DAS BAKTERIEN-GENOM
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Elemente der Initiation der Replikation<br />
Replikation ist bidirektional<br />
origin ist ca 245 bp lang<br />
5 DnaA Binderegionen<br />
11 GATC (SauIIIA) Sequenzmotive<br />
ENZYME:<br />
a) DnaA/ tritt in Wechselwirkung mit RNA-Polymerase<br />
b) DnaB und C / Primosomzusammensetzung<br />
c) Dam/ A-Methylierung an -GATCd)<br />
DNA-Polymerasen<br />
e) RNA-Polymerase<br />
f) Gyrase<br />
-Für die Initiation der Replikation sind noch nicht genauer charakterisierte Proteine<br />
beteiligt.<br />
-Ein obligatorischer Schritt für den Start der "leading" Strangsynthese ist eine<br />
Transkription der ori Region durch die RNA-Polymerase;<br />
-Bei dem Plasmid Col E-1 kann die RNA direkt als Primer ververwendet werden -<br />
nachdem die RNA durch RNase-H (Hybrid) verkürzt wurde.<br />
-Bei der chromosomalen DNA hat jedoch die durch die RNA-Pol. transkribierte RNA<br />
keine Primer-Funktion;<br />
-Die einzige Rolle der RNA-Pol. ist vermutlich die, den Doppelstrang zu öffnen, damit<br />
das Primosom besser binden und sich assoziieren kann.<br />
Die minimale Sequenz des oriC konnte auf 245 bp eingegrenzt werden. Flankiert ist der<br />
origin von folgenden Genen:<br />
rechts von oriC :<br />
mioC: (modulation of initiation at oriC); kodiert für ein 16 kDa Protein mit unbekannter<br />
Funktion;<br />
asnC: ist ein Transkriptionsaktivator des asnA-Gens und hat einen positiven Effekt auf<br />
die post-transkriptionale Expression von gidA;<br />
asnA: kodiert für eines der beiden Asparaginsynthasen in E. coli.<br />
links von oriC :<br />
gidA und gidB : (glucose inhibition of division); eine Mutation im gidA Gen resultiert in<br />
einer Verringerung der Wachstumsgeschwindigkeit und in einer Glukosehemmung der<br />
Zellteilung.<br />
unc - oder atp - Operon kodieren für Untereinheiten der membrangebundenen FoF1<br />
ATP Synthase.<br />
Die Struktur des oriC<br />
Am linken Ende von oriC sind AT- reiche Sequenzabschnitte.<br />
R1-4 und M stellen Konsensussequenzen dar, an denen das Iniationsprotein DnaA<br />
(DnaA-Boxen) bindet.<br />
GATC - Sequenzen kommen bei allen enteriobakteriellen origins etwa 9-16 Mal vor.<br />
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