet samt den<br />
direkte rådgivning af producenter, virksomheder, forbrugere og dyrlæger12 . I<br />
2006 oprettedes desuden et Dyrevelfærdsrejsehold, hvis opgaver blandt andet er<br />
at bistå Rigspolitiets Færdselsafdeling i vejkontroller og at koordinere<br />
regionernes dyrevelfærdskontrol13 .<br />
Hos Fødevarestyrelsen er det som nævnt muligt for<br />
politiet/anklagemyndigheden at fremlægge sagen med henblik på at få en<br />
vejledende, veterinærfaglig udtalelse. Desuden er det muligt at få generel hjælp<br />
for eksempel med hensyn til, hvilke bestemmelser der er relevante, og indhente<br />
erfaring om praksis i lignende sager. Derudover kan konkrete veterinærfaglige<br />
spørgsmål besvares, såfremt de vedrører sagens fakta11 .<br />
Det Veterinære Sundhedsråd<br />
Dette råd er et uvildigt råd nedsat af Ministeren for Fødevarer, Landbrug og<br />
Fiskeri. Rådet består af 5 medlemmer, hvoraf 3 skal have en relevant<br />
forskningsmæssig baggrund, mens 2 skal være praktiserende dyrlæger, således<br />
at rådet samlet set besidder en faglig indsigt, der gør det muligt at behandle de<br />
spørgsmål, rådet forelægges. Rådet besvarer spørgsmål i principielle sager samt<br />
rådgiver ministeren og fremsætter udtalelser om veterinære spørgsmål, enten på<br />
opfordring eller eget initiativ. Rådet udgiver en årsberetning, hvor størstedelen<br />
af de behandlede sager omtales. Af udtalelser med betydning for sagerne i dette<br />
speciale skal eksempelvis nævnes14 :<br />
20
• Det Veterinære Sundhedsråds redegørelse om transport af syge eller<br />
tilskadekomne dyr, 20. december 1991<br />
• Udtalelse om svin med store/komplicerede navle‐ eller lyskebrok, 2. december<br />
2006<br />
• Det Veterinære Sundhedsråds udtalelse om skuldersår hos søer, 18. november<br />
2003<br />
• Udtalelse vedrørende skuldersår hos søer på baggrund af spørgsmål, 17. oktober<br />
2007<br />
• Supplerende udtalelse om skuldersår hos søer, 22. maj 2008<br />
Karakteren af Rådets udtalelser er alene vejledende og bruges som sådan af<br />
domstolene, når der skal træffes afgørelser i sager, hvor veterinær indsigt er<br />
påkrævet.<br />
Patologi og den patologiske undersøgelse<br />
Dyrlægers normale tilgang til udredning af sygdomme og læsioner er optagelse<br />
af en anamnese og en klinisk undersøgelse eventuelt suppleret med parakliniske<br />
undersøgelser af for eksempel blodprøver og biopsier, og brug af endoskopi,<br />
røntgen og scanning. Men desværre er ikke alle sygdomsmanifestationer synlige<br />
eller tilgængelige hos det levende dyr, og det kan efterlade spørgsmål i<br />
forskellige situationer. Det kan dreje sig om sygdomsudredning,<br />
forsikringssager, dyreværnssager eller uenigheder eller tvivl af anden årsag.<br />
Dette kan munde ud i en indsendelse af dyret eller dele heraf til Institut for<br />
Sygdomsbiologi, for klarlægning af den patoanatomiske diagnose. Den<br />
patoanatomiske diagnose stilles på baggrund af de morfologiske forandringer,<br />
der ses ved sektion af dyret. Sektionen suppleres med andre undersøgelser som<br />
for eksempel histologiske eller bakteriologiske undersøgelser, og røntgen. Den<br />
patoanatomiske diagnose stilles ud fra disse fund, men tager afsæt i kendskabet<br />
til sygdommens eller læsionens patogenese og ætiologi. Denne kombination<br />
giver et indblik i tidsforløbet og kan derfor i nogle tilfælde bruges til<br />
tilbagedatering af læsioner. Denne teknik benyttes ofte i forbindelse med<br />
forensiske sager, hvor tilbagedatering kan være en vigtig faktor i det retslige<br />
efterspil.<br />
21
Inflammation og opheling<br />
Inflammation og heling er organismens reaktion på lokal irritation og<br />
beskadigelse og opstår momentant efter påførelse af en læsion15 . De kliniske fund<br />
ved inflammation er de 5 såkaldte kardinalsymptomer: Varme (calor), hævelse<br />
(tumor), rødme (rubor), smerte (dolor) og nedsat funktion (functio laesa). De 5<br />
kardinalsymptomer opstår som følge af ekssudation og hyperæmi. Det<br />
inflammatoriske reaktionsmønster involverer immunsystemet, karsystemet,<br />
forskellige helingsmekanismer og mediatorer i et komplekst samspil. Afhængigt<br />
af om årsagen til det inflammatoriske respons er infektiøs eller non‐infektiøs, er<br />
formålet at begrænse vævsskader ved at fortynde agens, fjerne vævsdebris og<br />
bakterier samt reparere vævet og genvinde funktionen15 . Denne proces kan kun<br />
finde sted, når dyret er i live og forløber ret forudsigeligt, hvis processen ikke<br />
forstyrres af forskellige kompromitterende faktorer. Inflammation karakteriseres<br />
overordnet som akut eller kronisk, men ved nærmere undersøgelse kan man<br />
præcisere den som perakut, akut, subakut, kronisk eller ophelet. Overgangen<br />
mellem faserne er flydende, og cellemiljøet forandres i successive bølger af celler,<br />
der akkumuleres for derefter at tynde ud igen, som det ses i figur 2.<br />
Figur 2. Skematisk repræsentation af de successive bølger af inflammationsceller,<br />
reparationsceller og matrixmakromolekyler ved inflammation. Efter Glynn 16 . (PMN= neutrofile<br />
granulocytter).<br />
22
Heling er en proces i 3 faser, der overlapper i tid og sted: Inflammation,<br />
proliferation og remodellering17,18,19,20 . Disse faser gennemgås her:<br />
Inflammationsfase: Denne fase er karakteriseret ved et vaskulært, homeostatisk<br />
og cellulært respons og varer normalt 1‐3 dage19 . Det vaskulære respons forløber<br />
med en kortvarig vasokonstriktion efterfulgt af vasodilation med øget<br />
blodgennemstrømning og karpermeabilitet, hvilket giver anledning til, at<br />
proteinrig væske frigives til det ekstravaskulære rum.<br />
Hvis karrerne er læderede, vil en blødning fordele sig i vævet i relation til<br />
læsionen. Homeostasen genoprettes ved agglutination af blodplader samt fibrin<br />
og dette danner senere matrix for efterfølgende cellemigration samt secernerer<br />
forskellige mediatorer, der stimulerer inflammationsresponset yderligere.<br />
Det cellulære respons forløber med vaskulær marginering, adhæsion og<br />
emigration af leukocytter og stimuleres af aktiverede endothelceller samt<br />
kemoattraktanter fra det læderede væv. Neutrofile granulocytter dominerer<br />
cellebilledet de første timer i inflammationsprocessen, hvor de ved degranulation<br />
frigiver antimikrobielle faktorer, kininer og proteaser, og herved begynder<br />
debridement af devitaliseret væv og fagocytose af eventuelle infektiøse agens.<br />
Antallet af neutrofile granulocytter siger støt i 24‐48 timer, hvorefter de<br />
kulminerer. Herefter vippes balanceforholdet, og makrofager dominerer<br />
cellebilledet, som det ses i figur 2. Makrofager er vigtige for en effektiv opheling<br />
af læsionen og akkumuleres fortløbende fra den blodcirkulerende pulje af<br />
monocytter. Mastceller placeret perivaskulært degranulerer og frigiver<br />
vasoaktive stoffer som histamin, serotonin, leukotriener og heparin, der<br />
amplificerer hyperæmien samt karpermeabiliteten og virker antikoagulerende19 .<br />
De fleste former for inflammation progredierer med et systemisk respons med<br />
rekruttering af humorale (antistoffer og komplementsystemet) og cellulære (B‐<br />
og T‐lymfocytter) komponenter af immunsystemet, akutfaseprotein fra leveren<br />
og øget aktivitet i benmarven med frigivelse af yderligere leukocytter og øget<br />
hematopoiese15 .<br />
Proliferativ fase: Når det akutte inflammationsrespons aftager i det beskadigede<br />
væv, stimuleres i stedet det reparatoriske respons, der involverer ændringer i<br />
den ekstracellulære matrix, fagocytose af nekrotiske celler og debris,<br />
epitelialisering samt dannelsen af granulationsvæv. Varigheden af denne fase er<br />
omkring 10‐14 dage afhængigt af læsionens størrelse19 . Ved histologisk<br />
undersøgelse er granulationsvæv karakteriseret ved fibroblastmigration og ‐<br />
proliferation, kollagensyntese og ‐deponering samt angiogenese, hvilket danner<br />
23
sæde for reorganisation og regeneration af det beskadigede væv.<br />
Helingsprocessen stimuleres af cytokiner secerneret af de beskadigede celler<br />
samt makrofager og især disses vækstfaktorer. Væksthastigheden af etableret<br />
granulationsvæv er 0,4‐1 mm/dag, mens retraktionen fra myofibroblaster er<br />
omkring 0,6 mm/dag21 .<br />
Remodelleringsfase: Denne sidste fase har varierende varighed, men mindst et<br />
par måneder19 . Fasen er karakteriseret af faldende cellulær aktivitet og<br />
fibroblastproliferationen nedreguleres i forbindelse med, at de kollagene fibre<br />
deponeres. Vaskulariteten nedsættes, kollagene fibre reorganiseres, og vævet<br />
kontraherer, for efter en længere periode at danne et ar. Arret bliver med tiden<br />
acellulært, afflades, blødgøres, bleges og brudstyrken øges til ca. 80 % af vævets<br />
oprindelig styrke21 . Arvæv i huden er oftest uden hår og kirtler.<br />
I tabel 1 ses en sammenligning mellem forskellige forfatteres histologiske<br />
estimering af tidsperspektivet i det inflammatoriske respons og opheling.<br />
Tabel 1Histologisk estimering af tidsforløbet for et åbent ukompliceret sår i huden 22,19,23 .<br />
Tid Saukko 23 Raekallio 19 Janssen 22<br />
Unde<br />
r 4<br />
timer<br />
4-8<br />
timer<br />
8-12<br />
timer<br />
12-24<br />
timer<br />
Under 4 t. Mastcelle<br />
degranulation.<br />
Fibrindannelse.<br />
Begyndende emigration<br />
af neutrofile<br />
granulocytter.<br />
4‐12 t. Neutrofile<br />
granulocytter<br />
dominerer. Enkelte<br />
mononukleære celler.<br />
Vævsødem.<br />
Begyndende<br />
epitelregeneration ved<br />
basalmembran<br />
12‐24 t. Antallet af<br />
neutrofile granulocytter<br />
falder og makrofager<br />
stiger. Makrofager<br />
fjerner vævsdebris.<br />
Mitose i fibroblastceller.<br />
Under 4 t. Ingen distinkte<br />
histologiske tegn på<br />
inflammation. Det er ikke<br />
muligt at adskille ante<br />
mortem fra post mortem<br />
læsioner.<br />
4 t. Enkelte neutrofile<br />
granulocytter perivaskulært.<br />
8‐12 t. Neutrofile<br />
granulocytter dominerer<br />
makrofager (ratio 5:1).<br />
Aktiverede fibroblaster.<br />
16‐24 t. Relative antal<br />
makrofager stiger (ratio<br />
0,4:1). Antallet af neutrofile<br />
granulocytter og mængden<br />
af fibrin topper.<br />
1-3 24‐72 t. Antallet af 24‐48 t. Epidermis migrerer 32‐72 t.<br />
1 t. Blødning, eksudation,<br />
enkelte neutrofile<br />
granulocytter. 2 t. Mastcelle<br />
degranulation, neutrofil<br />
infiltration. 2‐4 t. Enkelte<br />
makrofager<br />
4‐6 t.Tiltagende hyperæmi,<br />
fibrineksudation, stigende<br />
antal makrofager. 6‐8 t.<br />
Tydelig demarkation,<br />
tiltagende fagocytose og<br />
vævsnedbrydning<br />
12‐16 t. Faldende antal<br />
neutrofile granulocytter ift.<br />
makrofager<br />
16‐32 t.<br />
Fibroblastproliferation.<br />
Nydannelse af kapillærer<br />
24
dag<br />
e<br />
3-8<br />
dag<br />
e<br />
8-12<br />
dag<br />
e<br />
12-14<br />
dag<br />
e<br />
Over<br />
14<br />
dag<br />
e<br />
leukocytter topper. 72 t.<br />
Fibroplasi. Fremvækst<br />
af kapillærer.<br />
Begyndende<br />
granulationsvævs‐<br />
dannelse.<br />
3‐6 dage. Lateral vækst<br />
af epidermis.<br />
Kollagendannelse.<br />
Hemosiderin dannes.<br />
10‐15 dage. Antallet af<br />
inflammationsceller og<br />
karvækst falder.<br />
Kollagentykkelsen<br />
tiltager. Tynd og flad<br />
epidermis. Enkelte<br />
elastiske fibre<br />
Inflammationsresponse<br />
t forsvundet. Mængde<br />
af elastiske‐ og<br />
kollagene fibre stiger.<br />
Ardannelse. Epidermis<br />
remodelleres<br />
fra sårranden. 48 t. Makrofag<br />
antal topper. 2‐4 dage.<br />
Fibroblaster migrerer fra<br />
nærliggende bindevæv.<br />
Epitelialisering af små sår<br />
komplet.<br />
3‐4 dage. Fremvækst af<br />
kapillærer. 4‐5 dage.<br />
Kollagene fibre dannes.<br />
Massiv indvækst af<br />
kapillærer. 5‐7 dage.<br />
Epiteltykkelsen<br />
normaliseres. Antallet af<br />
lymfocytter topper.<br />
8‐12 dage. Faldende antal<br />
inflammationsceller,<br />
fibroblaster og kapillærer.<br />
Stigende antal og størrelse af<br />
kollagene fibre.<br />
12‐14 dage. Regression af<br />
cellulær aktivitet.<br />
Vaskulariteten normaliseres.<br />
Epitelet har en intakt<br />
basalmembran.<br />
14 dage. Fibroplasien topper.<br />
Modning af bindevæv.<br />
Granulationsvævdannelse<br />
3‐4 dage. Faldende antal<br />
makrofager. Sårkontraktion.<br />
Mastcellenydannelse. 4‐10<br />
dage. Faldende vandindhold.<br />
Nedsat histokemisk<br />
farvbarhed. Faldende<br />
celleindhold. Begyndende<br />
ardannelse.<br />
Indtil videre er inflammation beskrevet som noget overordnet og forudsigeligt, et<br />
autonomt respons, der gerne skulle munde ud i reparation af det beskadigede<br />
væv. Men forskellige faktorer kan kompromittere reparationen. Det kan dreje sig<br />
om læsionstypen (snitsår vs. laceration), kontamination (mikroorganismer eller<br />
fremmedlegemer), utilstrækkelig blodforsyning, systemisk hormonelle lidelser,<br />
høj alder, immobilitet, UV‐stråling, farmakologiske stoffer, immunsuppression,<br />
underernæring15 og overvægt24 . Efter succesfuld opheling af beskadigelsen skal<br />
det inflammatoriske respons stoppe og dette sker ved opregulering af anti‐<br />
inflammatoriske cytokiner17 .<br />
Vævsreaktioner<br />
Alle væv kan ifølge McGavin undergå atrofi, hypertrofi, hyperplasi, metaplasi,<br />
neoplasi, degeneration og nekrose af forskellige årsager25 . Ved den forensiske<br />
udredning er kendskab til vævenes reaktionsmønstre særdeles vigtig.<br />
25
Ukompliceret opheling af knogler, hud, muskulatur og led vil blive gennemgået<br />
her:<br />
Knogler: Knogleforandringer kan forekomme som respons på fysiske skader<br />
eller ved ændret mekanisk brug. Ophelingsforløbet ved en ukompliceret fraktur<br />
er efter Cheville skitseret i tabel 215 . Ved kompromitterende faktorer<br />
(kontamination, mobilitet mellem frakturenderne, utilstrækkelig blodforsyning)<br />
kan ophelingen forlænges eller umuliggøres ved dannelse af fibrøst væv eller<br />
sekvensterdannelse25 . Desuden ses, i forbindelsen med immobilisering eller<br />
manglende belastning, inaktivitetsatrofi af knoglevævet allerede efter 2‐3 uger26 .<br />
Tabel 2. Heling af ukompliceret fraktur efter Cheville 15<br />
Momentant Hæmorrhagi og hæmatomdannelse. Koagulation i frakturlinjen. Invasion<br />
af makrofager, der fjerner vævsdebris, erythrocytter og fibrin. Nekrose af<br />
osteocyter i frakturlinjen på grund af hypoxi..<br />
Dag 1-5 Ødem og fibrinindlejring i bløddelsvævet omkring frakturen.<br />
Granulationsvæv invaderer koagulationen. Chondroblast‐ og<br />
osteoblastproliferation fra den periosteale og endosteale margin.<br />
Dag 3-7 Blød kallus mellem knogleenderne dannes af granulationsvæv med øer<br />
af brusk.<br />
Uge 1-4 Blød kallus styrkes af et osteoidt, trabekulært netværk produceret af<br />
osteoblaster; dannelse af hård kallus ved kalcifikation.<br />
Uge 4+ Remodellering af knoglen. Kontinuerligt osteoklast‐ og<br />
osteoblastaktivitet; fjernelse af ekstern kallus; udhuling af intern kallus til<br />
dannelse af knoglemarv.<br />
En anden hyppig årsag til forandringer i knoglerne kan være osteomyelitis efter<br />
ekstern kontamination, ved hæmatogen eller lymfogen spredning af bakterier,<br />
hvilket ses hyppigst hos voksende dyr. Bakterier og leukocytterne frigiver<br />
protelytiske enzymer, der virker knoglenedbrydende og pusdannende. Der kan<br />
forekomme røntgenopklaringer allerede efter et par dage på grund af den<br />
hurtige hyperæmi og ødem med infiltration af leukocytter26 . Efter et par uger ses<br />
sclerosering omkring opklaringen og efter et par måneder kan der opstå<br />
fisteldannelse med udtømning af pus til led, muskulatur og indre og ydre<br />
overflader25 .<br />
Bakteriel infektion af knogler bliver afgrænset af fibrose og knoglenydannelser,<br />
hvilket nedsætter effekten af antibiotisk behandling og disse læsioner kræver<br />
derfor ofte kirurgisk indgriben for succesfuld opheling15 .<br />
Hud: Huden har begrænsede muligheder for respons i forbindelse med skade og<br />
følger derfor ofte et genkendeligt mønster. Dette benyttes til bestemmelse af<br />
26
ætiologien, patogenesen samt udelukkelse af differentialdiagnoser25 . Huden,<br />
kutis, består af epidermis, dermis og adnexa (kirtler og hårfollikler). Under<br />
huden ligger et fedtholdigt lag, subkutis, der hos svin er opdelt af et<br />
karakteristisk bindevævsdrag og infiltreret af mindre bindevævstrøg. Responset<br />
kan forløbe i en eller flere af disse komponenter. Ophelingen kan foregå i<br />
forskellige stadier og i samme læsion kan findes flere stadier, hvilket er vigtigt i<br />
forbindelse med prøve‐/biopsiudtagning25 . Inflammationen forløber som skitseret<br />
i tabel 1 og starter momentant efter påførelse af læsionen. Timer efter påførelsen<br />
starter reepithelialiseringen ved laterale bevægelser af frigjorte epidermalceller<br />
og efter 1‐2 dage vil epidermalceller i sårranden proliferere efter de aktivt<br />
migrerende epidermalceller20 . Efter 4 dage begynder indvæksten af<br />
granulationsvævet stimuleret af vækstfaktorer fra makrofager. I ophelingens<br />
anden uge sker kontraktion af såret ved myofibroblastlignende aktivitet20 .<br />
Granulationsvævet omdannes til arvæv ved remodellering af de kollagene fibre.<br />
Efter de tre første uger har vævet genvundet 20 % af sin styrke og vil med tiden<br />
opnå ca. 80 % af oprindelig styrke ved<br />
vedvarende remodellering20 .<br />
Muskulatur: Muskulaturen består af multi‐<br />
nukleære muskelfibre med kernerne perifert<br />
placeret, nerver, blodkar, fibroblaster og<br />
satellit‐celler. Muskulaturens respons ved<br />
skade er degeneration, nekrose, regeneration<br />
eller reparation. Den reversible degenerative<br />
forandring kan forløbe til nekrose, og<br />
afhængigt af om der er en intakt lamina basale<br />
og tilstrækkeligt med satellitceller, kan<br />
regenerationen i tværstribet muskulatur<br />
forløbe i følgende stadier, som det også er<br />
illustreret i figur 3: 1. Tab af den myofibrillære<br />
struktur (B). 2. Celleinfiltration forløber som<br />
tidligere angivet i tabel 1 med neutrofile<br />
granulocytter efter 2‐3 timer og makrofager<br />
efter 6‐8 timer (D). Satellitceller, placeret<br />
mellem lamina basale og plasmalemma,<br />
forstørres og undergår mitoser (C). 3.<br />
Satellitceller placerer sig centralt i det<br />
nekrotiske segment(E). 4. Makrofager lyserer<br />
27
og fagocyterer vævs‐debris. 5. Satellitceller danner myoblaster, der fusionerer og<br />
danner en lang smal muskelcelle med centralt beliggende kerner (F). 6. Fiberen<br />
vokser og differentieres til myofiber. 7. Ved 1‐3 uger placeres cellekernerne igen<br />
perifert25 .<br />
Fig. 3. Nekrose og degeneration af muskelcelle. (Efter McGavin25 ). BL= lamina basale,<br />
E=endomysioum, F=fibroblast, M=makrofag, Mn= muskel nucleus, PL=plasmalemma, S=<br />
satellitcelle<br />
For en succesfuld regeneration kræves en intakt lamina basale samt et<br />
tilstrækkeligt antal satellitceller. Alternativt kan reparationen forløbe med<br />
”knopskydning” med ”muskulære gigantceller” og eventuelt fibrosering,<br />
afhængigt af læsionens størrelse.<br />
Opheling af traumatiske læsioner i muskulaturen foregår ofte med<br />
knopskydning og fibrosering, da skaden er ekstensiv og med ikke intakt lamina<br />
basale. Kollagenet i arvævet er uelastisk og nedsætter kontraktabiliteten i<br />
musklen25 .<br />
Led: Forandringer i leddet involverer enten ledbrusken, synovialmembranen<br />
eller begge strukturer. Forandringerne er som oftest af infektiøs, traumatisk,<br />
degenerativ eller immunmedieret karakter; hos produktionsdyrerne oftest<br />
infektiøs. Infektionen kan opstå som følge af systemisk spredning med<br />
manifestation som arthritis eventuelt polyarthritis, som lokal overgriben fra<br />
miljøet eller sekundært fra osteomyelitis. Ved inflammation i leddet ses<br />
celleinfiltration og frigivelse af forskellige proinflammatoriske mediatorer, der<br />
kan give anledning til forandringer i ledbrusken. Desuden ses i<br />
synovialmembranen reaktioner som inflammation, hyperplasi og hypertrofi af<br />
synovialcellerne/villi. Ved arthrocentese kan tilstanden evalueres ud fra<br />
eksudatets sammensætning25 .<br />
Tilbagedatering<br />
Når man har kendskab til inflammationsresponset og de vævsspecifikke<br />
reaktionsmønstre, kan man estimere tidsforløbet for en læsion. I forbindelse med<br />
forensiske sager er tilbagedatering en vigtig faktor i udredningen, både<br />
28
veterinært og humant, og mange forskellige metoder er udforsket og benyttet i<br />
udredningen.<br />
Makroskopiske forandringer som ændret slid af klove, muskelatrofi ved nedsat<br />
brug/inaktivitet, fibrosering af væv samt knoglevækst giver en indikation af et<br />
længerevarende tilfælde26 . I nogle tilfælde kan man estimere varigheden med<br />
kendskab til vævets væksthastighed. For klove er væksthastigheden ca. 7<br />
mm/måned27 , epidermis 0,2 mm/dag23 og for granulationsvæv findes værdier<br />
som 0,5 mm/dag27 og 0,4‐1 mm/dag21 .<br />
Farveændringer i kontusioner er ved forskellige metoder undersøgt som<br />
tidsmarkør. Disse farveændringer opstår som følge af nedbrydning af<br />
ekstravasaserede erytrocytter. Farverne forløber som rød, violet/blå, grøn og gul,<br />
men der er ikke enighed om tidsperspektivet. Det kan derfor kun konkluderes, at<br />
kontusioner med gul farve er over 18 timer gamle6,28 .<br />
Hvis forandringerne ikke er makroskopisk synlige, kan andre metoder benyttes<br />
til tilbagedatering. Ved histologisk undersøgelse af læsionerne kan<br />
inflammationens cellulære processer iagttages29,17,19 . Der arbejdes med<br />
histokemiske og immunhistokemiske farvninger. I humane forsøg kan sår‐alder<br />
estimeres ved immunhistokemiske analyser af makrofagfænotyper, hvilket giver<br />
anledning til opdeling i tidlige, intermediære, sene og kroniske stadier30 . Andre<br />
bioaktive substanser er ligeledes immunhistokemisk undersøgt: Kollagentyper,<br />
fibronectin og endotheliale adhæsionsmolekyler, cytokiner og stressproteiner.<br />
Især fibronectin viste sig som en sensitiv markør (indenfor 10 min. ‐ 4 timer) 18 .<br />
Metoder og undersøgelser, der kan anvendes til tilbagedatering, er ofte<br />
undersøgt under specifikke forhold. Forskellige faktorer kan spille ind, hvilket<br />
kan kræve en korrigering, inden resultatet overføres til andre forhold.<br />
Regenerationstiden og regenerationskapaciteten kan afvige, når man taler om<br />
forskellige dyrearter, vævstyper og stofskifteniveauer. Eksempelvis tager<br />
reaktioner i knoglevæv længere tid end tilsvarende reaktioner i bløddele. Dyr<br />
med højt stofskifte, eksempelvis fugle, reagerer hurtigere end dyr med lavt<br />
stofskifte for eksempel dyr i dvale26 .<br />
”I den sammenhæng må man nøje kende de forskellige dyrearters ofte meget specifikke<br />
pato‐fysiologiske forskelle og også forskellige specifikke reaktioner på ensartede traumata”<br />
‐ J. Arnbjerg 26<br />
29
Praktisk analytisk del<br />
30
Journalerne<br />
Den praktisk analytiske del er baseret på materiale indsendt til Institut for<br />
Sygdomsbiologi i årene 1999 til 2008 (til og med august) i forbindelse med<br />
dyreværnssager vedrørende kvæg og svin. Indsenderne ønsker en forensisk<br />
patologisk undersøgelse, der udmunder i en patoanatomisk diagnose og gerne<br />
en tilbagedatering af læsionen. De 345 journaler er gennemgået og opgjort for at<br />
skabe overblik over sagerne og klarlægge problemstillinger.<br />
Sagerne omhandler forskellige patologiske problemstillinger og er grupperet i<br />
følgende kategorier: Vanrøgt, Slag, Skuldersår, Frakturer, Ledlidelser,<br />
Forvoksninger, Osteomyelitis samt Andet. Slag vil blive gennemgået mere<br />
uddybende efter dette afsnit.<br />
Andre forfattere har i deres undersøgelser valgt overordnet opdeling i infektiøse<br />
versus velfærdsrelaterede tilstande29 , eller klassificering af dyremishandling som<br />
fysisk, seksuel eller følelsesmæssig, eller vanrøgt9 . I retsligt øjemed kan det være<br />
fornuftigt at inddele sagerne i forsætligt eller ikke forsætligt8 .<br />
Vanrøgt<br />
Dette er en tilstand, hvor den ansvarshavende ikke er i stand til at sørge for én<br />
eller flere basale behov for dyret, fx foder, vand, rene og tørre omgivelser,<br />
mulighed for opretholdelse af god hygiejne og tilpas kropstemperatur samt<br />
ophold i et stimulerende miljø5 . Munro tilføjer veterinærmedicinsk behandling<br />
ved sygdom9 . Vanrøgt kan kategoriseres som forsætlig eller ikke forsætlig, alt<br />
efter den ansvarliges ”motiv” 5 , men for dyret er det en akademisk opdeling. Tegn<br />
på vanrøgt kan være vægttab/kakeksi, dehydrering, tilsmudsning, uplejet og mat<br />
pels, myiasis samt urene omgivelser5 .<br />
Skuldersår<br />
Hos svin er skuldersår et sygdomskompleks, der opstår ved længerevarende<br />
trykpåvirkning af huden over tuber spinae scapulae. Dette medfører iskæmi<br />
efterfulgt af nekrose og progredierer i dybden, hvis tilstanden ikke opdages og<br />
korrigeres i tide. Fødevarestyrelsen graduerer tilstanden fra 0‐431 :<br />
Grad 0: Ingen læsioner eller læsioner, som sandsynligvis er afstedkommet af<br />
slagsmål.<br />
31
Grad 1: Læsioner begrænset til epidermis, eventuelt med moderat sårskorpe.<br />
Grad 2: Læsioner, der inddrager dermis, eventuelt med omfattende sårskorpe og<br />
ringe fibrosering/granulationsvævsdannelse.<br />
Grad 3: Læsioner, der inddrager subkutis; der ses voldsomt<br />
granulationsdannelse.<br />
Grad4: Læsioner med blotlagt skulderknogle/knoglenydannelse.<br />
Graderne 3 og 4 skal politianmeldes, da disse tilstande er en overtrædelse af<br />
dyreværnslovens § 1 og 2 32 . Fødevarestyrelsen har dog pr. 9. juli 2008 meddelt at<br />
”et ophelet grad 3 skuldersår, der konstateres på den slagtede so ikke anmeldes<br />
til politiet, når det ikke kan afvises, at landmanden ved passende behandling har<br />
sørget for, at såret er helet op” 31 .<br />
Fraktur<br />
Frakturer kan klassificeres som åbne og lukkede, som traumatiske eller<br />
patologiske og benævnes efter brudlinjens udformning25 . Det er i forensisk<br />
øjemed vigtigt at kunne fastslå, om frakturer formodes opstået inden afhentning<br />
hos landmanden, under transport, på slagteriet eller post mortem27 . Ved<br />
frakturer i lemmerne er dyrene ofte halte ved det levende syn på slagteriet. Ofte<br />
ses en hævelse i området, og gennemsavning i sagitalplanet vil afsløre om<br />
knoglen er intakt. Ved intravitale blødninger ses blodresorption til regionale<br />
lymfeknuder27 . Vurdering af tiden siden frakturens opståen er også vigtig i<br />
kødkontrolmæssig øjemed, da åbne frakturer ældre end 6 timer giver anledning<br />
til total kassation. Åbne frakturer under 6 timer samt lukkede frakturer uanset<br />
alder skal lokalkasseres27 .<br />
Forvoksninger<br />
Denne kategori omhandler relativt langsomt voksende strukturer som<br />
hjørnetænder hos orner, horn hos kvæg og klove hos både kvæg og svin. Tænder<br />
og horn kan, ved manglende indgriben, vokse ind i både bløddele og<br />
knoglevævet i hovedet. Manglende klovbeskæring kan give forvoksninger, der<br />
ændrer belastningen i bevægeapparatet og fører til haltheder32 .<br />
32
Billedeserie 1. Forvoksninger af (A) klove hos kvæg, (B) hjørnetænder hos orne, samt (C) horn hos<br />
vædder. (Fra billedarkiv)<br />
Led<br />
Når skaden omhandler led, skelner man mellem arthrose eller arthitis, men disse<br />
vil i længerevarende tilstande være uadskillelige. Ledproblemer opdeles i<br />
septiske og aseptiske forandringer, hvilket også er vigtigt i den<br />
kødkontrolsmæssige vurdering. Akutte ledproblemer giver ofte anledning til<br />
halthed, og ved åbning af leddet ses tegn på inflammation. Ved kroniske<br />
forandringer kan ses eksudat af forskellig karakter og fibrosering af<br />
intraartikulære og eventuelt periartikulære strukturer27 .<br />
Osteomyelitis<br />
Osteomyelitis er inflammation i knoglevæv og knoglemarv; hos slagtedyr ofte<br />
forårsaget af pyogene bakterier (Arcanobacterium pyogenes, Staphylococcus aureus<br />
og Streptococcus spp.) 27 . Ved pyæmisk spredning har bakterier tendens til, hos<br />
unge dyr, at henkastes i metafysernes<br />
karakteristiske karstrukturer. Tilstanden<br />
udvikles til nekrose, ofte med senere<br />
sekvester‐dannelse25 . Osteomyelitis kan<br />
også opstå som lokal spredning, som det<br />
ses ved halebid hos svin, hvor læsionen er<br />
lokaliseret mellem halen og os sacrum, eller<br />
ved kæbeaktino‐mykose hos kvæg<br />
(Actinomyces Bovis) 25 , se billede 2. Ved<br />
kroniske tilstande ses periostale knoglenydannelser omkring infektionsstedet og i<br />
nogle tilfælde fistulært opbrud til ydre eller indre overflader27 .<br />
Billed 2. Kæbeaktinomykose hos kvæg<br />
(Fra billedarkiv)<br />
33
Andet<br />
Denne gruppering indeholder sager, der ikke passer ind i andre kategorier. Det<br />
kan dreje sig om enkeltstående tilfælde eller mindre grupper. Et udsnit af<br />
sagerne er illustreret i billedserie 3.<br />
Billedserie 3. (A) Tungepiercing hos orne, (B) pladecellecarcinom hos kvæg, (C) aurikulær<br />
elefantiasis hos svin samt (D) ukorrekt afhorning af kvæg. (Fra billedarkiv)<br />
Slag<br />
Slag hos svin har siden 2006 været årsag til et stærkt stigende antal henvendelser<br />
på Institut for Sygdomsbiologi, se figur 9. I relation til specialets start er 18 sager<br />
vedrørende slag indsamlet til nærmere gennemgang. Disse sager har undergået<br />
en systematisk histologisk gennemgang, hvor de karakteristiske forandringer er<br />
registreret. De noterede forandringer benyttes til tilbagedatering af læsionerne.<br />
Tidsfastsættelsen er et vigtigt element i den forensiske undersøgelse med henblik<br />
på dokumentation for pådragelsen og derigennem placering af skyld.<br />
34
Mange lærebøger opdeler slag i stumpt traume versus skarpt traume. Når man<br />
taler om stump traumatisering, involverer det først og fremmest huden, men<br />
underliggende strukturer som knogle, muskulatur eller andre bløddelsorganer<br />
kan medinddrages. Huden har begrænsede muligheder for respons i forbindelse<br />
med skade og følger ofte et genkendeligt mønster. Dette benyttes til bestemmelse<br />
af ætiologien, patogenesen samt udelukkelse af differentialdiagnoser25 .<br />
Faktorer som slagstyrke, hastighed, vinkel, udformning og vægt af instrumentet<br />
har indflydelse på, hvor traumatiseret vævet bliver, og hvorledes slaget<br />
manifesterer sig4,9 . Ved den forensiske undersøgelse forsøger man, med kendskab<br />
til dette, at finde frem til instrumentets art. Slagmærkernes udformning kan give<br />
formodninger om det benyttede instrument. Når slaget for eksempel er påført af<br />
en stok eller stav, giver det anledning til to parallelt forløbende, lineære<br />
blødninger. Denne togskinne‐konfiguration opstår som følge af kompression af<br />
hud og kar centralt, hvorimod de perifere blodige linjer dannes ved træk og<br />
overrivning af kar. Dette kan ses illustreret i figur 4. Afstanden mellem de to<br />
linjer kan<br />
sige noget om<br />
instrumentetstørrelse 23 .<br />
Figur 4. Dannelse af togskinne‐konfiguration efter stræk og kompression af kar i huden i<br />
forbindelse med slag. (Efter Knights 23 ).<br />
Faktorer hos dyret som fx pels, hudfarve, hudtykkelse og –elasticitet kan influere<br />
på synligheden af et slag4,9 .<br />
35
I forbindelse med den histologiske gennemgang af de 18 sager om slag er det<br />
vigtigt at bemærke præparaternes beskaffenhed. Alle præparaterne er<br />
slagtemæssigt behandlet, hvilket vil sige, at de har været udsat for skoldning,<br />
stødning, svidning, skrabning og børstning. Denne behandling medfører en<br />
fjernelse af epidermis samt at dermis fremstår som en homogen eosinofil<br />
bræmme. De fleste præparater har desuden været frosne, hvilket bevirker at<br />
erytrocytterne hæmolyserer og efterfølgende ikke kan erkendes. Blødning ses<br />
derfor i de frosne præparater som et basofilt område placeret ekstravaskulært<br />
eventuelt med antydning af erytrocytternes omkreds. Artefakter kan opstå i<br />
forbindelse med fikseringen af præparaterne. Især ses muskelcellerne at være<br />
uens påvirket, hvilket nedsætter brugbarheden.<br />
Billed 4. Histologisk snit (H&E) x 20.<br />
Blødning i subkutis ses som et basofilt område<br />
med antydning af erytrocytter.<br />
36
Resultater<br />
Journalerne<br />
Arkivet rummer i alt 345 sager, deraf 342 dyreværnssager og 3 forsikringssager.<br />
Dyreværnssagerne fordeler sig med 262 sager omhandlende svin og 80<br />
omhandlende kvæg. De 3 forsikringssager er alle vedrørende kvæg. I 31 sager<br />
var der mere end én diagnose og for fuldstændighedens skyld er alle diagnoser<br />
medtaget i opgørelsen. Det totale antal diagnoser er dermed højere end 345 og<br />
deres fordeling kan ses i tabel 3. Sagerne er, som allerede nævnt, inddelt efter<br />
læsionstype og hyppigheden, hvormed de enkelte diagnoser stilles, er opgjort.<br />
Derefter er der udvalgt en række områder til nærmere undersøgelse: Indsendere,<br />
slagterier, indsendt præparat, overensstemmelse i diagnoser, tendenser i<br />
anmeldelser af dyreværnssager, og endelig omhandler et helt afsnit slag hos svin.<br />
Tabel 3. Fordeling af diagnoser for henholdsvis kvæg og svin<br />
Kvæg<br />
Læsionstype Kvæg Svin I<br />
Hovedtyperne af læsioner for kvægets<br />
alt<br />
vedkommende er ledlidelser, frakturer og<br />
Vanrøgt 13 5 18<br />
vanrøgt. Desuden er en stor andel placeret<br />
Slag 1 40 41<br />
i kategorien Andet som er en meget Skuldersår ‐ 83 83<br />
heterogen gruppe (i parentes er noteret Frakturer 10 21 31<br />
antal sager med den givne diagnose, hvis Ledlidelser 17 77 94<br />
der er over ét tilfælde):<br />
Forvoksninger 8 4 12<br />
Kæbeaktinomykose (5),<br />
Osteomyelitis 1 10 11<br />
pladecellecarcinom (5), ukorrekt afhorning Andet 40 46 86<br />
(5), selvdød (3), sår efter stangning (2),<br />
pododermatitis (2), fejlbeskæring (2),<br />
I alt 90 286 376<br />
kronisk vaginal prolaps (2), iskæmisk nekrose af lårmuskulatur (2),<br />
senekontraktur, mangel på distale metacarpus, såleknusning, fibrosarcom,<br />
kronisk laminitis, sår, fibrom, absces, kønsveje sutureret med bindegarn, ruptur<br />
af ligament i hofteled, kronisk lungebetændelse samt omsnøring af bagben.<br />
37
Svin<br />
For svinenes vedkommende er skuldersår, ledlidelser og slag de hyppigst<br />
repræsenterede læsionstyper. Figur 5 illustrerer hvorledes disse 3 diagnoser<br />
gennem årene har afløst hinanden i successive bølger. Her og nu ses en klar<br />
tendens til et stigende antal sager med slag. I kategorien Andet fandtes hos svin:<br />
Abscesser (10), navlebrok (6), aurikulær elefantiasis (3), enterocystom (3), halebid<br />
(3), dermatitis (2), lyskebrok, kronisk flegmone og nekrose, kronisk mastitis,<br />
akutte og kroniske snitsår, kronisk ulceration, anæmi, albuesår, medfødte<br />
knogleforandringer, seneruptur, tandskifte (normalt), kronisk nekrotiserende<br />
balanopstitis, udviklingsanomali, senekontraktur, mulig drukning i skoldekar,<br />
tungepiercing, pyæmi, stiksår, iltmangel under transport samt nekrose som følge<br />
af elastikligatur.<br />
Figur 5. Fluktuationer i antal sager samt i diagnoserne Skuldersår, Ledlidelser og Slag. Gælder for<br />
sager indsendt til Institut for Sygdomsbiologi i årene 1999‐2008. Kun svin.<br />
Sager, der involverer flere dyr<br />
Det er værd at bemærke både ved vanrøgtsagerne hos begge dyrearter og ved<br />
sagerne om slag hos svin, at disse ofte omhandler mere end ét dyr. Ved<br />
vanrøgtsagerne hos kvæg drejer 7 ud af 13 sager sig om mere end ét dyr (op til<br />
189 i en enkelt sag) og omhandler i alt ca. 495 dyr. Vanrøgtsager hos svin<br />
involverer i 4 ud af 5 sager mere end ét dyr (op til 1360 i én sag) og omhandler i<br />
alt ca. 2143 dyr. I sagerne om slag hos svin gør det samme sig gældende.<br />
Seksogtyve af de 40 sager omhandler mere end ét dyr (op til 70 i én sag), i alt ca.<br />
287 svin.<br />
38
Indsendere<br />
Indsender Antal sager Ud fra et ønske om at danne et<br />
Det Veterinære Sundhedsråd 221 overblik over indsendelsen af<br />
Politiet 77 sager til forensisk undersøgelse<br />
Fødevarestyrelsen 17 på Institut for sygdomsbiologi,<br />
Kreaturslagteri 14 dels fra myndighederne, dels<br />
Svineslagteri A 4 andre parter, er dette opgjort i<br />
Svineslagteri B 3<br />
tabel 4.<br />
Svineslagteri C 2<br />
Svineslagteri D 2<br />
Politiet, Fødevarestyrelsen og<br />
Advokat<br />
Dyrlæge<br />
Dyreværnsorganisation<br />
3<br />
1<br />
1<br />
Det Veterinære Sundhedsråd er<br />
de instanser, der håndterer<br />
dyreværnssager, og de står for<br />
mere end 90 % af<br />
indsendelserne. Det Veterinære Sundhedsråd har indsendt langt størsteparten,<br />
ca. 64 %. Femogtyve sager (over 7 %) er sendt direkte fra slagterierne og dermed<br />
udenom politiet. Særligt ét slagteri skiller sig ud med hele 14 af disse 25<br />
indsendelser.<br />
Tabel 4. Antal sager fra forskellige indsendere til Institut for Sygdomsbiologi i årene 1999‐2008.<br />
Slagterier<br />
For både kvæg og svin gælder, at sagerne, uanset om de er indsendt af Det<br />
Veterinære Sundhedsråd, politiet, Fødevarestyrelsen eller andre, oprindeligt<br />
stammer fra både større slagterier og en række mindre slagtehuse, direkte fra<br />
besætningerne samt i nogen grad fra samlestalde og eksportmarkeder. Samlet set<br />
stammer flest fra slagterierne. Cleveland‐Nielsen bemærker, at der er variation<br />
mellem slagteriernes registreringssensitivitet7 . Derfor ses der, for begge<br />
39
dyrearter, nærmere på, hvilke slagterier, der har sendt materiale ind, direkte eller<br />
via myndighederne, for at undersøge, om der eventuelt er forskel i antallet af<br />
sager relativt til antallet af slagtninger slagterierne imellem.<br />
Kvægslagterier: For enkelthedens skyld er kun medtaget de indsendelser, der<br />
kommer fra tre større slagterier, som tilsammen står for 59 % af de årlige<br />
slagtninger i DK33 . Af tabel 5 ses, at selvom slagterierne er sammenlignelige i<br />
størrelse er der stor forskel på antallet af indsendelser.<br />
Tabel 5. Sammenligning i totale antal sager indsendt<br />
fra tre kvægslagterier til Institut for Sygdomsbiologi<br />
i årene 1999‐2008.<br />
KVÆG Slagtninger/uge Indsendelser totalt<br />
Slagteri 1 1900 1<br />
Slagteri 2 1900 4<br />
Slagteri 3 2150 22<br />
Svineslagterier: I nedenstående tabel opgøres kun tal fra 17 store slagterier, der<br />
samlet slagter næsten alle svin i DK34,35 . Det relative antal indsendelser pr. million<br />
slagtninger er beregnet som det totale antal sager i den periode, sagerne stammer<br />
fra, divideret med totale antal slagtninger for samme periode beregnet ud fra<br />
oplysninger om nuværende ugentligt slagtevolumen. Fluktuationer i<br />
slagtevolumen gennem årene har det ikke været muligt at tage højde for. Dermed<br />
er tabellen behæftet med nogen usikkerhed.<br />
40
Tabel 6. Slagteriernes relative antal indsendelser pr. million slagtedyr (*= lukkede slagterier).<br />
Svineslagterier Slagtninger/uge Indsendelser/million slagtninger<br />
1(So) 5.200 18,31<br />
2 8.500 0,88<br />
3* 14.000 2,40<br />
4* 16.000 0,78<br />
5* 16.300 1,18<br />
6* 20.000 1,60<br />
7* 27.000 0,47<br />
8* 28.000 0,72<br />
9 30.000 0,58<br />
10 30.700 0,40<br />
11 32.700 0,15<br />
12* 39.000 0,96<br />
13 43.000 0,64<br />
14 47.900 1,46<br />
15 49.000 0,10<br />
16 58.200 0,65<br />
17 77.000 0,88<br />
Slagteri 1, som er et so‐slagteri, skiller sig ud med en markant højere<br />
indsendelsesrate. Bortset fra dette slagteri ligger resten fordelt omkring et<br />
gennemsnit på 0,87 indsendelser pr. million slagtninger. Det vil sige, at der<br />
gennemsnitligt skal slagtes 1.150.000 svin for hver indsendelse, men der er store<br />
individuelle forskelle: Slagteri 15, som har den laveste relative indsendelsesrate,<br />
slagter 10.000.000 dyr pr. indsendelse, mens slagteri 3 med en relativ høj<br />
indsendelsesrate på 2,40 kun slagter ca. 417.000 dyr pr. indsendelse. Slagteri 1 er<br />
helt nede på knapt 55.000 slagtninger pr. indsendelse.<br />
Indsendt præparat<br />
For at kunne stille en korrekt patoanatomisk diagnose må man have et<br />
tilstrækkeligt materiale at undersøge. Uanset læsionens art vil et helt kadaver<br />
altid være det mest optimale at indsende til forensisk undersøgelse. Dette er<br />
sjældent tilfældet. I de 345 sager er der kun i 20 tilfælde indsendt et helt kadaver,<br />
svarende til lige under 6 %. Oftest indsendes kun det afficerede væv eller endog<br />
dele heraf. Derfor er der udvalgt to grupper hos svin, Skuldersår og Slag, for at<br />
undersøge om det indsendte materiale er tilstrækkeligt til en grundig forensisk<br />
41
undersøgelse. Disse to grupper er valgt, dels fordi der er mange tilfælde, og dels<br />
fordi præparaterne indenfor hver kategori bør være nogenlunde ens, og let lader<br />
sig sammenligne. Indenfor skuldersår er det indsendte materiale ordnet i 7<br />
kategorier: Hud; hud og dele af spina scapulae (varierende fra bensplinter til mere<br />
regulære stykker på op til 12 cm i længden); hud og hele scapula; helt ben; helt kadaver;<br />
fotos og uvist. I sagerne angående slag er materialet inddelt i tre kategorier:<br />
Dermis og subcutis; dermis , subcutis og muskulatur og uvist. I begge grupper<br />
dækker ”uvist” over, at det ikke fremgår af journalen, hvad det indsendte<br />
materiale bestod af.<br />
Skuldersår: Der er 83 sager med diagnosticering af skuldersår. Af figur 6 ses<br />
med stor tydelighed, at langt det hyppigste indsendte præparat er hud og dele af<br />
scapula. Det er tilfældet i 63 af sagerne (75,9 %). Til sammenligning er der kun i<br />
fire sager (knapt 5 %) indsendt et helt ben eller et helt kadaver.<br />
Figur 6. Indsendt materiale i forbindelse med skuldersår.<br />
Slag: Fyrre sager omhandler slag hos svin. I 26 tilfælde (65 %) er der indsendt<br />
dermis, subkutis og muskulatur; i 8 tilfælde (20 %) er der kun indsendt dermis og<br />
subkutis og i 6 tilfælde (15 %) er det uvist, hvad der er sendt ind. Hvis man kun<br />
kigger på de tilfælde, hvor der vides, hvad der er sendt ind, ser det sådan ud: I<br />
alt 34 cases, 77 % med muskulatur og 23 % uden muskulatur. Det vil sige, i ca. tre<br />
ud af fire tilfælde er der medsendt muskulatur.<br />
42
Overensstemmelse mellem indsenderens og patologens diagnose<br />
Det er af stor vigtighed, at de dyrlæger, der anmelder dyreværnssager, har sat sig<br />
grundigt ind i de enkelte lidelsers patologi og er i stand til at genkende og<br />
klassificere dem korrekt. Det gælder i al almindelighed, men er måske særligt<br />
relevant i kødkontrollen. For at skabe oversigt over i hvor høj grad der er<br />
overensstemmelse mellem den diagnose, den indsendende dyrlæge stiller, og<br />
den diagnose, der stilles af patologerne, er der udvalgt nogle af de hyppigst<br />
forekommende diagnoser, Skuldersår og Frakturer/Ledlidelser, og det er opgjort<br />
i hvilken udstrækning, der er overensstemmelse mellem diagnoserne.<br />
Frakturer/ledlidelser: Tilsammen 125 sager falder i kategorierne Frakturer og<br />
Ledlidelser (svin og kvæg samlet). I 76 tilfælde (60,8 %) er der enighed mellem<br />
den diagnose indsender har stillet og den patologen fremkommer med ved<br />
sektion. I 13 tilfælde (10,4 %) var der ikke enighed: I én sag mener indsender, at<br />
der er tale om ledlidelse, mens sektionen viser fraktur; i 12 tilfælde forholder det<br />
sig omvendt og indsender mener, at der er tale om fraktur, mens sektionen viser<br />
ledlidelser. Dertil kommer 36 tilfælde (28,8 %), hvor det ikke fremgår af<br />
arkivmaterialet, hvilken diagnose indsender har stillet. Hvis man fraregner de<br />
uvisse tilfælde, ændres den procentvise fordeling på følgende måde: Enighed i 76<br />
ud af 89 sager = 85,4 %, uenighed i 13 ud af 89 sager =14,6 %, dvs. enighed i ca. 5<br />
ud af 6 tilfælde. I billedserie 5 ses et hævet svineforben, der ved gennemsavning i<br />
sagitalplanet viser en fraktur.<br />
Billedserie 5. (A)Hævet forben fra so der ved (B) gennemsavning i sagitalplanet viser fraktur. (Fra<br />
billedearkiv)<br />
Skuldersår: I alt 83 sager, hvor der i alle tilfælde hersker enighed om, at<br />
diagnosen er skuldersår, mens uenigheden alene går på selve gradinddelingen: I<br />
31 tilfælde var der enighed (36,5 %), i 18 tilfælde var der ikke enighed (21,2 %),<br />
og i 36 tilfælde er det uvist (42,3 %), fordi enten indsender eller patolog eller<br />
43
egge parter ikke har angivet nogen grad. Hvis man fraregner de 36 cases, hvor<br />
det ikke vides, om der er enighed, og kun kigger på de resterende 49 cases,<br />
ændrer den procentvise fordeling sig: Enighed i 31 tilfælde = 63,3 % og uenighed<br />
i 18 tilfælde = 36,7 %. Det vil altså sige, at der er enighed i ca. 2 ud af 3 tilfælde. I<br />
de 18 tilfælde hvor der var uenighed, mente indsender i 17 af disse, at<br />
skuldersåret var værre (grad 4) end patologen gjorde (grad 3), mens indsender<br />
kun i ét tilfælde mente at skuldersåret var mindre alvorligt (grad 3) end<br />
patologen mente (grad 4). I billedserie 6 ses en so med skuldersår (A), der ved<br />
gennemsavning kan gradueres som grad 4 (B).<br />
Billedserie 6. (A) Skuldersår hos so og (B) tværsnit af skuldersår – grad 4. (Fra billedarkiv)<br />
Antallet af dyreværnssager<br />
Af figur 7 fremgår det, at antallet af indsendte sager til forensisk undersøgelse på<br />
Institut for Sygdomsbiologi varierer en del gennem årene; i 1999 er der kun<br />
indsendt én sag og i 2000 slet ingen, mens man i 2004 har 76 sager. Det er ikke<br />
muligt at tyde nogen særlig tendens.<br />
44
Figur 7. Antal sager indsendt til forensisk undersøgelse på Institut for Sygdomsbiologi i årene<br />
1999‐2008.<br />
Til sammenligning er kurverne for antal politianmeldelser af overtrædelser af<br />
dyreværnsloven i årene 1996‐2006 og antallet af dyreværnssager vedrørende<br />
kvæg og svin til behandling hos Det Veterinære Sundhedsråd i årene 1997‐2005<br />
indtegnet på figur 8 sammen med kurven for antallet af sager til undersøgelse<br />
hos Institut for Sygdomsbiologi i årene 1999‐2008. Antallet af politianmeldelser<br />
er i løbet af 10 år tredoblet, mens både antallet af sager, der ender hos Det<br />
Veterinære Sundhedsråd og hos Institut for Sygdomsbiologi i denne<br />
sammenhæng ser ud til at være relativt konstant, trods små udfald. Det skal<br />
understreges, at tallene fra politiet omfatter alle anmeldelser og dermed også<br />
omfatter andre dyrearter end kvæg og svin.<br />
45
Figur 8. Sammenligning af antallet af anmeldelser til politi fra 1996 – 2006 og Det Veterinære<br />
Sundhedsråd (DVS) fra1997 ‐ 2007 samt til Institut for Sygdomsbiologi (ISB) fra 1999 ‐ 2008.<br />
Slag hos svin<br />
Som det kan ses i figur 9, er antallet af indsendte sager vedrørende slag hos svin<br />
er i kraftig stigning. Til og med år 2000 er der slet ingen af denne type sager, i<br />
årene 2001 – 2007 er der mellem én og fem sager årligt og i 2008 er der pr. august<br />
måned allerede indsendt 20 sager. Sagerne er indsendt fra 9 slagterier. Et enkelt<br />
slagteri står for 32,5 % af disse anmeldelser, de 8 andre slagterier for tilsammen<br />
for 35 %, og i 32,5 % af tilfældene er det ikke oplyst, hvilket slagteri anmeldelsen<br />
stammer fra, men kun hvilken fødevareregion.<br />
Figur 9. Antal sager vedrørende slag indsendt til Institut for Sygdomsbiologi i årene 1999‐2008.<br />
Ved den systematiske gennemgang af sagerne omhandlende slag observeredes<br />
nogle generelle tendenser, der kendetegner de sager, der indsendes til Institut for<br />
Sygdomsbiologi.<br />
46
Instrumentet: Slagmærkernes udformning giver anledning til inddeling i tre<br />
grupper: Kontusioner forårsaget af slag med stumpt redskab, der forårsager<br />
parallelle lineære blødninger; multiple slag med en tatoveringshammer på skinke<br />
og/eller ryg; parvise punktformige blødninger med ca. 4 cm mellemrum<br />
formodentlig fremkommet efter fremdrivning med eldrivstav. De<br />
makroskopiske forandringer kan ses i billedserie 7.<br />
Billedserie 7. I relation til slaglæsionerne ses ved gennemskæring af huden blødning i<br />
underliggende strukturer (A) og i tilfældet med tatoveringshammeren ses blødning helt ned i<br />
muskulaturen (B).<br />
Histologien: Alle de gennemgåede sager var akutte tilfælde af traume. I<br />
tilknytning til de makroskopiske blødninger fandtes ved den histologiske<br />
undersøgelse ødem i subkutis og mellem muskelcellerne, forskellige grader af<br />
celleinfiltration hovedsagelig af neutrofile granulocytter, men også af makrofager<br />
i varierende grad. Celleinfiltrationerne<br />
fandtes hyppigst spredt i subkutis eller i<br />
relation til muskelnekroser; i enkelte tilfælde<br />
som massive infiltrationer i subkutis (se<br />
billede 8A). Desuden fandtes<br />
fibrinudsivninger i både subkutis og mellem<br />
muskelcellerne. Blødninger fandtes i de<br />
ufrosne præparater som erytrocytter og i de<br />
frosne som homogent basofilt farvede<br />
plamager med antydninger af erytrocytternes<br />
omkreds. Disse fandtes oftest i forbindelse<br />
med det kraftige bindevævsdrag, de mindre<br />
bindevævsstrøg, perivaskulært og spredt i<br />
muskulaturen. I de præparater, der<br />
47
omfattede muskulatur, sås, oftest i tilknytning til blødningerne i huden, nekroser<br />
i underliggende muskler. Disse muskelnekroser manifesterede sig som<br />
cellesvulst med tab af myofibrillær struktur og mere homogen farvning (se<br />
billede 8B), ofte med pyknotiske<br />
cellekerner, eller ved celleinfiltrationer af<br />
neutrofile granulocytter og/eller<br />
makrofager (se billede 8C). Intensiteten af<br />
nekroserne varierede mellem enkelte<br />
nekroser i hvert synsfelt (objekt x20) til<br />
mere massivt nekrotiske områder.<br />
Celleinfiltrationen varierede fra enkelte<br />
celler til massiv infiltration.<br />
Billedserie 8. Histologisk snit (x20) der viser (A)massiv celleinfiltration og fibrinudsivning i<br />
subkutis, (B) svulst af muskelcelle samt (C) muskelnekrose med celleinfiltration.<br />
Tiden: Med udgangspunkt i tabel 1 (primært efter Janssen22 ) er læsionerne<br />
aldersbestemt: 5 var 2‐4 timer gamle, 6 var 4‐8 timer gamle, 2 var 8‐12 timer<br />
gamle, én var over 12 timer, og i 4 tilfælde fandt vi ingen forandringer, der kunne<br />
bruges til tidsfastsættelse. Ingen af de gennemgåede sager indeholdt<br />
reparatoriske forandringer, hvorfor de, bortset fra de 4 uden forandringer, kan<br />
karakteriseres som akutte.<br />
Supplerende farvninger<br />
Perl’s Prussian Blue var negativ på alle de valgte præparater, hvilket er<br />
forventeligt, da hæmosiderin først kan ses ca. tre døgn efter skaden er påført og<br />
ud fra sammensætningen af cellepopulationen i vævet antager vi, at skaderne i<br />
alle snit er yngre end tre døgn.<br />
Martius Scarlet Blue var valgt fordi metoden skulle gøre det muligt at skelne<br />
mellem fibrin af forskellig alder. Desværre må det erkendes, at dette ikke var<br />
tydeligt. Der sås enkelte orangerøde fibrinstrenge i præparaterne (se billede 9A),<br />
men langt fra alt fibrin var farvet, og det var forventet, at det fibrin, som blev<br />
farvet, var gult/orange dvs. under 16 timer gammelt. Til gengæld viste det sig, at<br />
metoden i nogen grad kan bruges til at påvise degeneration eller nekrose i<br />
muskelfibre. Farvningerne er udført af i alt tre omgange:<br />
Degenererede/nekrotiske fibre blev ved første farvning tydeligt blå, mens de<br />
48
levende fibre var rødlige (se billede 9B). I anden farvning var denne forskel ikke<br />
nær så tydelig, idet alle fibre var farvet mere homogent blå. Laboratoriet<br />
anvendte dog ikke nøjagtig samme fremgangsmåde i første og anden farvning,<br />
og da tredje farvning blev udført efter samme modus som første farvning, sås<br />
forskellen atter tydeligt.<br />
Billedserie 9. Histologiske snit(x20) farvet med Martius Scarlet Blue viser (A) rød/orangefarvning<br />
af fibrin og(B) blåfarvning ved muskelnekrose.<br />
Toluidine Blue gav ingen farveforskel mellem levende og nekrotiske muskelfibre.<br />
Naphthol AS‐D Chloroacetate (Specific Esterase), Lysozym og MAC 387: Metoderne<br />
virkede efter hensigten, leukocytterne blev tydeligere i præparatet og<br />
differentiering mellem neutrofile granulocytter og makrofager forbedredes.<br />
Samlet set var kun Martius Scarlet<br />
Blue, Naphthol AS‐D Chloroacetate<br />
(Specific Esterase), Lysozym og MAC<br />
387 anvendelige farvemetoder til<br />
tilbagedateringen i denne undersøgelse<br />
49
Resultatet af de tre sidstenævnte farvninger kan ses i billedserie 10.<br />
Billedserie 10. Histologiske snit (x40) der viser resultatet af farvning med (A) Naphthol AS‐D<br />
Chloroacetate (specifik esterase) af neutrofile granulocytter i subkutis, (B) lysozym af makrofager i<br />
muskelnekrose og (C) MAC 387 af neutrofile granulocytter i blødning i bindevævsdraget.<br />
50
Det retslige efterspil<br />
Den forensiske undersøgelse skal benyttes som dokumentation i det retslige<br />
efterspil. Af vores arkivmateriale fremgår det ikke, hvorledes sagerne er endt,<br />
men for helhedens skyld har vi, i fire tilfældigt udvalgte sager om salg hos svin,<br />
med hjælp fra Det Veterinære Sundhedsråd fået oplyst, hvordan sagerne er<br />
dømt.<br />
Afgørelser:<br />
Sag 1: Oktober 2001<br />
En so leveret til slagtning med tatoveringer langs hele ryggen og på begge<br />
skinker, i alt ca. 60 tatoveringer.<br />
Sigtede fik en udenretlig bøde på 2.500 kr., som han nægtede at betale.<br />
Politimesteren besluttede derefter at opgive påtalen, idet videre forfølgning ikke<br />
kunne ventes at føre til straf, eftersom forholdet er forældet.<br />
Sag 2: Oktober 2002<br />
Et svin leveret til slagtning med multiple elstødermærker (ca. 100) langs hele<br />
ryggen, uvillig til at bevæge sig, aflivet på rampen.<br />
Vognmand skulle betale en bøde på 6.000 kr. med en forvandlingsstraf på<br />
fængsel i 10 dage. Rådets erklæring blev lagt til grund for afgørelsen. Chaufføren<br />
skulle betale en bøde på 5.000 kr. med en forvandlingsstraf på fængsel i 8 dage.<br />
Gårdejeren skulle betale en bøde på 1.000 kr. med en forvandlingsstraf på<br />
fængsel i 6 dage.<br />
Sag 3: Juli 2003<br />
Tyve svin leveret til slagtning med kraftige mærker efter slag langs ryggen. To af<br />
svinene var desuden tatoveret omkring anus og ydre kønsorganer.<br />
Tiltalte blev ved retten idømt en bøde på 5.000 kr., med en forvandlingsstraf på 8<br />
dages fængsel. Tiltalte betalte sagens omkostninger.<br />
Sag 4: Maj 2004<br />
To søer leveret til slagtning med henholdsvis 18 og 8 skinketatoveringer.<br />
Tiltalte blev idømt en bøde på 3.000 kr. Forvandlingsstraffen var fængsel i 6 dage.<br />
51
Diskussion<br />
Overordnet er det samlede antal af sager i opgørelsen overraskende: Der var en<br />
forventning om langt flere. Når man tænker på, at der af svin alene årligt slagtes<br />
omkring 20 millioner i Danmark, virker 345 sager om svin og kvæg, gennem en<br />
periode på næsten 10 år, som få. Men skyldes det så, at problemet ikke er større<br />
eller underrapportering?<br />
Læsionshyppigheder: Under opgørelsen af sagerne i forskellige læsionstyper<br />
var det tankevækkende, hvordan antallet af anmeldelser af ledlidelser,<br />
skuldersår og slag hos svin stiger og falder i tre på hinanden følgende bølger.<br />
Dette har givetvis en sammenhæng med, hvad der aktuelt er i mediernes søgelys,<br />
for eksempel kan man tydeligt se, hvordan antallet af sager med skuldersår stiger<br />
voldsomt i 2004, efter der året forinden for alvor er taget hul på debatten både i<br />
medierne og faglige kredse.<br />
Det bemærkes også, at der kun er ét kreatur i gruppen Slag. Det behøver ikke<br />
betyde, at denne type læsioner ikke findes hos kvæg – slag kan blot være sværere<br />
at erkende på kreaturer, og måske er andelen af kvæg, der bliver slået i<br />
virkeligheden langt større.<br />
Indsendere: Ved opgørelsen af indsendere bemærkes det, at en gruppe af<br />
slagterier tegner sig for 7 % af indsendelserne til Institut for Sygdomsbiologi. Det<br />
vil sige, at sagerne er indsendt direkte fra slagteriet udenom politiet, hvilket ikke<br />
er normal praksis i dyreværnssager. Det vides ikke hvorfor, man har valgt denne<br />
fremgangsmåde, men måske kan det være en måde at sikre sig, at man har en<br />
sikker sag, inden man kaster sig ud i en egentlig politianmeldelse.<br />
Tabel 5 og 6 over slagteriernes indsendelser i forhold til antal slagtninger viser<br />
for kreaturslagterierne vedkommende, at særligt ét slagteri, Slagteri 3, skiller sig<br />
ud med mange indsendelser. Dette slagteri er identisk med det kvægslagteri, der<br />
optræder i tabel 4, og det synes samlet at pege i retning af et slagteri, hvor<br />
dyreværn er i fokus, hvilket selvfølgelig er glædeligt. I tabellen over<br />
svineslagterier er der også ét slagteri, der skiller sig endog meget voldsomt ud<br />
med en indsendelsesrate på 18,31/mill. slagtninger mod et gennemsnit for de<br />
andre slagterier på 0,87/mill. slagtninger. At der er tale om et slagteri, der<br />
udelukkende slagter søer har naturligvis betydning for denne høje<br />
indsendelsesrate. Slagtesvin er som udgangspunkt sunde og raske dyr, der kun<br />
sendes til slagtning, fordi de har nået en vis vægt. Søer, der sendes til slagtning,<br />
52
er derimod udsætterdyr; det vil sige udtjente dyr, der ikke længere kan indgå på<br />
en økonomisk tilfredsstillende måde i produktionen på grund af fx alder,<br />
reproduktionsfejl eller benproblemer. Men fordi indsendelsesraten er så<br />
påfaldende høj i forhold til de andre slagterier, kan man jo spekulere på, om det<br />
ikke også hænger sammen med det personale, der er ansat og deres holdning til<br />
dyrevelfærd.<br />
Både for kreatur‐ og svineslagterierne gælder naturligvis, at tabel 5 og 6 ikke<br />
siger noget om det faktiske antal dyreværnssager, det enkelte slagteri anmelder.<br />
Tallene er kun et udtryk for hvor mange af slagteriets dyreværnssager, der ender<br />
hos Institut for Sygdomsbiologi. Men under antager, at alle slagterierne<br />
modtager et repræsentativt udvalg af dyr, er forskellene slagterierne imellem<br />
alligevel tankevækkende. Hvad der ligger til grund for disse forskelle, kan der<br />
kun gisnes om. Måske kan det handle om, hvilken vægt den enkelte dyrlæge<br />
lægger på dyrevelfærd, eller om i hvor høj grad de kontrollerende dyrlæger har<br />
vænnet sig til det de ser, eller måske om manglende tid og praktiske<br />
besværligheder i det daglige arbejde?<br />
Præparater: Undersøgelse af de indsendte præparater viser, at der i langt fra alle<br />
tilfælde indsendes tilstrækkeligt materiale til, at der kan udføres en<br />
tilfredsstillende grundig undersøgelse, hvilket er problematisk med tanke på det<br />
videre juridiske forløb. I tilfælde vedrørende skuldersår må det betegnes som<br />
særdeles utilstrækkeligt kun at indsende hud alene, og hud og dele af spina<br />
scapulae, som størstedelen af indsendelserne (>75 %) består af, er heller ikke<br />
sufficient. I tilfælde med slag bør præparatet omfatte muskulaturen, da dette<br />
oftest er af afgørende betydning for muligheden for at vurdere læsionen.<br />
Opgørelsen viser at præparatet omfatter muskulatur i tre ud af fire sager, om end<br />
kun meget lidt i visse tilfælde. Både i sager om skuldersår og sager om slag vil et<br />
helt kadaver være det ideelle materiale, men det har selvfølgelig både praktiske<br />
og økonomiske implikationer. For at læsionerne kan undersøges bedst muligt bør<br />
der i sager om skuldersår som minimum indsendes hele benet og gerne det andet<br />
forben også. For slag gælder at præparatet skal omfatte muskulatur.<br />
Overensstemmelse i diagnoser: Med hensyn til overensstemmelse mellem<br />
indsenderens og patologens diagnose kan vi konstatere, at der hersker nogen<br />
usikkerhed om især gradinddelingen af skuldersår. Det er beklageligt efter den<br />
store fokusering, der har været på problemet. Man kan spekulere på, om det<br />
bunder i at både grad 3 og 4 skal politianmeldes og så går indsenderen måske<br />
ikke så højt op i, om det er den ene eller den anden grad. Det kan også skyldes at<br />
53
metoden til gradinddeling er vanskelig at bruge, hvis man ikke har mjulighed for<br />
at skære dyret op. Et udvalg under Justitsministeriet arbejder pt. på en ny form<br />
for gradinddeling, der baserer sig på klinisk erkendelige tegn36 . Måske vil dette<br />
tiltag lette gradinddelingen ude på slagterierne.<br />
Dyreværnssager: For at få et så sandfærdigt billede af dyreværnssituationen<br />
som muligt er man afhængig af holdningen til dyrevelfærd i flere led i kæden fra<br />
jord til bord. Landmanden, slagterierne, myndighederne og forbrugerne har alle,<br />
direkte eller indirekte, indflydelse på, hvordan dyrevelfærden vægtes og dermed<br />
hvor mange sager, der anmeldes. En stigning i antallet af dyreværnssager kan<br />
derfor både indikere, at der forekommer flere sager i det hele taget, og at der er<br />
kommet mere fokus på problemstillingerne.<br />
Vi forventer, at de indsendte sager repræsenterer de problemstillinger, der er<br />
aktuelle i samfundet. Men der findes problemstillinger, der ikke registreres hos<br />
Institut for Sygdomsbiologi. Denne underrapportering omhandler fx de mange<br />
søer, der går til destruktion i stedet for slagtning: Af Danmarks samlede<br />
sobestand på ca. 1,1 millioner dyr afgår mellem 40 og 50 % årligt og af disse<br />
sendes omtrent hver fjerde til destruktion (ca. 160.000) 37,38 .<br />
Den normale procedure for dyreværnssager er anmeldelse til politiet eventuelt<br />
med involvering af Det Veterinære Sundhedsråd, hvis problemet er af principiel<br />
karakter. Men dyrlæger, advokater og forsikringsselskaber kan også sende ind.<br />
Opgørelsen viser en stigning i antal sager fra år 2000. Man kan undre sig over<br />
den lave forekomst i 1999 (1 sag) og 2000 (0 sager). Om det hænger sammen med<br />
formandsskifte i Det Veterinære Sundhedsråd, lovgivningsændringer eller andet<br />
kan ikke konkluderes ud fra denne undersøgelse.<br />
Slag: Differentialdiagnoser til slag påført af mennesker kan være forandringer i<br />
huden opstået sfa. infektiøse eller non‐infektiøse agens. Af non‐infektiøse kan<br />
nævnes mærker efter kontakt med andre svin (bidmærker), medfødte eller<br />
erhvervede tilstande, der ændrer blødningstendensen28 . Af infektiøse agens kan<br />
hos svin nævnes rødsyge, Erysipelothrix rhusiopathiae, der giver karakteristiske<br />
rhombeformede læsioner, der dog kan konfluere25 .<br />
Brugbarheden af de supplerende farvninger kan diskuteres, hvis man<br />
sammenholder med den viden, man får ved udelukkende at vurdere H&E<br />
præparater. Dog kunne det være relevant med en uddybende undersøgelse af<br />
effektiviteten af Martius Scarlet Blue farvning som indikator for<br />
54
muskeldegeneration/nekrose. Ved evaluering af histologiske præparater<br />
opbygges langsomt en erfaring og ved sammenhold af resultater mellem<br />
undersøgere skal man korrigere herfor. Detaljeringsgraden, evaluering af<br />
normalt og unormalt, kendskab til mikroskop/kamera er alle faktorer, der kan<br />
give forskellige udlægninger.<br />
Det retslige efterspil: De 4 konkrete sager, der er fundet en afgørelse på, er alle<br />
endt med bøder på mellem 1.000 og 6.000 kr. til de sigtede. Pr. 1. juli 2003 trådte<br />
en ændring af dyreværnsloven i kraft med det formål at forhøje bødestørrelserne<br />
i sager om lovovertrædelser39 . Ud fra de valgte 4 sager er det ikke muligt at sige<br />
noget om, hvorvidt denne lovændring har medført skærpelse; det vil naturligvis<br />
kræve en større samling sager til sammenligning.<br />
Tilbagedatering: Som der ses illustreret i tabel 1 er inflammationen et<br />
forudsigeligt respons. Til trods for det, ses der, i tilbagedateringsøjemed, stor<br />
variation i tidsforløbet. Det optimale ville være at finde en ”Golden Standard”,<br />
men indtil denne findes, må man ud fra litteraturen, undersøgelser og ens<br />
personlige erfaringer finde en standard, man konsekvent overholder. Om det i<br />
Danmark er nødvendigt med præcisering af tilbagedateringen er uvist, men<br />
efterspørgslen på ekspertviden kan forventes at øges.<br />
55
Konklusion<br />
Der er i dette speciale ikke arbejdet ud fra en hypotese, der til slut kan af‐ eller<br />
bekræftes. Specialet hari stedet beskæftiget sig med forensisk patologi i bred<br />
forstand og har undervejs berørt mange forskellige problematikker, både i det<br />
teoretiske arbejde og i den praktisk analytiske gennemgang, lige fra lovgivning<br />
til immunhistokemiske farvemetoder.<br />
Konklusionen kan dermed heller ikke samles i et simpelt ja eller nej, men består<br />
snarere af en række hovedpointer:<br />
• Det generelle antal af anmeldelser om overtrædelser af dyreværnsloven er<br />
tredoblet i perioden 1996‐2006, og kurven ser ikke ud til at være knækket<br />
endnu.<br />
• De hyppigste læsionstyper hos kvæg er ledlidelser, vanrøgt og frakturer.<br />
Hos svin er de hyppigste læsionstyper slag, ledlidelser og skuldersår.<br />
• Der er påfaldende forskel i rapporteringsfrekvensen for dyreværnssager<br />
slagterierne imellem.<br />
• Der indsendes i mange tilfælde utilstrækkeligt materiale til forensisk<br />
undersøgelse til at der kan udføres en tilfredsstillende grundig<br />
undersøgelse.<br />
• Der hersker usikkerhed om korrekt gradinddeling af skuldersår blandt<br />
dyrlæger.<br />
Slag<br />
• Institut for Sygdomsbiologi modtager et kraftigt stigende antal sager<br />
angående slag hos svin til forensisk undersøgelse.<br />
• Det er muligt at tilbagedatere læsioner i huden hos svin efter slag med<br />
timers præcision ud fra viden om inflammationens faser.<br />
• De tre farvemetoder Naphthol AS‐D Chloroacetate (Specific Esterase),<br />
Lysozym og MAC 387 kan alle anvendes til at optimere visualiseringen af<br />
de cellulære elementer.<br />
• Farvemetoden Martius Scarlet Blue kan muligvis bruges til påvisning af<br />
degenererede/nekrotiske muskelfibre. Yderligere undersøgelse er<br />
påkrævet.<br />
56
Indenfor forensisk veterinærpatologi findes mange problemstillinger.<br />
Overordnet er en del af disse berørt i specialet, men der er stadig mange emner<br />
og problematikker, der bør undersøges nøjere.<br />
57
Perspektivering<br />
Som nævnt i diskussionen var det forventet, at arkivet ville rumme langt flere<br />
sager end tilfældet var. Dette speciale har opgjort sagerne for svin og kvæg, men<br />
disse sager repræsenterer ikke alle problemstillinger som eksempelvis transport<br />
af drægtige dyr, udenlandstransporter og læsioner hos søer, der sendes til<br />
destruktion. Det kunne være spændende at se nærmere på nogle af disse. Det<br />
samme gælder problemstillinger indenfor andre dyrearter fx mink og fjerkræ.<br />
Ud fra vores opgørelse kan det konstateres, at problemstillingerne kommer i<br />
successive bølger. Om dette vidner om, at nye problemstillinger opstår, eller om<br />
ressourcerne (økonomiske, personalemæssige) begrænser fokus til enkelte<br />
områder, kunne være interessant at undersøge. Er det muligt at forudse hvilken<br />
problemstilling, der bliver den næste? Et bud kunne være halebid: Halebid er et<br />
meget stort velfærdsmæssigt problem i slagtesvinebesætningerne og der forskes<br />
intenst i måder at nedbringe forekomsten. Dette vil samtidig nedsætte andelen af<br />
svin, der totalkasseres på grund af pyæmi, der er en hyppig følge af halebid.<br />
Hvordan sagerne bliver behandlet i retten afhænger i høj grad af, om<br />
bevismaterialet er tilstrækkeligt til en domsfældelse. Om det er nødvendigt med<br />
en forbedring af den forensiske undersøgelse i form af bedre<br />
tilbagedateringsteknikker, skærpede regler angående det indsendte materiale<br />
eller uddannelse af eksperter, der kan placeres på slagterierne bør overvejes.<br />
Denne opgørelse viser med al tydelighed, at det kunne være hensigtsmæssigt at<br />
lave protokoller for udtagelse af materiale til indsendelse, hvis indsendelse af<br />
hele dyret ikke er muligt, og herved optimere den forensiske undersøgelse.<br />
Slutteligt kan man spekulere på hvor ansvaret ligger: Er det hos landmanden,<br />
slagterierne, myndighederne eller forbrugerne? Kan antallet af dyreværnssager<br />
reguleres med højere straf, højere priser for produkterne, mere kontrol eller<br />
strammere lovgivning? Har den pr. 1. juli 2003 indførte skærpelse af straffen for<br />
lovovertrædelser haft nogen mærkbar effekt?<br />
58
Litteraturliste<br />
1 Dyreværnsloven (LBK nr 1343 af 04/12/2007). Retsinfo, [citeret 19.<br />
November 2008]. Dato for revision: 14.12.2007. Tilgængelig på internet:<br />
https://www.retsinformation.dk/Forms/R0710.aspx?id=2714.<br />
2 Muscle fiber necrosis. Neuromuscular Disease Center, [citeret 3. November<br />
2008]. Dato for revision: 26.08.2003. Tilgængelig på internet:<br />
http://neuromuscular.wustl.edu/pathol/necrosis.htm.<br />
3 Bang, J., K. Hårbøl, J. Schack & H. Spang‐Hansen (2001): Dansk<br />
Fremmedordbog. 2. udgave. Gyldendals Forlag,<br />
4 Merck, M.D. (2007): Veterinary Forensics. Animal Cruelty Investigations. 1.<br />
udgave. Blackwell Publishing Professional,<br />
5 Cooper, J.E. & M. Cooper (2007): Introduction to Veterinary and Comparative<br />
Forensic Medicine. 1. udgave. Blackwell Publishing Ldt,<br />
6 Langlois, N.E.I. & G.A. Gresham (1991): The Aging of Bruises ‐ A Review<br />
and Study of the Color Changes with Time. Forensic Science International.<br />
Vol. 50, no. 2, pp. 227‐238.<br />
7 Munro, H.M.C. & M.V. Thrusfield (2001): ʹBattered petsʹ: features that<br />
raise suspicion of non‐accidental injutiy. Journal of Small Animal Practice.<br />
Vol. 42, no. May, pp. 218‐226.<br />
8 Munro, H.M. & M.V. Thrusfield (2001): ʹBattered petsʹ: non‐accidental<br />
physical injuries found in dogs and cats. Journal of Small Animal Practice.<br />
Vol. 42, no. 6, pp. 279‐290.<br />
9 Munro, R. & H.M.C. Munro (2008): Animal Abuse and Unlawful Killing.<br />
Forensic Veterinary Pathology. 1. udgave. Saunders Elsevier, London<br />
10 Skærpelse af transportegnethedsvurderingen af dyr på samlesteder og ved<br />
udførelse.(Meddelelse af 31/05/2005). Fødevarestyrelsen, [citeret 20.<br />
November 2008]. Dato for revision: 2005. Tilgængelig på internet:<br />
http://www.foedevarestyrelsen.dk/NR/rdonlyres/11EFC217‐8706‐47E3‐<br />
9024‐<br />
8B8DD6C86E9E/0/meddelelseomskrpelseaftransportegnethedver2.pdf.<br />
11 Sager om overtrædelse af dyreværnslovgningen (Meddelelse nr. 2/2008).<br />
Rigsadvokaten, [citeret 19. November 2008]. Dato for revision: 10.01.2008.<br />
59
Tilgængelig på internet: http://www.rigsadvokaten.dk/media/RM_2‐<br />
2008.pdf.<br />
12 Om fødevarestyrelsen. Fødevarestyrelsen, Dato for revision: 21.04.2008.<br />
Tilgængelig på internet:<br />
http://www.foedevarestyrelsen.dk/OmFoedevarestyrelsen/Forside.htm.<br />
13 Veterinærrapport. Fødevarestyrelsen, [citeret 19. November 2008]. Dato for<br />
revision: 28.04.2008. Tilgængelig på internet:<br />
http://www.fvm.dk/Analyse_af_veterin%C3%A6rkontrollen.aspx?ID=196<br />
09.<br />
14 Bekendtgørelse om forretningsorden for Det Veterinære Sundhedsråd (BEK nr.<br />
121 af 28/02/2005). Retsinfo, Dato for revision: 08.03.2005. Tilgængelig på<br />
internet: https://www.retsinformation.dk/Forms/R0710.aspx?id=2714.<br />
15 Cheville, N.F. (1999): Introduction to veterinary pathology. 2. udgave. Iowa<br />
State Press,<br />
16 Glynn, L.E. (1981): Tissue Repair and Regeneration. 1. udgave. Elsevier /<br />
North‐Holland Biomedical Press,<br />
17 Eming, S.A., T. Krieg & J.M. Davidson (2007): Inflammation in wound<br />
repair: molecular and cellular mechanisms. [Review] [125 refs]. Journal of<br />
Investigative Dermatology. Vol. 127, no. 3, pp. 514‐525.<br />
18 Kondo, T. (2007): Timing of skin wounds. Legal Medicine. Vol. 9, no. 2, pp.<br />
109‐114.<br />
19 Raekallio, J. (1980): Histological Estimation of the Age of Injuries. I: J.A.<br />
Perper & C.H. Wecht (eds.): Microscopic Diagnosis in Forensic Pathology. 1.<br />
udgave. Charles C Thomas, Illinois, USA, pp. 3‐16.<br />
20 Singer, J.A. & R.A.F. Clark (1999): Cutaneous Wound Healing. The New<br />
England Journal of Medicine. Vol. 341, no. 10, pp. 738‐746.<br />
21 Hedlund, C.S. (2002): Surgery of the Integumentary System. I: T.W.<br />
Fossum (ed.): Small Animal Surgery. 2. udgave. Mosby, pp. 134‐228.<br />
22 Janssen, W. (1977): Forensische Histologie. 1. udgave. Max Schmidt‐<br />
Römhild, Lübeck<br />
23 Saukko, P. & B. Knight (2004): Knight´s Forensic Pathology. 3. udgave.<br />
Oxford University Press Inc.,<br />
60
24 Nascimento, A.P. & A.M.A. Costa (2006): Overweight induced by high‐fat<br />
diet delays rat cutaneous wound healing. British Journal of Nutrition no.<br />
96, pp. 1069‐1077.<br />
25 McGavin, M.D., W.W. Carlton & J.F. Zachary (2001): Thomson´s Speciale<br />
Veterinary Pathology. 3. udgave. Mosby, Inc., Missouri, USA<br />
26 Arnbjerg, J. (1997): <strong>Forensisk</strong> betydning af radiologiske fund. Dansk<br />
Veterinærtidsskrift. Vol. 80, no. 8,15/4, pp. 337‐346.<br />
27 Jensen, H.E., P.S. Leifsson, O.L. Nielsen, J.S. Agerholm & T. Iburg (2006):<br />
Kødkontrol. Det patoanatomiske grundlag. 1. udgave. Biofolia, Denmark<br />
28 Vanezis, P. (2001): Interpreting bruises at necropsy. Journal of Clinical<br />
Pathology. Vol. 54, pp. 348‐355.<br />
29 Cleveland‐Nielsen, A., G. Christensen & A.K. Ersbøll (2004): Prevalences<br />
of welfare‐related lesions at post‐mortem meat‐inspection in Danish sows.<br />
Preventive Veterinary Medicine. Vol. 64, no. 2/4, pp. 123‐131.<br />
30 Betz, P., J. Tubel & W. Eisenmenger (1995): Immunohistochemical<br />
analysis of markers for different macrophage phenotypes and their use<br />
for a forensic wound age estimation. International Journal of Legal Medicine.<br />
Vol. 107, no. 4, pp. 197‐200.<br />
31 Skuldersår. Fødevarestyrelsen, [citeret 18. November 2008]. Dato for<br />
revision: 09.07.2008. Tilgængelig på internet:<br />
http://www.foedevarestyrelsen.dk/Dyrevelfaerd/Landbrugsdyr_heste/Svi<br />
n/Skuldersaar/forside.htm.<br />
32 Det Veterinære Sundhedsråd. Fødevarestyrelsen, [citeret 20. November<br />
2008]. Dato for revision: 28.04.2008. Tilgængelig på internet:<br />
http://www.foedevarestyrelsen.dk/DVS/forside.htm.<br />
33 Oksekødsdivisionen. Danish Crown, [citeret 22. November 2008]. Dato for<br />
revision: 2008. Tilgængelig på internet:<br />
http://www.danishcrown.dk/page19993.aspx.<br />
34 Svinekødsdivisionen. Danish Crown, [citeret 22. November 2008]. Dato for<br />
revision: 2008. Tilgængelig på internet:<br />
http://www.danishcrown.dk/page19894.aspx.<br />
35 Tican a.m.b.a.. Tican, [citeret 20. December 2008]. Dato for revision:<br />
15.12.2008. Tilgængelig på internet: http://www.tican.dk/sw233.asp.<br />
36 Jensen, H.E. (2008): Personlig meddelelse. Professor. Institut for<br />
Sygdomsbiologi på Det Biovidenskabelige Fakultet, Københavns<br />
61
Universitet. Grønnegårdsvej 15, 1870 Frederiksberg C. Telefon:<br />
35333100.e‐mail: helj@life.ku.dk.<br />
37 Kirk, R. K. (2006): Lesions in the Locomotive System of Pigs. Department of<br />
Veterinary Pathobiology, Royal Veterinary and Agricultural University,<br />
Frederiksberg.<br />
38 Svinebestanden 1.oktober 2008.. Danmarks Statestik, emnegruppe:<br />
Landbrug, nr. 453. [citeret 10. December 2008]. Dato for revision:<br />
30.10.2008. Tilgængelig på internet:<br />
http://www.dst.dk/pukora/epub/Nyt/2008/NR453.pdf.<br />
39 Lov om ændringer af dyreværnsloven (Lov nr. 384 af 28/05/2003). Retsinfo,<br />
[citeret 10. December 2008]. Dato for revision: 30.05.2003. Tilgængelig på<br />
internet: https://www.retsinformation.dk/Forms/R0710.aspx?id=1589.<br />
62
Bilagsoversigt<br />
Bilag 1 Farvningsprotokol for Hematoxylin og Eosin<br />
Bilag 2 Farvningsprotokol for Perl´s Prussian Blue<br />
Bilag 3 Farvningsprotokol for Martius Scarlet Blue<br />
Bilag 4 Farvningsprotokol for Toluidine<br />
Bilag 5 Farvningsprotokol for Lysozym<br />
Bilag 6 Farvningsprotokol for MAC 387<br />
Bilag 7 Farvningsprotokol for Naphthol AS‐D Chloroacetate<br />
(Specifik Esterase)<br />
63
Bilag 1<br />
Farvningsprotokol for Hematoxylin og Eosin<br />
TIPS:<br />
Farvevæskerne gemmes i 14 dag, alkoholerne skiftes efter behov, dog smides alle<br />
ud hver fredag.<br />
KONTROL: Ingen, dog tjekkes hver dag de første snit som farves i mikroskopet.<br />
Evt. kar med destilleret vand<br />
1. Rindende vand 3½ min<br />
2. Mayers hæmatoxylin Opl. 1 3½ min<br />
3. Rindende vand 3½ min<br />
4. Rindende vand 3½ min<br />
5. Rindende vand 3½ min<br />
Meget brandfarlig 6. 96 % Alkohol 3½ min<br />
Meget brandfarlig 7. Eosin Opl. 2 3½ min<br />
Meget brandfarlig 8. 96 % Alkohol 3½ min<br />
Meget brandfarlig 9. 99 % Ethanol 3½ min<br />
Meget brandfarlig 10. 99 % Ethanol 3½ min<br />
Meget brandfarlig 11. 99 % Ethanol 3½ min<br />
Meget brandfarlig 12. 99 % Ethanol 3½ min<br />
Meget brandfarlig 13. 99 % Ethanol 3½ min<br />
Meget brandfarlig 14. 99 % Ethanol 3½ min<br />
64
Bilag 2<br />
Farvningsprotokol for Perl´s Prussian Blue<br />
TIPS:<br />
Brug rene glasvarer, evt. plastbæger. Undgå enhver form for metalkontaminering<br />
(pincet/metalhanke). Kaliumferrocyanidopl. er kun holdbar i 30 min. Undgå sure<br />
fiksativer og afkalkningsmidler – de kan opløse Fe 3+ .<br />
KONTROL:<br />
Fe 3+ holdigt materiale fx lever.<br />
1. Afparaffinering til dest. vand<br />
2. Kaliumferrocyanidopl . Opl. 1 30 min<br />
3. Rens i dest. vand grundigt<br />
4. Neutral rød Opl. 2 5 min<br />
5. Rindende vand kort skyl<br />
Letantændeligt 6. Dehydrering 96%, 99%<br />
ethanol<br />
Sundhedsskadelig 7. Xylen – Montering i Pertex<br />
RESULTAT:<br />
Fe 3+ salte: blå.<br />
Kerner og cytoplasma: lyserødt.<br />
Opløsning 1<br />
Kaliumferrocyanid<br />
Stamopl. A<br />
KaliumhexacyanoferratIITrihydrat 2 g<br />
Destilleret vand 100 ml<br />
Holdbar i 14 dage: Undgå kontakt med metal.<br />
Stamopl. B – 2% HCl<br />
Ætsende Konc. HCl 27 ml<br />
Destilleret vand 365 ml<br />
Arbejdsopløsning<br />
Stamopl. A 25 ml<br />
Stamopl. B 25 ml<br />
Friskfremstilles, holdbar i ca. 30 min.<br />
65
Opløsning 2<br />
1% vandig Neutralrød<br />
Neutral rød 3 g<br />
Destilleret vand 300 ml<br />
Opløsningen gemmes efter brug.<br />
Kilde: Luna, L. G, 1960. Manual of histological staining methods of the<br />
Armed Forces Institute of Pathology, 3rd, s. 184. (modificeret)<br />
66
Bilag 3<br />
Farvningsprotokol for Martius Scarlet Blue<br />
TIPS:<br />
Bouin efterfikseringen intensiverer farvningen. Kan undlades.<br />
Snittene sættes på superfrost + glas. Kontroller i mikroskop efter hvert farvebad,<br />
at den ønskede farve er opnået. Kan afhænge meget af snittykkelsen.<br />
KONTROL:<br />
Placenta væv eller andet fibrinholdigt materiale.<br />
1. Afparaffinering til vand.<br />
Giftig 2. Efterfiksering i Bouin 60°C<br />
eller<br />
Efterfiksering i Bouin 37°C<br />
3. Skyl i dest. vand<br />
4. Lillie Weigerts<br />
Jernhæmatoxylin<br />
Opl. 1 2 timer<br />
N/O<br />
Opl. 2 10 min<br />
5. Skyl i rindende vand<br />
Letantændeligt 6. Skyl i 96% ethanol<br />
Giftig 7. Martius Yellow Olp. 3 5 min<br />
8. Rens i dest. vand 3 sek.<br />
Sundhedsskadeligt 9. Crystal Ponceau 6R Opl. 4 10 – 15 min.<br />
10. Rens i dest. vand 3 sek.<br />
11. Phosphormolydænsyre 1% Opl. 5 5 min<br />
12. Rens i dest. vand 3 sek<br />
Sundhedsskadeligt 13. Methyl blå Opl. 6 10 min.<br />
14. Rens i dest vand 5 sek.<br />
Letantændeligt 15. Dehydrering 96%, 99%<br />
ethanol<br />
Sundhedsskadelig 16. Xylen – Montering i Pertex<br />
67
RESULTAT:<br />
Fibrin ungt, erytrocytter Gult<br />
Fibrin moderat, muskulatur Rød<br />
Kollagen Blå<br />
Kerner Brune<br />
OPLØSNING 1 BOUIN, Bie & Berntsen<br />
Giftig Mættet vandig Pricrinsyre 75 ml<br />
Giftig HCHO 37% 25 ml<br />
Ætsende Iseddikesyre 5 ml<br />
Giftig<br />
Giftig<br />
Giftig<br />
Ætsende<br />
Bouin: Giftig ved berøring med huden, ved indånding og ved indtagelse.<br />
Undgå enhver kontakt, brug værnemidler. Brug stinkskab. Ved kontakt<br />
vask med rigeligt vand og sæbe. Kan forårsage overfølsomhed ved<br />
hudkontakt. Danner meget følsomme eksplosive metalforbindelser.<br />
Mulighed for varig skade på helbred. Hældes ud i særlig beholder efter<br />
brug.<br />
Mættet vandig Pricrinsyre: Giftig ved berøring med huden og ved<br />
indtagelse. Undgå enhver kontakt – brug værnemidler. Ved kontakt med<br />
stoffet afvask i vand og sæbe. Kan forårsage overfølsomhed ved<br />
hudkontakt. Hældes ud i særlig beholder efter brug.<br />
Konc. Formaldehyd: Giftig ved indånding, ved hudkontakt og<br />
indtagelse. Ætsningsfare. Mulighed for varig skade på helbred. Kan give<br />
allergi ved hudkontakt. Undgå kontakt og indånding. Brug værnemiddel<br />
og stinkskab. Kommer stoffet i øjnene skylles straks grundigt med vand<br />
og kontakt læge.<br />
Iseddikesyre: Ætsningsfare. Undgå indånding af dampe. Brug<br />
værnemidler og stinkskab. Ved kontakt med øjnene skylles straks med<br />
vand og læge kontaktes.<br />
68
OPLØSNING 2 LILLIE WEIGERTS JERNHÆMATOXYLIN<br />
Stamopl A 30 ml<br />
Brandfarlig Stamopl B 10 ml<br />
Frisk fremstilles, Stamopløsningerne er holdbare.<br />
Stamopl A:<br />
Sundhedsskadeligt Ferriclorid, 6H2O 2,5% vandig 100 ml<br />
Sundhedsskadeligt Ferrosulfat, 7H2O 4,5% vandig 100 ml<br />
Ætsende HCl konc. 2,5 ml<br />
Dest. vand 48 ml<br />
Sundhedsskadeligt Ferriklorid 6H2O og Ferrosulfat: Farlig at indtage. Irriterer øjne, hud og<br />
åndedrætsorganer. Brug værnemidler. Undgå indånding af støv og damp.<br />
Kommer stoffet i øjnene skylles straks med rigelig mængde vand – kontakt<br />
læge.<br />
Ætsende HCl: Ætsningsfare. Irriterer åndedrætsorganerne. Kommer stoffet i øjnene<br />
skylles straks med vand og læge kontaktes.<br />
Brandfarlig Stamopl B:<br />
Hæmatoxylin 1 g<br />
Brandfarlig Ethanol 100 ml<br />
OPLØSNING 3 MARTIUS YELLOW<br />
Giftig Martius Yellow 0,5 g<br />
Letantændelig 2% Phosphorwolframsyre i 96% ethanol 100 ml<br />
Giftig Martius Yellow: Giftig ved indånding, hudkontakt og indtagelse. Kan<br />
ophobes i kroppen efter gentagende brug. Undgå kontakt, brug værnemidler<br />
og stinkskab. Ved kontakt med stoffet vaske straks med store mængder vand<br />
og sæbe. Ved ildebefindende kontakt læge.<br />
Letantændelig 2% Phosphorwolframsyre i 96% i Ethanol: Meget brandfarligt. Emballagen<br />
holdes tæt lukket. Holdes væk fra antændelyskilde. Rygning forbudt.<br />
OPLØSNING 4 CRYSTAL PONCEAU 6R<br />
Sundhedsskadelig Crystal Ponceau 6R 1 g<br />
Ætsende Konc. eddikesyre 2 ml<br />
Dest. vand 98 ml<br />
Sundhedsskadelig Crystal Ponceau 6R: Opført på Arbejdstilsynets liste over<br />
kræftfremkaldende stoffer. Undgå al kontakt! Håndter ikke åbne emballage<br />
uden værneudstyr. Undgå længerevarende eller gentagende eksponering.<br />
Vask hænderne ved afslutning, på skift og før spisning, rygning og<br />
toiletbesøg. Vask straks med sæbe og vand, hvis huden bliver forurenet.<br />
69
Aftag straks alt tøj som er blevet forurenet.<br />
70
OPLØSNING 5 1% PHOSPHORMOLYBDÆNSYRE<br />
Ætsende Phosphormolybdænsyre 1 g<br />
Dest. vand 100 ml<br />
Ætsende Phosphormolybdænsyre: Kommer stoffet i øjnene skylles straks grundigt<br />
med vand og læge kontaktes. Brug særligt arbejdstøj, egnede<br />
beskyttelseshandsker og briller/ansigtsskærm. Ved ulykkestilfælde eller ved<br />
ildebefindende er omgående lægebehandling nødvendig; vis etiketten hvis<br />
muligt.<br />
OPLØSNING 6 Metylblåt<br />
Sundhedsskadelig Metylblåt 1 g<br />
Konc eddikesyre 2 ml<br />
Dest. vand 198 ml<br />
Metylblåt : Håndter ikke åbne emballage uden værneudstyr. Undgå<br />
længerevarende eller gentagende eksponering. Vask hænderne ved<br />
afslutning, på skift og før spisning, rygning og toiletbesøg. Vask straks med<br />
sæbe og vand, hvis huden bliver forurenet. Aftag straks alt tøj som er blevet<br />
forurenet.<br />
Kilde: Bancroft, J. D, Stevens A, 1996. Theory and Practice of Histological techniques,<br />
4th, s. 130 (modificeret)<br />
71
Bilag 4<br />
Farvningsprotokol for Toluidine<br />
Kontrol: Trachea.<br />
1. Afparaffinering til vand.<br />
Lokalirriterende 2. 0,5M HCl pH 0,5 Opl. 1 5 min<br />
Lokalirriterende 3. 0,5% Toluidinblå i 0,5 HCl Opl. 2 30 min<br />
Lokalirriterende 4. 0,5M HCl Opl. 3 30 sek<br />
5. 0,125% Light green Opl. 4 30 sek<br />
6. Skyl i vand hurtigt<br />
Meget brandfarlig 7. Dehydrering 96%, 99%<br />
ethanol<br />
Sundhedsskadelig 8. Xylen – Montering i Pertex<br />
RESULTAT:<br />
pH 0,5: Mastcelle: blå<br />
pH 0,5: Baggrund: grøn.<br />
72
Bilag 5<br />
Farvningsprotokol for Lysozym<br />
Dyreart: gris.<br />
Kontrol væv: lymfeknude. Lever 37039‐2H<br />
Antistof: Lysozym DAKO A0099.<br />
Metode: EnVision/HRP kanin. Køres i rack.<br />
Er afprøvet på hest, mus, hund og kat og virker. Der er signal, men kan<br />
optimeres.<br />
Afparaffinering til dest. vand<br />
Skyl i TBS i 2 × 5 min<br />
Blokering for endogen peroxidase i 3% H2O2 i TBS i 15 min<br />
Skyl i TBS i 2 × 5 min<br />
Forbehandling i 0,1% trypsin i 2t. ved 37°C<br />
Skyl i TBS i 2 × 5 min<br />
Blokering med Ultra vision block 5 min<br />
Primært antistof lysozym ( DAKO A0099) fortyndet 1:200 i<br />
0,1% BSA og 0,01% tween 20, 4°C n/o<br />
Nonsens kontrol kanin immunoglobulin fraction (DAKO X0903) fortyndet<br />
1:656 i 0,1% BSA og 0,01% tween 20, 4°C n/o<br />
Skyl 3 × i TBS med 0,5% triton‐X‐100<br />
Onevision HRP i 30 min<br />
Skyl 1 × i TBS med 0,5% triton‐X‐100, derefter i 2 × TBS<br />
DAB i 10 min<br />
Skyl 2 × i TBS<br />
Mayers hæmotoxylin i 10 sek<br />
Skyl i rindende vand i 1 min<br />
Skyl i destilleret vand i 4 min<br />
Montering med glycerol‐ gelatine.<br />
Opløsninger:<br />
TBS pH 7,6:<br />
Til 4 L ion byttet vand tilsættes der;<br />
14,54g Tris, Hydrochlorid ( Tris ( hydroxymethyl )‐<br />
aminomethanhydrochlorid ).<br />
3,449g Tris Base ( Tris ( hydroxymethyl)‐ aminomethan ).<br />
34,0g NaCl ( natriumchlorid ).<br />
Efter omhyggelig omrøring indstilles pH til 7,6.<br />
73
Trypsin: 0,1g trypsin til 100 ml TBS. PH indstilles til 7,8 med NaOH, og<br />
forvarmes inden brug ved 37°C<br />
3% H2O2<br />
100 ml TBS tilsættes 10 ml 30% H2O2 . Opløsningen blandes godt.<br />
Denne procedure foregår i stinkskab.<br />
Skal laves lige inden brug og skal stå i mørke ved inkubering.<br />
0,1% BSA i TBS: Tilsæt tween 20 inden brug, ca 1µl til 10 ml.<br />
Færdiglavet, ligger i fryseren.<br />
Hvis ikke der er flere rør med 0,1% BSA i TBS, se da note<br />
” reagenser til immunhistokemi ”.<br />
Ultravision block og onevision. færdiglavede fra LAB‐vision corporation,<br />
Fremont, CA 94531<br />
DAB:<br />
DAB tabletterne skal stå i 15 min. ved stuetemperatur.<br />
1 tablet opløses i 10 ml destilleret vand. Opløsningen skal stå et par min.<br />
Tilsæt 100 µl 3% H2O2 inden brug.<br />
Mayers hæmotoxylin: Færdiglavet. ( Bie og Berntsen 332174, varenr. LAB00254 )<br />
Glycerol‐ gelatine: Færdiglavet. Opvarmes inden brug.<br />
74
Bilag 6<br />
Farvningsprotokol for MAC 387<br />
Dyreart: svin.<br />
Kontrol væv: lymfeknude<br />
Antistof: Serotec MCA874G/MAC387<br />
Metode: PowerVision+ HRP kit, mus‐kanin.<br />
Alt foregår ved stuetemperatur, hvis ikke andet er opført.<br />
Afparaffinering til vand<br />
Skyl i destilleret vand i 2 × 5 min<br />
Forbehandling i TED pH 9,0 i 2 × 5 min, hvile i buffer i 15 min<br />
Skyl i TBS i 2 × 5 min<br />
Blokering for endogen peroxdase i 0,6% H2O2 i 20 min<br />
Skyl i TBS i 2 × 5 min<br />
Ultra vision block i 5 min<br />
Primært antistof MAC387 fortyndet 1:500 i 2% BSA/TBS n/o<br />
Nonsens kontrol IgG1 (DAKO X0931) fortyndet 1:50 i 2% BSA/TBS n/o<br />
Skyl i TBS i 2 × 5 min<br />
Enhancer i 20 min<br />
Skyl i TBS i 2 × 5 min<br />
HRP‐Polymer i 30 min<br />
Skyl i TBS i 2 × 5 min<br />
AEC i 10 min<br />
Skyl i destilleret vand i 2 × 5 min<br />
Mayers hæmotoxylin i 10 sek<br />
Skyl i rindende vand i 1 min<br />
Skyl i destilleret vand i 4 min<br />
Montering med glycerol‐ gelatine.<br />
Opløsninger:<br />
TBS pH 7,6:<br />
Til 4 L ion byttet vand tilsættes der;<br />
14,54g Tris, Hydrochlorid ( Tris ( hydroxymethyl )‐<br />
aminomethanhydrochlorid ).<br />
3,449g Tris Base ( Tris ( hydroxymethyl)‐ aminomethan ).<br />
34,0g NaCl ( natriumchlorid ).<br />
Efter omhyggelig omrøring indstilles pH til 7,6.<br />
75
TED buffer pH 9,0: Færdiglavet, hvis ikke der er mere, se da note i ” reagenser til<br />
immunhistokemi ”.<br />
0,6% H2O2 :<br />
245 ml TBS tilsættes 5 ml 30% H2O2. Opløsningen blandes godt.<br />
Denne procedure foregår i stinkskab.<br />
Skal laves lige inden brug og stå i mørke ved inkubering.<br />
2% BSA i TBS: Færdiglavet, ligger i fryseren.<br />
Hvis ikke der er flere rør med 2% BSA i TBS, se da note<br />
” reagenser til immunhistokemi ”.<br />
Ultra vision block, primary antibody block og HRP polymer færdiglavede fra<br />
LAB‐vision corporation, Fremont, CA 94531<br />
AEC: Færdiglavet. Lab vision corporation<br />
Proceduren foregår i stinkskab. Husk handsker.<br />
Skal fremkalde i mørke.<br />
Mayers hæmotoxylin: Færdiglavet. ( Bie og Berntsen 332174, varenr. LAB00254 )<br />
Glycerol‐ gelatine: Færdiglavet. Opvarmes inden brug.<br />
76
Bilag7<br />
Farvningsprotokol for Naphthol AS‐D Chloroacetate<br />
(Specifik Esterase)<br />
77