Tema 7. TECNICAS BASICAS DE BM.pdf - VeoApuntes.com

Alberto Gómez Esteban & Laura del OlmoEn esta grafica podemos comprobar que la muestra verdetiene menor material genético que las otras dos debidoa que tarda más ciclos en cruzar el crossing point.La PCR a tiempo real cuantitativa sirve para cuantificar la carga viral de un paciente(averiguar la cantidad de material genético viral presente en sangre).La PCR a Tiempo Real es una PCR tradicional en la que se va cuantificando el producto deampliación a medida que se genera con fluorescencia.Posibilidad de construir rectas de calibrado conociendo la concentración exacta del DNA einterpolando el resultado de fluorescencia obtenido en la muestra cuantificando la cantidadde DNA.A. PCR a Tiempo Real Cuantitativa: cuantifica cargas virales humanas.Hay que construir rectas de calibrado midiendo las fluorescencias que generan muestras deconcentraciones conocidas.En una batería de diluciones seriadas de concentración conocida medimos la concentraciónhaciendo una recta, e interpolando en la recta calculamos la concentración de productoamplificado de PCR que hay en mi muestra.Aplicaciones de la PCR a tiempo real cuantitativa: Detección de organismos genéticamente modificados en los cuales se detectadirectamente el DNA del transgen o DNA extraño. En realidad se detecta el promotory el terminador de ese transgen para determinar GMOs (Organismos GenéticamenteModificados).8