Stoffanreicherung in der Vakuole nach dem Ionenfallenprinzip

Stoffanreicherung in den Vakuolen von Zwiebelzellen nach dem
Ionenfallenprinzip
Theorie
Die Neutralrotmoleküle sind lipophil und können deshalb Membranen durchdringen. Im
sauren Milieu der Vakuole bindet das lipophile Neutralrot Wasserstoff-Ionen (H + ) und
verliert somit als Neutralrot-Kation seinen lipophilen Charakter. Da die Vakuolenmembran
für hydrophile Substanzen nicht durchlässig ist, wird das Neutralrot-Kation in der Ionenfalle
der Vakuole gefangen. Es wandern bis zur Einstellung des Konzentrationsgleichgewichtes
Moleküle in die Vakuole ein.
Mit diesem Versuch lässt sich die Vakuole und ihre Größe recht anschaulich darstellen. Es ist
zu erkennen, dass, im Gegensatz zu tierischen Zellen, die Vakuole einen großen Teil der
pflanzlichen Zelle einnimmt.
Der Versuch verdeutlicht auch den Stofftransport über Membransysteme. Es muss jedoch
betont werden, dass normalerweise die meisten Substanzen aktiv durch spezifische
Carriersysteme über Membranschranken transportiert werden.
Praktischer Teil
Handwerkszeug
Pinzette, Zeichenmaterialien
I. Einstellung der Köhlerschen Beleuchtung
1. Objektiv 10x einschwenken
2. Kondensor auf Hellfeldposition (kein Kontrastelement im Strahlengang), evtl.
Kondensorfrontlinse einschwenken
3. bekanntes Präparat fokussieren
4. Leuchtfeldblende schließen – bei guter Zentrierung des Kondensors wird das
Präparat nur noch aus der Mitte des Sehfelds heraus beleuchtet
5. Kondensor auf- bzw. abwärts drehen, bis scharfe Kanten der Leuchtfeldblende
abgebildet werden.
6. Leuchtfeldblende durch Zentrierschrauben am Kondensor in das Bildzentrum
bringen
7. Leuchtfeldblende bis knapp über den Sehfeldrand öffnen
8. Anpassung der Aperturblende des Kondensors bis sich hinsichtlich Auflösung und
Kontrasteindruck der optimale Bildcharakter einstellt