(Gadovist®) mit dem jodhaltigen Kontrastmittel Iohexol - Universität ...

2 Patienten und Methoden
NAG (N-Acetyl-β-D-Glucosaminidase) ist ein lysosomales Enzym, das u.a. in
den proximalen Tubuluszellen lokalisiert ist und einen sehr sensitiven, aber
nicht spezifischen Marker für Einflüsse auf das Tubulussystem darstellt.
Für die Bestimmung von Angiotensin und Endothelin wurden EDTA-Monovetten
mit 100 µl Trasylol und 50 µl Phenantrolin versetzt und auf Eis gelagert. Die
EDTA-Monovette für die Renin-Bestimmung wurde nur auf Eis gelagert.
Je Probe wurden 10 ml Blut abgenommen und auch wieder sofort auf Eis
gelagert. Die Proben wurden mit 4000 Upm für 10 min zentrifugiert, dann
wurden je Hormon 2 x 1,5 ml Serum in Eppendorf-Cups pipettiert und bei -20˚C
gelagert.
Die Messung der Hormone erfolgte am Schluss der Studie gesammelt durch
das Nephrologisch-Pharmakologische Institut der Medizinischen
Universitätsklinik Tübingen (Leiter: Prof. Dr. T. Risler).
2.3.2.1 Renin
Wir verwendeten den Testsatz RENIN MAIA von BIOCHEM
IMMUNOSYSTEMS. Dabei wird die Aktivität von Renin im Plasma nicht direkt,
sondern durch die radioimmunologische Bestimmung von Angiotensin I
ermittelt. Vor der radioimmunologischen Bestimmung wird das Plasma
inkubiert, und unter standardisierten Bedingungen durch Renin aus
Angiotensinogen Angiotensin I gebildet. Ein Enzyminhibitor verhindert den
enzymatischen Abbauschritt von Angiotensin I während des
Entwicklungsvorgangs. Die Entwicklung von Angiotensin I verläuft zeitlich
linear, man erhält also die gleichen Ergebnisse bei unterschiedlicher
Entwicklungszeit. Nach der Entwicklungeszeit wird der Radioimmunoassay
durchgeführt. Unmarkiertes Antigen (Patientenserum), radioaktiv markiertes
Antigen und ein spezifisches Antiserum werden in definierten Mengen in einem
Röhrchen gemischt und inkubiert. Die radioaktiv markierten und die
unmarkierten Antigene konkurrieren während der Inkubation um die begrenzte
Anzahl von Bindungsstellen am 1. Antikörper. In dieser Reaktion bilden
markiertes und unmarkiertes Antigen mit dem Antiserum Antigen-Antikörper-
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