Diss_Meir_Michael.pdf (2304 KB) - OPUS Würzburg - Universität ...

weiteren Differenzierung veränderte sich die Konzentration von E- Cadherin
und Dsg2 nach Erreichen der Konfluenz nicht mehr, während die Konzentration
der Occludenskontaktproteine Occludin und Claudin1 stetig anstieg.
Hinweisend für eine vollständige Differenzierung ist auch der Anstieg der
Konzentration des Enterozyten Markers Villin zum Zeitpunkt C14 im Vergleich
zu C7.
Abbildung 8: WB (Entwicklung der Proteinmenge)
Westernblots zeigten die Veränderungen der Proteinmenge von Villin, E-Cadherin, Dsg 2
Occludin, Claudin 1 und ZO-1 im Verlauf der Differenzierung vom Zeitpunkt C0 bis zum
Zeitpunkt C21. Man erkennt das insbesondere das Occludenskontaktprotein Occludin und der
Enterozytenmarker Villin bis zum Zeitpunkt C14 ein verstärktes Signal im Western Blot zeigen
(Anzahl der Versuche n>4).
Des Weiteren erfolgten funktionelle Messungen des in vitro Models der
Darmbarriere durch Messungen des Permeabilitätskoeffizienten mittels
Transwellfiltern und Messungen des transepithelialen elektrischen
Widerstandes. Der Permeabilitätskoeffizient (P E ) erreichte zum Zeitpunkt der
Konfluenz für 70kDa FITC markiertes Dextran einen Wert von 1.6 ± 0.23
cm/s*10 -6 , wohin gegen der P E bei 4kDa FITC Dextran einen signifikant
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