Diss_Hoehne_Christian.pdf (10777 KB) - OPUS Würzburg

2. Material und Methoden
2.3 Intravitalmikroskopie am Musculus cremaster
2.3.1 Einleitung und Aufrechterhaltung der Narkose
Zur Einleitung der Narkose wurde die in Tabelle 2.1 beschriebene Narkoselösung
verwendet. Aus diesem Ansatz wurden initial 8 µl pro Gramm Körpergewicht
intraperitoneal injiziert.
Substanz Konzentration Dosierung initial Dosierung Perfusor
Fentanyl 0.004 mg/ml 0.032 mg/kg KGW 0.01 mg/kg KGW/h
Midazolam 0.440 mg/ml 3.520 mg/kg KGW 1.10 mg/kg KGW/h
Medetomidin 0.044 mg/ml 0.352 mg/kg KGW 0.11 mg/kg KGW/h
Tabelle 2.1: Zusammensetzung der Narkoselösung
Nach ca. 10 Minuten war eine ausreichende Narkosetiefe erreicht. Nun konnte mit
der Präparation auf dem Versuchstisch begonnen werden. Die rechte Vena jugularis
wurde freipräpariert und kanüliert. Damit war es möglich während dem gesamten
Zeitraum der Intravitalmikroskopie mittels einer Infusionspumpe eine konstante
Tiefe der Narkose aufrechtzuerhalten. Bei diesen Versuchen betrug die Infusionsrate
2.5 µl je Gramm Körpergewicht pro Stunde. Am Ende des Experiments wurden die
Tiere durch zervikale Dislokation euthanasiert.
2.3.2 Präparation der Vena jugularis zur Aufrechterhaltung der Narkose
Um ein Einbringen von Haaren in das zu präparierende Areal zu verhindern,
wurden die Haare des Versuchstieres an der rechten Seite der Trachea mit Paraffinöl
glattgestrichen. Danach wurde mit einem Hautschnitt an dieser Stelle die rechte
V. jugularis chirurgisch freipräpariert und drei Ligaturen in Form von Schlingen um
die V. jugularis externa gelegt. Die oberste Ligatur wurde sofort zugezogen und
mittels zweier chirurgischer Knoten gesichert. Mit Hilfe einer mikrochirurgischen
Pinzette wurde nun die Vene etwas angehoben und mit einer kleinen chirurgischen
Schere inzidiert. Über diese Öffnung wurde die Vene mit einem ausgezogenen
Polyethylenschlauch (Innendurchmesser ~0.28 mm) katheterisiert. Dieser war mit
Anästhesielösung blasenfrei gefüllt. Nachdem die korrekte Lage im Lumen des
Gefäßes durch Aspiration von Blut überprüft worden war, wurden die zwei
verbliebenen Schlingen festgezogen und verknotet. Damit war gewährleistet, dass
sich die Schlingen sowohl um das Gefäß als auch um den Katheter zusammenzogen.
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