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FORSCHUNG
nach der/den aktiven Komponente(n)
wurde ein neues Migrations-Zellkulturmodell
entwickelt, das auf der Basis
humaner Keratinozyten arbeitet. Verwendet
werden primäre, nicht passagierte,
undifferenzierte Zellen in calciumarmem
Medium, um zu verhindern,
daß die Zellen ihr Aussehen und ihr Migrationspotential
verlieren. Die Keratinozyten
werden serumfrei kultiviert, die
Isolierung der benötigten Hautzellen
bedarf mehrerer Schritte, um eine
Kontamination an Fibroblasten auszuschließen.
Die konfluent angewachsenen Zellen
werden zur Hälfte abgekratzt („scratched“)
und die zu testenden Extrakte,
die mit 2-OH-propyl-Cyclodextrin in Lösung
gehalten werden, zugegeben.
Dann können die Zellen für 24 Stunden
migrieren. Nach dem Abstoppen der
Migration werden die Zellen ausgezählt,
die über die gesetzte Startlinie
hinaus migriert sind, als Positivkontrolle
wird hEGF eingesetzt. Die Fraktionen
werden in mehreren Konzentrationen
getestet, um den wirksamen Konzentrationsbereich
ausfindig zu machen.
Anhand dieses Screeningsystems
sollen die über Vakuum-Flüssig-Chromatograpie
(VLC) getrennten Rohextrakte
getestet werden, die wirksamsten
Fraktionen über Hochdruck-
Flüssigkeit-Chromatographie (HPLC)
getrennt, erneut getestet und mittels
ein- und zweidimensionaler NMR-
Spektroskopie sowie Massenspektroskopie
(MS) strukturaufgeklärt werden.
Als wirksame Fraktionen sowohl der
WIRKUNGSÜBERSICHT
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Zeit
(Tage)
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T
Kontrolle
saarländischen als auch der chinesischen
Maulwurfsgrillen wurden ungesättigte
Fettsäuren und Fettsäureester
extrahiert, vor allem Linolsäuremethylester
ist neben den verschiedenen Ölsäurederivaten
quantitativ sehr viel
vorhanden. Linolsäure z. B. stimuliert
bereits in geringen Konzentrationsbereichen
die Zellmigration signifikant,
die therapeutische Anwendung findet
sich z. B. in Linola-Cremes oder Salben;
eine Mixtur verschiedener raffi-
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T
Hydrophile
Fraktion
(chin. Grille)
Abb. 7:
Negativkontrolle,
Medium ohne Zusätze.
Abb. 8:
Positivkontrolle
hEGF (10 ng/ml).
Epithelialisierung
Neovaskularisierung
T
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Lipophile
Fraktion
(saarl. Grille)
Rapsöl
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Rektaldrüsen
nierter Öle fand sich z. B. in den nicht
mehr auf dem Markt befindlichen Granugenol-Zubereitungen.
Die Wirksamkeit der Maulwurfsgrillenzubereitung
scheint demnach eine
ganz einfache Erklärung zu haben: die
Bereitstellung von mehrfach ungesättigten
Fettsäuren, die über ihr Wasserbindungsvermögen,
ihre antibiotische
das Wundheilungsgeschehen positiv
beeinflussen. Die Natur als Vorbild –
eine Möglichkeit, wirksame Prinzipien
von der Natur um uns herum nutzbar
zu machen, als Leitstoffe, als Reinstoffe,
auf jeden Fall ein guter Ansatz, nach
neuen Arzneimitteln zu forschen...
....die reinste Apotheke!
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8
Markus Zimmer
Apotheker
Pharmakognosie und analytische Phytochemie,
Universität des Saarlandes,
Postfach 151150,
66041 Saarbrücken
in Zusammenarbeit mit
J. Frank, Unfallchirurgie
der Universität des Saarlandes und
J. H. Barker, Div. of Plastic and
Reconstructive Surgery, University
of Kentucky, Louisville, USA
Literatur bei der Redaktion
24 HARTMANN WundForum 4/97