6. LC/MS Diskussionstreffen, 29. Nov. 2005, Wuppertal ABSTRACTS

Abstracts: 6. LC/MS Diskussionstreffen, 29. Nov. 2005, Wuppertal 11
Spezielle Aspekte der Stabilisotopenverdünnungsanalyse von Naturstoffen
am Beispiel von Mykotoxinen
M. Bretz, M. Beyer, B. Cramer, H.-U. Humpf
Westfälische Wilhelms-Universität, Institut für Lebensmittelchemie
Corrensstr. 45, D-48 149 Münster
Mykotoxine sind toxische Sekundärmetabolite, die von Schimmelpilzen während des
Wachstums auf Lebens- und Futtermitteln gebildet werden. Bei Verzehr stellen sie für
Mensch und Tier aufgrund verschiedener toxikologischer Effekte ein potentielles
Gesundheitsrisiko dar. Zur Zeit sind ca. 400 verschiedene Mykotoxine bekannt, wobei die
Gruppen der Aflatoxine, Fumonisine und Trichothecene, sowie Ochratoxin A, Patulin und
Zearalenon zu den bedeutendsten zählen. In den letzten Jahren wurden auf nationaler und
internationaler Ebene Grenzwerte für die wichtigsten Mykotoxine festgelegt, um die
Gefährdung der Verbraucher zu minimieren. Diese dienen der amtlichen
Lebensmittelüberwachung als Beanstandungsgrundlage und sind damit von erheblicher
wirtschaftlicher Bedeutung.
Für die Kontrolle der Grenzwerte setzen sich immer stärker HPLC-MS/MS-Multimethoden
durch, die die empfindliche und spezifische qualitative und quantitative Erfassung der
wichtigsten Toxine in einem Analysengang ermöglichen. Problematisch sind hier allerdings
Matrixeffekte die insbesondere die quantitative Bestimmung erschweren. Um trotzdem
höchste Genauigkeit und Reproduzierbarkeit der Ergebnisse zu gewährleisten, stellt die
Isotopenverdünnungsanalyse unter Verwendung von stabilisotopenmarkierten Analyten als
interne Standards die Methode der Wahl dar. Mit dieser Technik lassen sich Extraktions- und
Clean-Up-Verluste sowie Matrix-Effekte und Massenspektrometer-Drift kompensieren.
Gerade bei Naturstoffen ist allerdings die Verfügbarkeit isotopenmarkierter Standards ein
limitierender Faktor, da eine Totalsynthese selten möglich, die Partialsynthese an komplexen
Molekülen schwierig und die biosynthetische Herstellung sehr aufwendig und teuer ist.
Gelingt die Produktion von isotopenmarkierten Standards trotzdem, so erreichen der Grad
der Isotopenmarkierung und das Masseninkrement oftmals nicht die aus der Pharma- und
Rückstandsanalytik bekannten Werte. Der praktische Umgang mit diesen Phänomenen und
die exakte Quantifizierung unter Verwendung derartiger isotopenmarkierter Standards werden
am Beispiel ausgewählter Mykotoxine diskutiert.