Efectos de alicina y enalapril en ratas con hipertensiÃ³n ...

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ALICINA Y ENALAPRIL CON HIPERTENSIÓN, HIPERLIPIDEMIA E HIPERINSULINEMIA 411 Materiales y métodos La alicina se produjo como sustancia pura por la reacción de la alinasa de ajo inmovilizada con una preparación de aliína sintética [(+)S-2-propenil-L-cisteína-S-óxido], idéntica en propiedades químicas a la aliína natural, según Mirelman et al. 18 . La pureza y concentración de la alicina obtenida se determinó por cromatografía líquida de alta resolución (CLAR), como se había publicado anteriormente 17,19 . En los experimentos descritos en este estudio, la concentración de alicina usada fue de 1,8-2,0 mg/ml en 50 mmol/l de tampón fosfato a pH 6,5. La solución pura de alicina, mantenida a 4ºC, fue relativamente estable durante las semanas del experimento y la concentración se determinó sistemáticamente. Ratas macho de la raza Sprague-Dawley (Anilab, Tal hasahachar, Israel), que pesaban inicialmente 240-250 g, fueron alimentadas con pienso estándar para ratas (Koffolk, Tel Aviv) y mantenidas en un ciclo de 14 horas de luz/10 horas de oscuridad. Tres grupos compuestos de 30 ratas se alimentaron con una dieta enriquecida en fructosa (Harlan, Teklad, Madison, WI) durante cinco semanas, de la forma siguiente: grupo 1, 10 animales se alimentaron sólo con fructosa (grupo control); grupo 2, 10 animales recibieron 8 mg/kg/día de alicina por intubación oral durante las dos últimas semanas de la dieta con fructosa; grupo 3, 10 animales recibieron 20 mg/kg/día de enalapril en el agua de beber durante las dos últimas semanas de la dieta con fructosa. La dieta con fructosa se compuso de un 21% de proteínas, 5% de grasa, 60% de carbohidratos (fructosa), 0,49% de sodio y 0,49% de potasio. Esta composición fue similar a la de la dieta del pienso, excepto en que la fructosa sustituyó al almidón como componente carbohidrato. La presión arterial sistólica se midió una vez a la semana y los triglicéridos y la insulina tres veces: inicialmente antes del alimento con fructosa (x 0 ), después de tres semanas de alimentación con fructosa (x 1 ) y después de dos semanas más (x 2 ). La presión arterial sistólica se midió con las ratas conscientes por el método indirecto de la anilla en la cola, usando un esfigmomanómetro y un transductor de pulso neumático (Narco Biosystems, Houston, Tejas). Se registró como PAS la media de cinco lecturas consecutivas. Se recogieron muestras de sangre por punción del seno retrorbital, bajo anestesia, después de 5 horas de ayuno al comienzo del experimento y a las 3 y 5 semanas. Las muestras se centrifugaron, se separaron en alícuotas, se congelaron y se determinó en ellas la concentración de insulina (Rat insulin 125 I Ria kit, Incstar, Stillwater, MN) y de triglicéridos (Equipo GPO-PAP de triglicéridos, Boehringer Mannheim, Alemania). Los datos se analizaron usando a cada rata como su propio control. Se calcularon dos diferencias: 1) ∆1 que es la diferencia entre tres semanas de alimentación con fructosa (x 1 ) y los valores iniciales (x 0 ); y 2) ∆2 que es la diferencia entre los niveles después de cinco semanas (x 2 ) y x 1 . Las medias de los grupos iniciales (x 0 ) se compararon por análisis de varianza (ANOVA). Se investigaron los cumplimientos del modelo (distribución normal de residuos, igualdad de varianza) y, cuando se violaron, se aplicó el análisis de varianza por rangos de Kruskal-Wallis de una vía. Se computadorizaron la estadística descriptiva, las medias y los errores estándar de ∆1 y ∆2 (ajustados para x 0 y x 1 , respectivamente). Debido a las comparaciones múltiples, sólo los valores de p
412 AJH (Ed. Esp.) 2001; 3: 410-414 AJH-OCTUBRE 1997-VOL. 10, N.º 10, PARTE 2 32,7 mg/dl y 58,6 ± 31,3 mg/dl, respectivamente). No hubo diferencias significativas en los valores iniciales de la PA en los tres grupos de tratamiento (p>0,008). En la Tabla 1 se muestra que los modelos de insulina de la PA de los tres grupos –alicina, enalapril y fructosa solo (controles)– fueron similares después de tres semanas recibiendo la dieta de fructosa (∆1), y que los triglicéridos variaron sólo en el grupo que recibió enalapril. Después de otras dos semanas más de tratamiento, enalapril y alicina redujeron la PA significativamente en comparación con la del grupo que recibió la dieta de fructosa sólo (p
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