DAS BAKTERIEN-GENOM

DER ORIGIN
Initiation der Chromosomenreplikation bei E. coli
Abb.: Chromosomenkarte von E. coli mit Origin- und Terminations-Region
-Die meisten bakteriellen Chromosomen besitzen nur 1 Origin;
-Der ori ist eine bestimmte DNA Sequenz an der die Replikation startet;
-Im E. coli-Chromos. konnte der ori auf ca 245 bp eingegrenzt werden.
-Es handelt sich dabei um eine innerhalb der Enterobacteriaceae sehr
konservative Region - mit charakteristischen Sequenzmotiven.
Die Replikation beginnt an einem bestimmten Punkt der als 'origin' (oriC) bezeichnt
wird. Er liegt bei 84 min auf der Chromosomenkarte. Am Anfang schien es schier
unmöglich, die molekularen Ereignisse bei der Initiation der Replikation am
Chromosom selbst zu untersuchen, da das Chromosom viel zu groß war. Dieses
Problem konnte durch die Klonierung des oriC auf ein Plasmid überwunden werden.
Solche Plasmide werden als Minichromosomen bezeichnet. Die Minichromosomen
werden autonom und im Takt mit der chromosomalen DNA-Replikation repliziert. Der
oriC konnte aber auch auf Bakteriophagen-DNA übertragen werden, die dann ebenfalls
eine autonome Replikation aufwiesen. Es stellte sich heraus, daß die
Minichromosomen bidirektional repliziert werden, und daß ihre Replikation von den
gleichen Faktoren abhängig ist wie die Replikation des Chromosoms. Die Ermittlung
der Nukleotidsequenz des oriC (1979) hat die Tür für moderne molekularbiologische
Experimente geöffnet.
Abb.: 15
Funktionale Motive im oriC von E. coli
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